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      • 염색체 위치 특이적 삽입과 안정적인 유전자 발현을 유도하는 플라스미드 백터의 제작

        문영준,강윤성,최지혜,손진숙,민나영,이광호 中央大學校 基礎科學硏究所 2002 基礎科學硏究所 論文集 Vol.16 No.-

        Insertion of reporter constructs into the mammalian genome leads to variable gene expression due to position effects at the site of integration. This random integration has limited the gene therapy of human genetic disorders by its undesirable effects. We report here the newly constructed plasmid vector(pIRES-neo-YJ) based on the concepts of homologous recombination and position-independent promoter enhancing of beta-globin matrix attachment region(Glb-MAR). chromosome 7 centromere-specific alpha satellite(alphoid) DNA sequence was cloned into pIRES-neo-YJ for homologous recombination of the cloned gene with the centromeric region of chromosome 7, which is genetically silent. Beta Glb-MAR sequence that allows high levels of transcription independent of the chromosomal site of integration was also inserted into pIRES-neo-YJ to ensure the stable and higher expression of the cloned genes. We expect that pIRES-neo-YJ would provide a valuable tool to eliminate random integration of cloned genes into the undesirable chromosomal region and their short-lived expression which often encounters during the construction of transgenic animals and human gene therapy.

      • KCI등재
      • KCI등재

        마테(Ilex paraguariensis) 추출물/분획물의 항산화능 및 타이로시네이즈 저해 활성

        공봉주 ( Bong Ju Kong ),김용재 ( Yong Jae Kim ),백지선 ( Jee Seon Baek ),이다빈 ( Da Bin Lee ),이지원 ( Ji Won Lee ),민나영 ( Na Young Min ),김아영 ( A Young Kim ),박수남 ( Soo Nam Park ) 대한화장품학회 2015 대한화장품학회지 Vol.41 No.4

        본 연구에서는 마테(Ilex paraguariensis)로부터 50% 에탄올 추출물, 에틸아세테이트 분획물 및 아글리콘 분획물을 제조하였고 이들 추출물/분획물에 대하여 항산화능을 평가하였다. 추출물 및 분획물의 수율은 건조 분말 당 각각 32.0, 4.48 및 0.82%를 나타냈다. 1,1-Phenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) 라디칼 시험법을 이용한 자유 라디칼 소거 활성과 루미놀 발광법을 이용한 총 항산화능을 평가하였다. 50% 에탄올 추출물, 에틸아세테이트 분획물 및 아글리콘 분획물의 라디칼 소거활성(FSC<sub>50</sub>)은 각각 8.83, 5.84 및 6.05 μg/mL이었다. 추출물 및 분획물의 총항산화능(OSC<sub>50</sub>)은 모든 추출물이 비교 대조군으로 사용한 L-ascorbic acid (1.72 μg/mL)과 유사한 항산화능을 나타냈으며. 50% 에탄올 추출물의 경우 OSC<sub>50</sub>은 1.03 μg/mL로 활성이 가장 큰 것으로 평가되었다. <sup>1</sup>O<sub>2</sub>로 유도된 세포 손상에 대한 보호 효과 실험에서 모든 추출물은 10 μg/mL 농도에서 비교 대조군인 (+)-α-tocopherol과 유의적으로 큰 세포 보호 활성(τ<sub>50</sub>)을 나타내었다. 특히 아글리콘 분획물은 10 및 50 μg/mL 농도에서의 세포 보호 효과가 (+)-α-tocopherol 보다 약 5배나 크게 나타났다. 에틸아세테이트 분획과 아글리콘 분획의 tyrosinase에 대한 저해 효과는 미백제로 알려진 알부틴과 유사하였다. 이상의 결과들은 마테 추출물이 항산화 및 항노화 화장품 원료로서 응용 가능성이 있음을 시사한다. In the present study, 50% ethanol extract, the ethyl acetate and aglycone fraction were prepared from mate (Ilex paraguariensis) and their antioxidative ability was evaluated. The yields of extract and fractions were 32.0, 4.48 and 0.82% per dried powder, respectively. Free radical scavenging activities were performed by 1,1-diphenyl- 2-picrylhydrazyl (DPPH) assay and total antioxidant capacity was estimated using luminol-dependent chemiluminescence assay. Free radical scavenging activities (FSC<sub>50</sub>) of 50 % ethanol extract, ethyl acetate fraction and aglycone fraction were 8.83, 5.84 and 6.05 μg/mL, respectively. Their total antioxidant capacities (OSC<sub>50</sub>) were similar to that of L-ascorbic acid (1.72 μg/mL), known as a prominent water soluble antioxidant, in all extracts and 50% ethanol extract (1.03 μg/mL) was the most effective. The cellular protective effects on the <sup>1</sup>O<sub>2</sub>-induced cellular damage of erythrocytes were evaluated and the results showed that all extracts were significantly higher than (+)-α-tocopherol at 10 μg/mL. Especially, the τ<sub>50</sub> value of aglycone fraction was 5 times higher than (+)-α-tocopherol at 10 μg/mL and 50 μg/mL. The inhibitory effects of the ethyl acetate and aglycone fractions on tyrosinase were similar to arbutin, known as the whitening agent in cosmetics. These results suggest that the extracts of mate have the applicability as antioxidant and anti-aging cosmeceutical ingredients.

