대두(Glycine maxim) 추출물이 티로시나아제 프로모터 활성에 미치는 효과

진종언 ( Jong Eon Chin ),김관천 ( Kwan Chun Kim ) 한국식품영양학회 2008 韓國食品營養學會誌 Vol.21 No.3

The methanolic extract of Glycine maxim increased the expression of the promoter in B16 mouse melanoma cells harboring a tyrosinase promoter. Extract concentrations of 10 μg/㎖ and 100 μg/㎖ resulted in tyrosinase promoter expression rates of approximately 113% and 184%, respectively, as compared to the control. The fraction layers consisting of butyl alcohol and methylene chloride improved expression effects on the tyrosinase promoter. In particular, the butyl alcohol fraction evidenced a high expression rate at 100 μg/㎖. In the MTT assay, the methanolic extract did not evidence cytotoxicity at concentrations under 500 μg/㎖. Therefore, the results observed with the extract of Glycine maxim showed that the substance exerted a positive effect on the tyrosinase promoter.

복분자 추출물이 티로시나아제 프로모터에 미치는 효과

진종언(Jong-Eon Chin),조남철(Nam-Chul Cho),김관천(Kwan-Chun Kim) 대한환경위생공학회 2006 대한환경위생공학회지 Vol.21 No.3

To estimate the inhibitory effect of Rubus coreanum extract on melanin biosynthesis, we tested its inhibitory effects on tyrosinase promoter in B16 mouse melanoma cells. Rubus coreanum extract by methanol had inhibitory effect approximately 10% on tyrosinase promoter at 100 ㎍/mL. In the MTT assay, the same extract exhibited very low cytotoxicity under 100 ㎍/mL. The fractions of methylene chloride, butyl alcohol and water did not showed the inhibitory effect on tyrosinase promoter, but the fraction of ethyl acetate exhibited inhibitory effect approximately 11% at 100 ㎍/mL.

정향(Clove) 추출물이 티로시나아제 유전자의 발현에 미치는 효과

진종언,이정용,김관천,Chin, Jong-Eon,Lee, Jeong-Yong,Kim, Kwan-Chun 대한환경위생공학회 2007 대한환경위생공학회지 Vol.22 No.1

Clove extract by methanol increased expression of the tyrosinase gene on B16 mouse melanoma cells containing tyrosinase promoter. $10{\mu}g/mL$ and $100{\mu}g/mL$ of the extract showed expression rate of the tyrosinase gene about 138% and 245%, respectively, compared with control. At $500{\mu}g/mL$, expression rate of the extract was impossible to measurement by high cytotoxicity. The solvent fraction of methylene chloride also exhibited highly expression rate as methanol extract. However, the solvent fractions of butyl alcohol and water showed repressive effect on expression of tyrosinase gene at $500{\mu}g/mL$. In MTT assay, cell survival rate of the extract exhibited similar to expression rate of tyrosinase gene. That is, $10{\mu}g/mL$ and $100{\mu}g/mL$ of the extract showed the cell survival rate about 128% and 187%, respectively.

수종의 버섯 추출물이 티로시나아제 프로모터에 미치는 효과

진종언(Jong-Eon Chin),이혜성(Hye-Sung Lee),김관천(Kwan-Chun Kim) 대한환경위생공학회 2006 대한환경위생공학회지 Vol.21 No.3

To estimate the inhibitory effect of some mushroom extract on melanin biosynthesis, we tested its inhibitory effects of five mushroom extracts on tyrosinase promoter in B16 mouse melanoma cells. In five mushroom extracts, Cordyceps militaris and Poria cocos exhibited low repression effect on tyrosinase promoter. However, Ganoderma lucidum, Paecilomyces japonicus, Phellinus linteus showed high repression effect. Especially, Paecilomyces japonicus and Phellinus linteus extracts had very higher repression effect approximately 81~83% at 100 ㎍/mL. In the MTT assay, Paecilomyces japonicus and Phellinus linteus extracts exhibited high cytotoxicity. Therefore, repression effect of the extracts were closely connected with cytotoxicity.

