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        배양한 사람골격근세포에서 PPARγ에 의한 muscle fatty acid binding protein의 발현조절

        전현정,신원식,김정미,홍혜경,박경수,김성연,이홍규 대한당뇨병학회 2002 Diabetes and Metabolism Journal Vol.24 No.4

        연구배경:Fatty acid binding protein(FABP)는 세포내로의 지방산 이동에 관여하며 이외에도 세포내 지방산의 계면활성작용 효과 중화 및 세포내 신호전달체계에 관여하는 것으로 알려져 세포내 대사과정에 중요한 역할을 담당하는 것으로 생각되고 있다. 이러한 FABP은 간, 지방조직, 심장 뿐만 아니라 골격근 내에도 전체 단백질의 2%를 차지하고 있다. 한편 PPARγ는 지방대사에 관여하는 중요한 전사인자로서 간이나 지방조직의 FABP는 모두 PPARγ에 의해 전사가 조절되며, FABP의 promoter 부위에는 PPRE( PPARγ responsive element)가 있음이 증명되어 있다. 이에 본 연구에서는 간이나 지방조직의 FABP발현조절에 PPARγ가 관여함에 근거하여 근육에서의 FABP의 발현조절에 PPARγ가 영향을 미칠 가능성을 확인하기 위해 배양된 사람 골격근세포를 이용하여 mFABP의 발현에 PPARγ가 관여하는 지를 알아보았다. 방법:사람 골격근조직으로부터 골격근아세포를 분리하여 4∼6주간 SkGM으로 배양한 후 4일간 αMEM으로 배양하여 골격근세포로 분화시켰다. 4일간의 분화기간 중 PPARγ ligand인 troglitazone을 주거나 분화기간 중 3일째에 재조합 Ad­ PPARγ1를 형질도입시킨 후 48시간 뒤에 세포를 수거하여 mFABP의 mRNA발현을 측정하였다. 결과:배양된 사람 골격근세포의 mFABP발현은 PPARγ ligand인 troglitazone 자극에 의해 약 4배로 유의하게 증가하였다. 재조합 Ad­β­galactosidase를 이입시킨 후에는 mFABP의 발현은 변화가 없었으나 재조합 Ad­ PPARγ1를 이입시킨 경우에는 이입시킨 양에 따라 mFABP의 mRNA의 발현이 현저하게 증가함을 관찰하였다. 결론:사람 골격근세포에서 MFABP는 PPARγ ligand 및 PPARγ양의 증가에 의해 발현조절됨을 보여주고 있다. Background : Fatty acid binding protein (FABP), putative mammalian fatty acid transporter, plays a role in fatty acid transport, the modulation of cellularsignal transduction pathways and the protection against detergent like effects of fatty acids. FABP found in liver, adipose tissue, heart, skeletal muscle and FABP in skeletal muscle accounts for 2% of total protein mass. FABP expression has shown to be up-regulated by PPARγ in liver and adipocyte. Adipocyte and liver FABP genes have a functional PPRE (PPARγ responsive element) in their promoter region. This evidence led us to investigate for a possible the regulation of m FABP expression by PPARγ in cultured human skeletal muscle cell. Methods : Myoblast were cultured in SkG M for 4weeks and were differentiated into myocyte in αMEM for 4days. The myocytes were treated with PPARγ ligand (troglitazone : 5 ㎍/ mL) or transduction with adenovirus-PPARγ1 (Ad-PPARγ1). m FABP expression was identified by northern blot. Results : m FABP expression was up-regulated by 4.0± 1.2 fold in the PPARγ ligand (p < 0.05). There was increased in m FABP expression with transduction with adenovirus-PPARγ1 while there was no change in m FABP expression which transducted with adenovirus -β-galactosidase. Conclusion : These results demonstrates that m FABP expression is up-regulated by both PPARγ ligand and by PPARγ1 over expression in cultured human skeletal muscle cells (J Kor Diabetes Asso 413~420, 2000).

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