      • KCI등재후보

        Y haplogroup 결정요소인 biallelic marker RPS4Y DNA를 이용한 몽골출토 옛사람뼈의 성별

        김재현(Jae-Hyun Kim),김기정(Kijeong Kim),아리오나 턱럼(Ariunaa Togloom),전은희(Eunhee Jeon),이민수(Min-Soo Lee),조연옥(Youn-Ock Cho),가와치멛,르학와수렝(Gavaachimed Lkhagvasuren),민나영(Na-Yung Min),최지혜, 다스제벡 투멩, 김근철, 노맹석, 박기원, 대한해부학회 2007 Anatomy & Cell Biology Vol.40 No.4

        고대 유전자(ancient DNA)에 대해 분자생물학적 기법들이 이용되면서 과거에는 얻지 못했을 정보들을 옛사람 등의 DNA로부터 얻을 수 있게 되었다. 형질인류학에 있어서 옛사람 성별연구는 결혼, 매장형태, 성별간 사망률, 질병에 대한 성별간의 차이, 키, 식습관, 부장품들을 연구하는 데 중요한 단서를 제공한다. 본 연구는 몽골 옛사람 DNA를 대상으로 PCR 증폭방법을 이용해 옛사람에서 남성을 확인하여 형태학적 성별과 비교하였다. 재료는 몽골에서 출토된 청동기시대부터 몽골시대에 이르는 옛사람 중 머리뼈가 보존된 52예를 대상으로 하였다. 형태학적 성별구분은 몽골학자의 결정을 따랐고, 유전학적 성별결정은 본 연구에서 개선한 Y 염색체 SNP 표지자인 RPS4Y PCR 증폭방법을 사용하였다. 본 연구에서 유전학적으로 남성로 판명된 52예 중 형태학적인 여성은 10예였다. 결론적으로 이 연구에서는 Y 염색체 SNP 표지자인 RPS4Y PCR 증폭방법을 이용한 옛사람 남녀 성별을 결정하는 것은 매우 유용할 것으로 생각된다. Many data from ancient human remains became useful by molecular approach for ancient human DNA. In anthropology, genetic sex is essential to understand marriage and burial patterns, differential mortality rates between sexes, and differential patterns by sex of disease, diet, status, and material possessions. This study was designed to determine genotype sex of 52 ancient human bones with well preserved skulls, and to compare with the morphological sex. Parts of femur and other bones were used as ancient bones excavated in Mongolia aged between bronze and Mongol period. Morphological sex was determined by Mongolian scientist, and genotype sex was determined by using biallelic marker RPS4Y for Y haplogroup. Of 52 genetic males, 10 samples were morphologically female. In conclusion, biallelic marker RPS4Y. PCR amplication method will be useful in sex determination of ancient bones.