어성초(Houttuynia cordata) 추출물이 Tyrosinase 유전자 발현에 미치는 효과

진종언(Jong-Eon Chin),조남철(Nam-Chul Cho) 한국식품영양과학회 2005 한국식품영양과학회지 Vol.34 No.8

멜라닌 색소 생성에 관여하는 tyrosinase 유전자의 발현을 억제하는 물질을 탐색하고자 tyrosinase 프로모터를 지닌 B16 mouse melanoma cell에 어성초 메탄올 추출물을 처리한 결과 메탄올 추출물은 10 μg/mL와 100 μg/mL의 농도에서 대조군에 비해서 약 13%와 45%의 억제효과를 나타냈으며, 세포생존율은 1 μg/mL, 10 μg/mL, 100 μg/mL의 농도에서 약 104%, 101%, 74%로서 세포독성이 낮게 나타났다. Butyl alcohol과 물 분획물은 tyrosinase 유전자의 발현을 억제하는 효과가 없었지만 methylene chloride 분획물은 tyrosinase 유전자의 발현을 억제하는 효과를 나타내었으며, 특히 methylene chloride 분획물은 10 μg/mL와 100 μg/mL의 농도에서 각각 약 82%와 48%의 발현율을 나타냄으로써 대조군에 비해 tyrosinase 유전자의 발현을 크게 억제하였다. The methanol extract of Houttuynia cordata repressed the expression of tyrosinase gene of B16 mouse melanoma cell containing tyrosinase promoter. The extract repressed expression of tyrosinase gene by about 13% and 45% at 10 μg/mL and 100 μg/mL, respectively. In the MTT assay, the same extract exhibited very low cytotoxicity at 1 μg/mL, 10 μg/mL, and 100 μg/mL, respectively. The fractions of ethyl acetate, butyl alcohol, and water did not showed the repressive effect on the expression of tyrosinase gene, but methylene chloride fraction layer repressed highly at 10 μg/mL and 100 μg/mL.

율피 추출물이 티로시나아제 유전자 발현에 미치는 효과

진종언(Jong-Eon Chin),김관천(Kwan-Chun Kim) 대한환경위생공학회 2005 대한환경위생공학회지 Vol.20 No.3

Chestnut bark extract by methanol repressed the expression of tyrosinase gene of B16 mouse melanoma cell containing tyrosinase promoter. 10 ㎍/㎖, 100 ㎍/㎖, 1 ㎎/㎖ of the extract repressed expression of tyrosinase gene about 38%, 47%, and 78%, respectively, compared with control. In the MTT assay, the same extract exhibited very low cytotoxicity at 1 ㎍/㎖, 10 ㎍/㎖, 100 ㎍/㎖, and 1 ㎎/㎖, respectively. The fractions of Methylene chloride and ethyl acetate did not showed the repressive effect on the expression of tyrosinase gene, but the fraction of butyl alcohol repressed highly at 10 ㎍/㎖ and 100 ㎍/㎖.

