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        B16F10 melanoma cell을 이용한 캐모마일(Matricaria chamomilla L.) 추출물의 미백 효과

        조재범 ( Jae-bum Jo ),김명욱 ( Myung-uk Kim ),이은호 ( Eun-ho Lee ),김예진 ( Ye-jin Kim ),조은비 ( Eun-bi Cho ),강인규 ( In-kyu Kang ),조영제 ( Young-je Cho ) 한국응용생명화학회(구 한국농화학회) 2018 Journal of Applied Biological Chemistry (J. Appl. Vol.61 No.3

        기능성 천연물 소재로서의 가능성을 검토하고자 캐모마일 추출물의 미백 효과를 조사하고 melanin 생성 반응에 관여하는 물질 억제에 대한 기전을 규명하고자 하였다. 캐모마일을 water와 60% ethanol을 이용하여 추출하였고, 얻어진 추출물을 phenolic농도별로 설정하여 tyrosinase 저해 활성을 알아보았을 때, water추출물의 경우 효과가 미비하였고, 60% ethanol 추출물에서는 농도 의존적으로 저해 활성이 나타내어 melanin 생성 저해 효과가 있을 것으로 판단되었다. 캐모마일 60% ethanol 추출물을 동결건조하여 얻어진 분말을 이용하여 B16F10 melanoma cell에 대한 세포 독성을 측정 결과, 75 μg/mL의 농도에서부터 독성이 관찰되어 농도 구간을 10, 25, 50 μg/mL으로 선정하였다. α-MSH로 자극한 B16F10 melanoma cell에서 melanin 생성량을 측정하여 캐모마일의 melanin 성성 억제 효능과 melanin 생성에 영향을 미치는 단백질인 tyrosinase, MITF, TRP-1, TRP-2의 단백질 발현 억제 효과를 알아본 결과, 캐모마일의 농도가 높아짐에 따라 농도 의존적으로 melanin 생성 함량이 감소하였고, tyrosinase, TRP-1, TRP-2, 등의 단백질 발현량 또한 감소하는 것을 확인할 수 있었다. 따라서 캐모마일 추출물은 B16F10 melanoma cell에서 melanin의 생성을 억제하고, melanin생성 관련 단백질발현을 억제하는 효과가 있음을 확인하였다. 위의 결과들로 인하여 캐모마일은 미백 기능성 식품 산업화를 위한 유용한 자원으로 활용 될 것으로 예상되며, 추후 산업적 응용을 위한 지속적인 연구가 진행되어야 할 것으로 판단되었다. Matricaria chamomilla L. has been used as a bath agent in Europe because of its sterilization effect on the skin. Flowers contain terpenes, flavonoids are effective in relieving inflammation. Matricaria chamomilla L. has been reported to have various drug efficacies such as sedation, anti-diabetic effect and anti-arthritic effect, but there is little research on the scientific efficacy of whitening effect. The purpose of this study was to examine the whitening effect of Matricaria chamomilla L. extract and to investigate the mechanism of inhibition of melanogenesis. The extracts were used to determine tyrosinase inhibitory activity. The tyrosinase inhibitory activity of extracts was ineffective for water extract but in 60% ethanol extract was shown in a concentration-dependent manner. B16F10 melanoma cell was measured using a powder obtained by lyophilization of 60% ethanol extract. The toxicity was observed at a concentration of 75 μg/mL. And concentration range was selected to be at most 50 μg/ mL. The effect of tyrosinase, MITF, TRP-1 and TRP-2 on the expression of melanin protein was investigated in melanoma cells of B16F10 melanoma cells. As a result, it was confirmed that as the concentration of the extract increased, the melanogenesis level decreased and the protein expression level also decreased in a concentration dependent manner. Therefore, it was concluded that Matricaria chamomilla L. extract inhibited melanogenesis in cells. Based on the above results, it is expected that it will be used as a useful basic data for industrialization of whitening functional food of Matricaria chamomilla L.

