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        Construction of Amylolytic Industrial Strains of Saccharomyces cerevisiae for Improved Ethanol Production from Raw Starch

        임영금,박진영,이자연,최승현,진종언,고현미,김일철,배석,Im, Young-Kum,Park, Jin-Yeong,Lee, Ja-Yeon,Choi, Seung-Hyun,Chin, Jong-Eon,Ko, Hyun-Mi,Kim, Il-Chul,Bai, Suk The Microbiological Society of Korea 2013 미생물학회지 Vol.49 No.2

        생전분으로부터 에탄올을 효율적으로 생산하는 전분 분해성 산업용 Saccharomyces cerevisiae를 제조하기 위해 생전분을 발효하는 모균주(ATCC 9763/$YIp{\delta}AGSA{\delta}$)의 염색체내 ribosomal DNA loci에 double 18S rDNA-integration 시스템을 이용하여 Bacillus amyloliquefaciens ${\alpha}$-amylase 유전자(Amy) 혹은 Aspergillus awamori glucoamylase 유전자(GA1)를 다중도입시켰다. 얻어진 형질전환 균주들 중 생전분으로부터 가장 효율적으로 에탄올을 생산하는 균주(ATCC 9763/$YIp{\delta}AGSA{\delta}$/YIpAG2rD)의 발효 3일째 에탄올 생산은 모균주에 비해 1.5배 높았다. 이 새로운 균주는 생옥수수 전분이 20% (w/v) 함유된 배지에서 3일간 발효를 통해 에탄올 9.2% (v/v) (72 g/L)를 생산하였고, 생전분 함유량의 75%를 소비하였다. To contruct amylolytic industrial strains of Saccharomyces cerevisiae which produce ethanol efficiently from raw starch, the Bacillus amyloliquefaciens ${\alpha}$-amylase genes (Amy) or Aspergillus awamori glucoamylase genes (GA1) was separately introduced into the ribosomal DNA loci in the chromosomes of the raw starch fermenting-parental strain (ATCC 9763/$YIp{\delta}AGSA{\delta}$), using double 18S rDNA-integration system. Ethanol production after 3 days of fermentation by the strain that produced ethanol most efficiently from raw starch (ATCC 9763/$YIp{\delta}AGSA{\delta}$/YIpAG2rD) among the transformant strains was 1.5-times higher than that by the parental strain. This new strain generated 9.2% (v/v) ethanol (72 g/L) from 20% (w/v) raw corn starch and consumed 75% of the raw starch content during the same period.

      • KCI등재

        빵의 품질향상을 위한 xylanase와 phytase 분비 전분 분해능 효모의 개발

        이자연,임영금,진종언,배석 한국미생물학회 2020 미생물학회지 Vol.56 No.2

        Enzymatic modification of dough during bread making may improve bread quality attributes such as texture and taste. To develop amylolytic Saccharomyces cerevisiae baker’s yeasts producing and secreting xylanase and phytase, two integrative cassettes were constructed to allow co-expression of the Aspergillus awamori glucoamylase gene (GA1) and Debaryomyces castellii phytase gene (phytDc), and the Debaryomyces occidentalis α- amylase gene (AMY) and Bacillus subtilis xylanase gene (xynA), respectively. The recombinant baker’s yeast strain expressing GA1 and phytDc and the corresponding strain expressing AMY and xynA were co-cultured to secrete active glucoamylase and α-amylase, displaying both xylanase and phytase activities that degraded starch and consequently grew using it as the sole carbon source. The glucoamylase and α-amylase activities produced by the co-culture of these two yeast strains increased by 1.5-fold and 11-fold, respectively, relative to those in their monoculture with culture medium containing 2% (w/v) raw wheat starch within 5 days of growth. These new yeasts hydrolyzed 60% of the raw starch content during the same period. 밀가루 반죽에 효소를 처리하면 질감과 식감과 같은 빵의품질을 향상시킬 수 있다. Xylanase와 phytase를 생산 분비하는 전분 분해능 제빵효모 Saccharomyces cerevisiae 균주들의개발을 위해 각각 Aspergillus awamori glucoamylase 유전자(GA1)와 Debaryomyces castellii phytase 유전자(phytDc), 그리고 Bacillus subtilis xylanase 유전자(xynA)와 Debaryomyces occidentalis α-amylase 유전자(AMY)를 공동 발현할 수 있는두 개의 integrative cassettes를 제조하였다. GA1및 phytDc유전자를 발현하는 재조합 제빵효모 균주와 xynA 및 AMY 유전자를 발현하는 제빵효모 균주를 동시 배양하면 전분을 가수분해하고 이를 유일한 탄소원으로 생장할 수 있게 glucoamylase 와 α-amylase를 분비하였고, 더불어 xylanase와 phytase도 분비하였다. 2% (w/v) 생밀전분이 함유된 배지에서 배양하였을때 두 균주의 혼합배양에 의한 glucoamylase와 α-amylase 활성은 단독배양과 비교하여 5일차에 각각 1.5배와 11배 증가하였다. 이 새로운 균주들은 같은 기간에 생전분 함유량의 60% 를 소비하였다.