B16 마우스 흑색 종양 세포에서 빈랑(Areca catechu) 추출물이 티로시나아제 유전자에 미치는 효과

진종언 ( Jong Eon Chin ),조남철 ( Nam Chul Cho ) 한국식품영양학회 2007 韓國食品營養學會誌 Vol.20 No.2

유전자 형질전환을 통한 쌀 전분 분해효소 재조합 효모균주의 개발과 발효특성조사

이자연,진종언,배석,Lee, Ja-Yeon,Chin, Jong-Eon,Bai, Suk 한국미생물학회 2016 미생물학회지 Vol.52 No.2

쌀 전분을 원료로 효모를 직접 이용하여 항산화제 glutathione(GSH)이 풍부한 알코올 음료를 제조할 목적으로 GSH 함량과 당화능을 증진시키기 위하여 Saccharomyces cerevisiae의 ${\gamma}$-glutamylcysteine synthetase 유전자(GSH1), Debaryomyces occidentalis의 glucoamylase 유전자(GAM1), 그리고 ${\alpha}$-amylase 유전자(AMY)를 청주 효모 S. cerevisiae에서 공동 발현시켰다. 재조합 청주 효모의 세포외 GSH 함량은 원균주에 비해 1.5배 증가하였다. 2% (w/v) 쌀 전분이 함유된 배지에서 배양하였을 때 GAM1과 AMY 유전자 모두 발현하는 효모 균주의 glucoamylase에 의한 당화능은 GAM1유전자만 발현하는 균주와 비교하여 2배 증가하였다. 이 새로운 균주는 쌀 전분이 20%(w/v) 함유된 배지에서 7일간 발효를 통해 에탄올 11% (v/v)를 생산하였고, 전분 함유량의 90% 이상을 소비하였다. To improve antioxidant glutathione (GSH) content and saccharification ability in sake yeasts of Saccharomyces cerevisiae, the ${\gamma}$-glutamylcysteine synthetase gene (GSH1) from S. cerevisiae, glucoamylase gene (GAM1) and ${\alpha}$-amylase gene (AMY) from Debaryomyces occidentalis were co-expressed in sake yeasts for manufacturing a refreshing alcoholic beverage abundant in GSH from rice starch. The extracellular GSH content of the recombinant sake yeasts increased 1.5-fold relative to the parental wide-type strain. The saccharification ability by glucoamylase of the new yeast strain expressing both GAM1 and AMY genes was 2-fold higher than that of the yeast strain expressing only GAM1 gene when grown in the culture medium containing 2% (w/v) rice starch. It generated 11% (v/v) ethanol from 20% (w/v) rice starch and consumed up to 90% of the starch content after 7 days of fermentation.

B16 Melanoma Cell에서 티로시나아제 유전자 발현에 황금(Scutellaria baicalensis) 추출물이 미치는 효과

조남철,배석,진종언,Cho, Nam-Chul,Bai, Suk,Chin, Jong-Eon 한국식품영양학회 2010 韓國食品營養學會誌 Vol.23 No.1

유전자 발현 조절 수준에서 멜라닌 색소의 생합성을 조절하는 천연물질을 탐색하고자 황금으로부터 유용성 물질을 추출 및 분획하여 티로시나아제 프로모터 부위를 도입하여 형질전환된 B16 melanoma cell에 처리한 결과, 그 메탄올 추출물의 티로시나아제 유전자 발현율은 $10\;{\mu}g/m{\ell}$와 $100\;{\mu}g/m{\ell}$의 농도에서 대조군 세포에 비해 각각 약 231과 256%로 매우 크게 증진하는 효과를 보여 주었다. 극성도가 서로 다른 용매 분획물들을 형질전환된 세포에 처리하였을 때 methylene chloride와 ethyl acetate 용매 분획물들은 $10\;{\mu}g/m{\ell}$의 농도에서, butyl alcohol 용매 분획물은 $10\;{\mu}g/m{\ell}$와 $100\;{\mu}g/m{\ell}$의 농도에서, 그리고 물 용매 분획물은 $500\;{\mu}g/m{\ell}$의 고농도에서 티로시나아제 유전자의 발현을 증진시키는 효과를 보여 주었다. 그러나 그들의 티로시나아제 발현 증진 효과는 메탄올 추출물보다 낮았다. 황금 메탄올 추출물을 B16 melanoma cell에 처리한 다음 MTT assay를 실시한 결과, $10\;{\mu}g/m{\ell}$와 $100\;{\mu}g/m{\ell}$의 농도에서는 대조군 세포와 세포활성능이 유사할 정도로 세포독성이 매우 낮게 나타났다. 그러나 그 이상의 농도에서는 세포 활성능이 현저하게 낮았으며, 특히 $1,000\;{\mu}g/m{\ell}$의 농도에서는 세포 독성이 심하여 세포의 활성능을 측정하는 것이 불가능하였다. 본 연구결과, 황금 메탄올 추출물 내에는 티로시나아제 유전자의 발현을 증진시키는 데에 관여하는 성분들이 함유되어 있는 것으로 추측된다. 따라서 황금 추출물은 멜라닌 색소의 생합성에 관여하는 유전자의 발현하는 증진시키는 목적으로 이용함이 바람직하며, 이를 산업적으로 응용하기 위해서는 앞으로도 보다 많은 연구가 필요하다. To estimate the regulatory effects of Scutellaria baicalensis extracts on melanin biosynthesis, we evaluated the regulatory effects of the tyrosinase gene on B16 melanoma cells. The results revealed that methanolic extracts of Scutellaria baicalensis resulted in a high increase in the expression of the tyrosinase gene. Specifically, treatment with extracts at concentrations of $10\;{\mu}g/m{\ell}$ and $100\;{\mu}g/m{\ell}$ resulted in increases in tyrosinase gene expression rates of approximately 231% and 256%, respectively, when compared to the control. Moreover, the solvent fraction layers(methylene chloride, ethyl acetate, butyl alcohol, water) improved the expression of the tyrosinase gene, but to a lesser degree than the methanolic extracts. An MTT assay revealed, that the methanolic extract exhibited very low cytotoxicities at $10\;{\mu}g/m{\ell}$ and $100\;{\mu}g/m{\ell}$. Taken together, the results of this study indicated that the methanolic extracts of Scutellaria baicalensis was a very effective positive regulator of tyrosinase gene expression.