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        번행초(Tetragonia tetragonioides)로부터 추출한 Phenolic Compounds의 미용 식품 활성

        조재범(Jae-Bum Jo),이은호(Eun-Ho Lee),조영제(Young-Je Cho) 한국식품영양과학회 2016 한국식품영양과학회지 Vol.45 No.3

        본 연구는 물과 ethanol을 추출용매로 사용한 번행초(Tetragonia tetragonioides) 추출물이 미용 식품 소재로 사용 가능한 기능성을 증명하고자 하였다. Phenolic compounds는 물 추출물에서 3.29 mg/g, 50% ethanol 추출물에서 4.14 mg/g의 결과를 각각 나타내었다. 전자공여능 측정 결과 200 μg/mL phenolic compounds의 농도에서 물 추출물은 98.45%, 50% ethanol 추출물은 91.20%의 활성을 나타내었다. ABTS radical 활성 측정 결과 100 μg/mL phenolic compounds의 농도에서 물 추출물은 97.28%, 50% ethanol 추출물은 97.03%의 활성을 나타내었다. Antioxidant protection factor(PF) 측정 결과 200 μg/mL phenolic compounds의 농도에서 물과 ethanol 추출물 모두 1.77 PF의 같은 결과를 나타내었다. Thiobarbituric acid reactive substance(TBARS) 측정 결과 100 μg/mL phenolic compounds의 농도에서 물과 ethanol 추출물은 94.77%와 95.64%의 높은 활성을 나타내었다. 미백과 관련 있는 tyrosinase 저해 활성을 측정한 결과 200 μg/mL phenolic compounds의 농도에서 ethanol 추출물은 34.96%의 억제력을 나타내었다. 주름 개선 효과를 측정하는 elastase 저해 활성과 collagenase 저해 활성을 측정한 결과 200 μg/mL phenolic compounds의 농도에서 ethanol 추출물만 78.90%와 61.3%의 높은 저해 활성을 나타내었다. 수렴 효과를 나타내는 astringent effect에서 200 μg/mL phenolic compounds 농도의 ethanol 추출물은 7.82%의 효과를 나타내었다. Hyaluronidase 저해 효과 측정 결과 물 추출물 200 μg/mL phenolic compounds의 농도에서 81.04%의 염증 억제 효과를 나타내었다. 이러한 결과들로 미루어 보았을 때 번행초 추출물은 항산화 작용과 미용 식품으로서의 기능성을 기대할 수 있다. This study examined the beauty food activities of water and ethanol extracts from Tetragonia tetragonioides. Content of phenolic compounds extracted with water and 50% ethanol extracts were 3.29 mg/g and 4.14 mg/g, respectively. 1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl free radical scavenging activities of water and ethanol extracts were 98.45% and 91.20%, respectively, at 200 μg/mL of phenolics. 2,2"-Azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) radical decolorization activity was 97.28% for water extracts and 97.83% for ethanol extracts at 100 μg/mL of phenolics. Antioxidant protection factor (PF) was 1.77 PF for water and ethanol extracts at 200 μg/mL of phenolics. Thiobarbituric acid reactive substances of water and ethanol extracts were 94.77% and 95.64%, respectively, at 100 μg/mL of phenolics. Tyrosinase inhibitory activity, which is related to skin-whitening, was confirmed to be 34.96% for ethanol extracts at 200 μg/mL of phenolics. Elastase inhibitory activity and anti-wrinkle effect of 50% ethanol extracts were 78.9% at 200 μg/mL of phenolics. Collagenase inhibitory activity of ethanol extracts was 61.29% at 200 μg/mL of phenolics. Astringent effect was not detected in water extracts but was 7.82% for 50% ethanol extracts at 200 μg/mL of phenolics. Hyaluronidase inhibitory activity as a measure of anti-inflammation was confirmed to be 81.04% for water extracts at 200 μg/mL of phenolics. Based on these results, Tetragonia tetragonioides extracts can be used as a functional material and functional beauty food with antioxidant effects.