      • KCI등재

        과학적 추론과 철학적 추론의 비교

        박승배,손종역,신영한,박봉규,임영금,박승미,정형준,이후선 범한철학회 2007 汎韓哲學 Vol.47 No.4

        Comparison between Scientific Reasoning and Philosophical Reasoning Seungbae Park / Jongyeog Son / Younghan Shin Bonggyu Park / Younggun Im / Seungmee Park Hyeongjun Chung / Huseon Lee Constructive empiricists (van Fraassen, 1989; Ladyman et al., 1997) run the argument from a bad lot and the argument from indifference against inference to the best explanation (IBE). In this paper, we assume that the two arguments are good, and explore disastrous consequences they have on van Fraassen's positive philosophical theories, such as the contextual theory of explanation and constructive empiricism. We show that van Fraassen (1980) uses IBE to establish the contextual theory of explanation. So if a scientific theory goes down, being the product of IBE, so does the contextual theory. The two arguments can be summed up as a request for realists to fight hitherto unconceived rival scientific theories. We argue that if realists have to fight such theories, constructive empiricists would have to fight hitherto unobserved anomalies. So if realism is a problematic position, so is constructive empiricism. Finally, from the above discussion, we draw an important philosophical lesson that there is no difference in structures between scientific reasoning and philosophical reasoning. 문】구성적 경험론자들(van Fraassen, 1989; Ladyman et al., 1997)은 나쁜 부지로부터의 논증(argument from a bad lot)과 무차이로부터의 논증(argument from indifference)을 전개하여 최선의 설명으로의 추리(inference to the best explanation)를 비판한다. 우리는 이 논문에서 그들의 두 논증이 훌륭하다고 가정하고, 설명에 대한 맥락론과 구성적 경험론과 같은 van Fraassen의 철학이론들에 미치는 논리적 재난을 드러내고자 한다. 우리가 보기에, van Fraassen(1980)은 최선의 설명으로의 추리를 이용하여 맥락론을 정당화하고 있다. 따라서 과학이론이 최선의 설명으로의 추리의 산물이라는 이유로 믿을 만한 것이 못된다면 van Fraassen의 맥락론도 마찬가지로 믿을 만한 것이 못된다. 그리고 구성적 경험론자의 위 두 논증은 아직 우리가 생각해내지 못한 경쟁이론들과 싸워보라고 실재론자들에게 요구하는 것으로 요약될 수 있다. 실재론자들이 이런 이론들과 싸워야한다면, 구성적 경험론자들은 우리가 아직 관찰하지 못한 변칙사례들(anomalies)과 싸워야한다고 우리는 주장하겠다. 따라서 실재론이 문제 있는 입장이라면 구성적 경험론도 마찬가지로 문제 있는 입장이다. 마지막으로, 위 논의로부터 과학적 추론과 철학적 추론은 같은 구조를 가지고 있다는 중요한 철학적 교훈을 이끌어내겠다.

      • KCI등재

        반응표면분석법을 통한 Arthrobacter sp.의 amylase 생산 최적화

        김현도 ( Hyun Do Kim ),임영금 ( Young Kum Im ),최종일 ( Jong Il Choi ),한세종 ( Se Jong Han ) 한국화학공학회 2016 Korean Chemical Engineering Research(HWAHAK KONGHA Vol.54 No.1

        본 연구에서는 극지 연구소로부터 분양 받은 Arthrobacter sp. PAMC 27388 균주에서 생산되는 아밀라아제(amylase)를 물리적 요인(physical factor)들의 변화를 통하여 생산배지 최적화를 수행하였다. 한천 배지 상에서 lugol solution을 이용한 클린환의 확인을 통하여 아밀라아제가 생산됨을 확인하였으며, 16S rDNA를 이용하여 동정한 결과 Arthrobacter sp. 임을 확인할 수 있었다. 최적화 이전의 아밀라아제 생산량은 1.66 mU/L로 확인되었다. 최적화 결과, 2.49 mL의 접종부피, pH 6.85, 42.87 mL의 배지 부피의 조건에서 가장 많은 양의 아밀라아제가 생산될 것으로 예상되었으며, 생산량은 2.84 mU/L로 예상되었다. 확인 실험을 통하여 최적화 이전과 비교하여 생산량이 약 150% 증가한 2.50 mU/L의 아밀라아제가 생산됨을 확인할 수 있었다. In this study, the physical factors for amylase production by Arthrobacter sp. were optimized using response surface methodology(RSM). Antarctic microorganism Arthrobacter sp. PAMC 27388 was obtained from the Polar and Alpine Microbial Collection(PAMC) at the Korea Polar Research Institute. This microorganism was confirmed for the excretion of amylase with Lugol`s solution. The amylase activity was after flask culture was as low as 1.66 mU/L before optimization. The physical factors including the inoculum volume, the initial culture pH, and the medium volume were chosen to be optimized for the enhanced amylase production. The calculated results using RSM indicate that the optimal physical factors were 2.49 mL inoculum volume, 6.85 pH and 42.87 mL medium volume with a predicted amylase production of 2.84 mU/L. The experimentally obtained amylase activity was 2.50 mU/L, which was a 150% increase compared to the level before optimization.

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