산업용 Saccharomyces cerevisiae에서 Aspergillus awamori Glucoamylase 유전자의 발현

강동명,이수아,전영현,진종언,이황희,배석,Ghang Dong-Myeong,Lee Su-A,Chun Young-Hyun,Chin Jong-Eon,Lee Hwanghee Blaise,Bai Suk 한국미생물학회 2005 미생물학회지 Vol.41 No.2

전분 이용이 가능한 산업용 Saccharomyces cerevisiae균주를 개발하기 위해 alcohol dehydrogenase 유전자 프로모터(ADClp)의 조절하에 발현되는 Aspergillus awamori glucoamylase cDNA 유전자(GA1)를 산업용 S. cerevisiae의 염색체에 도입하였다. 산업적 이용에 적합한 효모균주를 얻기 위해 세균 ampicillin 저항성 유전자가 제거되고 GA1 유전자와 선별 표지유전자로 S. cerevisiae aureobasidin A 저항성 유전자(AUR1-C)와 재조합 부위로 Tyretrotransposon $\delta$-서열이 포함된 integrative cassette를제조하였다. 이 $\delta-integrative$ cassette로 형질전환된 산업용 S. cerevisiae는 배지상에 glucoamylase를 생산 분비하였고 전환을 유일한 탄소원으로 하여 생장하였다. 형질전환체를 비선택배지에서 배양했을 매 삽입된 GA1유전자가 100세대까지 안정되게 유지되었다. To construct an amylolytic industrial strain of Saccharomyces cerevisiae, the glucoamylase cDNA gene (GAl) from Aspergillus awamori was expressed under the control of the alcohol dehydrogenase gene promoter (ADC1p) and integrated into the chromosomes of industrial S. cerevisiae. An integrative cassette lacking bacterial ampicillin resistance gene but containing the GA1 gene, $\delta$ sequences of Ty1 retrotransposon as target sites for homologous recombination and S. cerevisiae aureobasidin A resistance gene (AUR1-C) as the selection marker was constructed to obtain a strain eligible for commercial use. Industrial S. cerevisiae transformed with this 15-integrative cassette efficiently secreted glucoamylase into the medium and grew on starch as the sole carbon source. The transformants were mitotically stable for 100 generations in nonselective medium.