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        건조방법에 따른 잣나무(Pinus koraiensis) 잎 추출물의 주름개선 및 미백 효과

        조재범 ( Jae-bum Jo ),박혜진 ( Hye-jin Park ),이은호 ( Eun-ho Lee ),이재은 ( Jae-eun Lee ),임수빈 ( Su-bin Lim ),홍신협 ( Shin-hyub Hong ),조영제 ( Young-je Cho ) 한국응용생명화학회 2017 Journal of Applied Biological Chemistry (J. Appl. Vol.60 No.1

        본 연구는 잣나무(Pinus koraiensis) 잎을 열풍건조, 음지건조, 동결건조하여 물과 80 % ethanol을 추출용매로 사용하여 추출물이 미용식품의 소재로서의 기능성을 증명하고자 실시하였다. Total phenolic compounds는 WE에서는 17.93 mg/g로 음지건조가 가장 높았고, EE에서도 20.63 mg/g로 음지건조 추출물이 가장 높은 용출량을 나타내었다. DPPH, ABTS radical 전자공여능 측정 결과, WE는 열풍건조에서 90.45, 99 %, EE에서는 음지건조가 96.2, 99%의 높은 활성을 나타내었다. PF 측정 결과, 음지건조 잣나무 잎 추출물에서 WE는 9.63 PF, EE에서는 10.48 PF의 결과를 나타내었고, TBARs 측정 결과, 동결건조 잣나무 잎의 WE에서 82.07 %와 음지건조 잣나무 잎의 EE에서는 89.39%의 가장 높은 높은 활성을 나타내었다. 주름개선 효과를 측정 결과, elastase 저해 활성은 동결건조 잣나무 잎 EE에서 71.46 %, collagenase 저해 활성은 음지건조 잣나무 잎의 EE에서 97.48 %로 가장 높은 저해 활성을 나타내었다. Melanin 생합성을 억제할 수 있는 tyrosinase 저해 활성은 음지건조 잣나무 잎의 EE 저해 활성이 63.03 %로 가장 높았다. 이러한 결과로 폐자원으로 여겨지는 잣나무 잎을 음지건조 하였을 때 항산화능뿐만 아니라, 주름 및 미백 활성이 특히 높은 것으로 보아 향후 잣나무 잎이 기능성 미용 소재 산업에 활용가치를 기대할 수 있었다. This study provide activity for beauty food of water and 80 % ethanol extracts from Pinus koraiensis leaves. Total phenolic content of extracts from Pinus koraiensis leaves were each 12.22 mg/g (Drying under hot air) and 17.93 mg/g (Drying under shade), 14.36 mg/g (Lyophilization) in water extracts (WE) and 11.9 mg/g and 20.63 mg/g, 17.96 mg/g in 80 % ethanol extracts (EE). The 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl free radical scavenging activity of extracts from Pinus koraiensis leaves was 96.20 % in EE from drying under shade at extracts concentration. The 2,2`- azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid) radical decolorization activity of extracts from drying under shade was 99.85 % in WE and 99.80 % in EE at extracts concentration. The antioxidant protection factor (PF) extracts from drying under shade type was 9.63 PF in WE and 10.48 PF in EE at extracts concentration. The thiobarbituric acid reactive substance from Pinus koraiensis leaf was 89.39 % in EE from drying under shade at extracts concentration. The elastase inhibition activity of EE for anti-wrinkle effect showed an excellent wrinkle improvement effect, showing 71.46 % in EE from lyophilization. Collagenase inhibition activity of EE from drying under shade was 97.48 % in extracts. Tyrosinase inhibition activity which was related to antimelanogensis was observed. The tyrosinase inhibitory effect of extracts from lyophilization was confirmed to be 60.4 % in EE more than another drying methods at extracts concentration. Through out all results, it can be expected Pinus koraiensis leaves extracts to use as a functional material for anti-oxidant and functional beauty food.

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        여름에 발생한 혈구탐식림프조직구증을 동반한 중증쯔쯔가무시병 1예

        안재성 ( Jae-sung Ahn ),노진희 ( Jin-hee Noh ),김형래 ( Hyung-rae Kim ),정지원 ( Jiwon Jung ),조재철 ( Jae-cheol Jo ),임지훈 ( Ji-hun Lim ),전재 ( Jae-bum Jun ) 대한내과학회 2017 대한내과학회지 Vol.92 No.3

        쯔쯔가무시병은 가을철에 호발하는 열성 질환이다. 저자들은 여름에 중증패혈증 양상을 보인 HLH 환자에서 쯔쯔가무시병을 진단하였으며, doxycycline으로 치료 후 호전을 보인 예를 경험하여 이를 보고하는 바이다. In Korea, scrub typhus usually occurs in October and November. Hemophagocytic lymphohistiocytosis (HLH) is a distinct clinical entity characterized by a high fever, pancytopenia, hepatosplenomegaly, histiocyte proliferation, and hemophagocytosis. We encountered a summertime case of severe scrub typhus presenting as HLH. A 49-year-old female complained of abdominal pain and fever 3 days in duration. On hospital day 3 she was transferred to the intensive care unit because of clinical deterioration accompanied by severe sepsis. As an eschar was evident on the right shoulder, we commenced doxycycline. Her condition improved dramatically and she was discharged on day 14. Although the indirect immunofluorescence antibody test (IFA) for Orientia tsutsugamushi was negative on admission, a repeat IFA test was positive; the antibody titer was 1:5,120 on hospital day 10. Scrub typhus should be considered during differential diagnosis in a patient with severe sepsis in any season except the fall. (Korean J Med 2017;92:321-325)

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        동송근(Pinus densiflora root) 추출물의 미용식품활성

        이은호 ( Eun-ho Lee ),박기태 ( Ki-tae Park ),박혜진 ( Hye-jin Park ),조재범 ( Jae-bum Jo ),이재은 ( Jae-eun Lee ),임수빈 ( Su-bin Lim ),김예진 ( Ye-jin Kim ),안동현 ( Dong-hyun Ahn ),조영제 ( Young-je Cho ) 한국응용생명화학회 2017 Journal of Applied Biological Chemistry (J. Appl. Vol.60 No.2

        소나무 뿌리(동송근)로부터 phenolic compounds를 추출 후 미용식품활성을 검정하여 기능성 소재로 활용가능성을 살펴보았다. 동송근에 함유된 페놀성 물질의 tyrosinase 저해효과를 측정한 결과 50 μg/mL phenolics 농도에서 ethanol 추출물이 92%의 tyrosinase 저해효과를 나타내었다. Elastase와 collagenase 저해효과를 측정한 결과 200 μg/mL phenolics 농도에서 ethanol추출물이 각각 61, 78%의 높은 저해력을 나타내어 주름개선효과가 높았다. 수렴효과는 50 μg/mL phenolics의 저농도 ethanol추출물에서 82%의 저해효과를 나타내었다. 염증억제효과를 나타내는 hyaluronidase 저해효과를 측정한 결과 100-200 μg/mL phenolic 농도의 ethanol 추출물에서 74-94%의 매우 높은 염증억제효과를 나타내었다. 이러한 결과로 보아 동송근 추출물이 미용식품활성 또는 기능성 소재로서 활용이 가능할 것으로 판단되었다. The extracted phenolic compounds from Pinus densiflora root were examined biological activities for beauty food. The tyrosinase inhibitory activity which was related to skin-whitening was observed. The tyrosinase inhibitory activity was confirmed to be 92% in ethanol extract at 50 μg/mL phenolic. The elastase and collagenase inhibitory activity as anti-wrinkle effect were showed 61 and 78% in ethanol extract at 200 μg/mL phenolic, respectively. Astringent effect of ethanol extract was showed to be 82% at 50 μg/mL phenolic. Hyaluronidase inhibitory activity of ethanol extract as anti-inflammation effect was confirmed to be 94% of inhibition at 200 μg/mL phenolic. These results demonstrated that isolated phenolic compounds from P. densiflora root could be expected to use as a functional cosmetic materials.

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        삼백초(Saururus chinensis) 재배 시 Elicitor 처리에 의한 항산화, Xanthine Oxidase, Angiotensin Converting Enzyme 억제활성 증대 및 항균활성 변화

        이은호(Eun-Ho Lee),박혜진(Hye-Jin Park),조재범(Jae-Bum Jo),김예진(Ye-Jin Kim),김명욱(Myung-Uk Kim),안동현(Dong-Hyun Ahn),정희영(Hee-Young Jung),조영제(Young-Je Cho) 한국식품영양과학회 2018 한국식품영양과학회지 Vol.47 No.10

        Elicitor를 처리한 삼백초의 phenolic compound의 함량은 대조구인 비처리구에 비하여 높아지는 것이 확인되었다. Elicitor 처리한 삼백초 추출물의 항산화 효과는 1.5 mg elicitor/leaf 1 g(elicitor 1.5)에서 3.0 mg elicitor/leaf 1g(elicitor 3.0)으로 elicitor의 처리 농도가 높아질수록 항산화 효과는 높아지는 것으로 확인되었으며, elicitor 처리에 의해 water 추출물보다 70% 에탄올 추출물의 항산화 효과가 더 우수한 효과를 나타내었고, 동일 추출물에서 첨가되는 phenolic 농도 구간별 통계처리 결과 phenolic 농도별로 유의성 있는 활성 증가가 관찰되었다. Elicitor 처리한 삼백초 추출물의 건강기능성 활성은 고혈압 억제 효과가 비처리구에 비해 우수한 억제 효과를 나타내었으며, elicitor 3.0의 경우 억제율이 약 2배나 상승하는 것을 확인할 수 있었고, positive control인 captopril의 억제 효과보다 더 우수한 고혈압 억제 효과를 나타내었다. Elicitor 처리한 삼백초 추출물의 통풍 억제 효과가 비처리구에 비해 우수한 억제 효과를 나타내었으며, positive control인 allopurinol의 억제 효과보다 더 우수한 XOase 억제 효과를 나타내어, 고혈압 억제와 통풍 억제 효과를 이용한 의료산업 및 건강기능성 분야에 매우 유용한 자원으로 활용이 가능할 것으로 판단되었다. Elicitor 처리한 삼백초 추출물의 항균효과는 비처리구에 비해 부분적으로 우수한 항균효과를 나타내었으며, elicitor 1.5에서는 비처리구인 대조구에는 나타나지 않았던 충치균인 S. mutans에 대한 억제 효과가 새로이 확인되었다. Elicitor 3.0에서는 대조구에는 없던 S. mutans에 대한 억제효과뿐만 아니라 다소 약하기는 하지만 위염, 위궤양의 원인균인 H. pylori균에 대한 억제 효과도 추가로 확인되었다. 따라서 삼백초 재배 시에 본 연구에서 사용한 elicitor를 처리하면 수확되는 삼백초의 단위 무게당 생리활성물질인 phenolic compound의 생산량을 높일 수 있고, 생리활성도 증대시킬 수가 있어 산업화를 위한 원료생산에 효율적인 재배기법에 활용할 수 있을 것이라 판단되었다. This study was designed to assess the anti-oxidative and biological activities of extracts from Saururus chinensis. It is more effective to use elicitor than non-treated elicitor when extracting phenolic compounds. Elicitor-treated S. chinensis showed higher total phenolic content than the control group. Anti-oxidative activity of elicitor-treated S. chinensis extract increased in a concentration-dependent manner as concentration increased from 1.5 mg elicitor/leaf 1 g (elicitor 1.5) to 3.0 mg elicitor/leaf 1 g (elicitor 3.0). Moreover, 70% ethanol extract showed higher anti-oxidative activity than water extract. Hypertension inhibitory activity of the elicitor-treated group was much higher than that of the non-treated group. Elicitor 3.0 showed a 2-fold higher inhibitory effect and higher than captopril, which was the positive control. Elicitor-treated S. chinensis extract showed high gout preventative activity compared to the non-treated group. It also showed higher xanthine oxidase inhibitory activity than the positive control allopurinol. Thus, it can be expected to be used as a source in the medical industry for hypertension inhibition and gout prevention. Elicitor-treated S. chinensis extract showed partial anti-microbial activity. Elicitor 1.5 showed Streptococcus mutans inhibitory activity against cavities, which was not observed in the control group. Elicitor 3.0 not only showed cavity preventive activity but also a Helicobacter pylori inhibitory effect, which is directly related to stomach ulcer and gastritis. Therefore, elicitor treatment during S. chinensis cultivation will increase total phenolic compound content in the plant source and increase bioactivity, which will yield high quality for industrialization.

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        Lipopolysaccharide로 유도된 Raw 264.7 cell에서 물레나물(Hypericum asctron)의 Pro-inflammatory 억제 효과

        홍은진 ( Eun-jin Hong ),박혜진 ( Hye-jin Park ),김나현 ( Na-hyun Kim ),조재범 ( Jae-bum Jo ),이재은 ( Jae-eun Lee ),임수빈 ( Su-bin Lim ),안동현 ( Dong-hyun Ahn ),정희영 ( Hee-young Jung ),조영제 ( Young-je Cho ) 한국응용생명화학회(구 한국농화학회) 2017 Journal of Applied Biological Chemistry (J. Appl. Vol.60 No.4

        물레나물(Hypericum ascyron)은 예로부터 식·약용으로 사용되어져 왔으나, 물레나물의 항염증 효과와 mechanism에 대한 연구가 매우 부족하여 물레나물 추출물의 염증 생성 반응에 관여하는 기전을 규명하고자 하였다. 물레나물은 열수와 90% ethanol 추출물에서 각각 29.75, 31.82 mg/g으로 높은 phenolic 함량을 나타내었다. 물레나물 추출물의 hyaluronidase 저해 활성을 측정한 결과 50-200 μg phenolics/mL 농도에서 열수와 90% ethanol 추출물이 각각 0.00-14.81, 15.33-47.49%의 저해 활성을 나타내어 항염증 효과가 있는 것으로 판단되었다. 물레나물 추출물의 세포 독성을 측정한 결과, 열수와 90% ethanol 추출물에서 각각 30-100 μg/mL 농도에서 독성이 관찰되어 열수 추출물의 농도 구간을 10-50 μg/mL, ethanol 추출물은 5-20 μg/mL으로 선정하였다. LPS로 자극한 Raw 264.7 cell에서 iNOS, COX-2와 같은 염증성 매개체뿐만 아니라 pro-inflammatory cytokine의 생성과 발현은 물레나물의 열수와 90% ethanol 추출물에 의하여 농도 의존적으로 억제되는 것을 확인하였다. 물레나물 추출물의 염증 억제 효과는 iNOS와 COX-2를 억제함으로써 염증 반응에 관련된 물질인 NO, PGE<sub>2</sub>, TNF-α, IL-6, IL-1β 생성을 억제하는 기작을 가지는 것으로 판단되었다. 따라서 물레나물 추출물은 다양한 염증성 질환에서 매개 물질들의 과발현에 의해 야기되는 질병을 치료하기 위한 치료제로 다양하게 활용할 수 있는 천연물 소재로 사용될 수 있을 것으로 판단되며, 물레나물의 기능성 식품 산업화를 위한 유용한 기초 자료가 될 수 있을 것으로 판단되었다. Hypericum ascyron has long been used as medicinal plant and recent studies reported that H. ascyron has anti-diabetic, anti-oxidant, and anti-bacterial effects. In this study, inhibitory effect from H. ascyron on pro-inflammatory responses has been investigated. H. ascyron was extracted at optimal extraction condition. Total phenolic contents in water and 90% ethanol were 29.75 and 31.82 mg/g, respectively. Hyaluronidase inhibitory activity of H. ascyron extracts (50-200 μg/mL phenolics) was 0.00-14.81% and 15.33-47.49%, respectively. In cell viability, cell toxicity was shown at concentration of 100 μg/mL and 30 μg/mL of water and 90% ethanol extract. Therefore, 10-50 μg/mL in water extracts and 5-20 μg/mL in ethanol extracts was selected each for further study. Inducible nitric oxide synthase (iNOS) derived nitric oxide (NO) and cyclooxygenase (COX)-2-derived prostaglandin E<sub>2</sub> (PGE<sub>2</sub>) protein expression inhibitory effect of extracts were inhibited in a dose dependent manner, significantly. Also, the pro-inflammatory cytokines inhibitory effect such as tumor necrosis factor-α, nterleukin (IL)-6 and IL-1β were decreased in the dose dependent manner. The results indicate that H. ascyron extracts reduced inflammatory responses in lipopoly-saccharide- induced 264.7 cells via the regulation of the iNOS, COX-2, NO, PGE<sub>2</sub>, and pro-inflammatory cytokines. Therefore, H. ascyron extracts have significant anti-inflammatory effect and a source as therapeutic materials.

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