      • KCI등재

        개선된 아밀로제닌 PCR을 이용한 우즈베키스탄 출토 고인골의 형태학적 성별과 유전자형 성별의 비교

        김기정(Kijeong Kim),아리오나 턱럼(Ariunaa Togloom),전은희(Eunhee Jeon),이민수(Min-Soo Lee),조연옥(Youn-Ock Cho),가와치멛 르학와수렝(Gavaachimed Lkhagvasuren),민나영(Na-Yung Min),최지혜(Jee-Hye Choi),김종대(Jong-Dae Kim),김근철(Keun-Cheol K 대한체질인류학회 2007 해부·생물인류학 (Anat Biol Anthropol) Vol.20 No.4

        체질인류학, 고고학, 법의학 등의 분야에서 사람의 뼈에서 남성과 여성을 구별하는 것은 매우 중요하다. 본 연구에서는 고인골 머리뼈에서 계측하는 방법에 근거를 둔 형태학적 성별의 판단법과 기존의 amelogenin PCR 증폭방법을 더욱 개량한 유전학적 성별 결정법을 비교하고자 하였다. 재료는 우즈베키스탄에서 출토된 청동기시대부터 20세기 이전에 이르는 고인골 중 머리뼈가 보존된 60예를 대상으로 하였다. 형태학적 성별구분은 우즈베키스탄 학자의 결정을 따랐고, 유전학적 성별결정은 본 연구에서 개선한 amelogenin PCR 증폭방법을 사용하였다. 본 연구에서 형태학적 남자에서 유전학적으로 남자로 판명된 경우는 20예 중 13예였다. 형태학적 여자에서 유전학적으로 여자로 판명된 경우는 40예 중 20예였다. 결론적으로 개선된 아밀로제닌 PCR 증폭방법을 이용한 고인골 남녀 성별 판별법은 매우 유용할 것으로 생각된다. Determination of male and female is important in anthropology, archeology and forensic science. This study was designed to compare genotype sex of improved amelogenin PCR amplication method with morphological sex of ancient human bones. Sixty human skulls which lived from the Bronze Age to twenties centuries and excavated in Uzbekistan were used in this study. Morphological sex was determined by Uzbekistan scientist, and genotype sex was determined by improved amelogenin PCR amplication developed in this study. Among 20 morphological males, 13 samples (65%) were genotypical male. Among 40 morphological females, 20 samples (50%) were genotypical male. In conclusion, morphological method might be inadequate for sex determination of ancient bones. The improved amelogenin PCR method will be useful in sex determination of ancient bones.

      • KCI등재후보

        수영 전초 추출물의 항산화 활성 평가 및 성분 분석

        정유민 ( Yoo Min Jeong ),김호재 ( Ho Jae Kim ),이수현 ( Su Hyun Lee ),장도윤 ( Do Yun Jang ),최예찬 ( Yae Chan Choi ),민나영 ( Na Young Min ),공봉주 ( Bong Ju Gong ),박수남 ( Soo Nam Park ) 대한화장품학회 2014 대한화장품학회지 Vol.40 No.4

        본 연구에서는 수영 전초 추출물에 대하여 항산화 활성 평가와 성분 분석을 실시하였다. 실험에는 수영 전초의 50% 에탄올 추출물, 에틸아세테이트 분획, 아글리콘(aglycone) 분획을 사용하였다. 자유라디칼 소거활성(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH, FSC<sup>50</sup>)의 크기는 아글리콘 분획 > 에틸아세테이트 분획 > 50% 에탄올 추출물 순으로, 아글리콘 분획(45.10 μg/mL)이 가장 큰 라디칼 소거활성을 나타냈다. Fe<sup>3+</sup>-EDTA/ H<sub>2</sub>O<sub>2</sub>계를 이용한 활성산소 소거활성(총항산화능, OSC<sub>50</sub>)도 에틸아세테이트 분획 > 아글리콘 분획 > 50% 에탄올 추출물 순으로 에틸아세테이트 분획(2.68 μg/mL)에서 가장 큰 항산화능을 나타내었다. 에틸아세테이트 분획의 총항산화능은 수용성 항산화제로 알려진 L-ascorbic acid (6.88 μg/mL)보다 큰 것으로 나타났다. 활성산소인 <sup>1</sup>O<sub>2</sub>으로 유도된 사람 세포 손상에 있어서, 수영 전초 추출물은 모두 농도 의존적(1 ∼ 25 μg/mL)으로 세포보호 활성을 나타내었다. 특히 아글리콘 분획(τ<sub>50</sub>, 104.80 min)은 가장 큰 세포 보호 활성을 나타내었다. TLC, HPLC, LC/ESI-MS/MS을 이용하여 수영 전초 추출물 중 에틸아세테이트 분획에 대하여 성분 분석을 실시하였다. 그 결과, 에틸아세테이트 분획은 orientin, isoorientin, vitexin, isovitexin 등의 플라보노이드가 함유되어 있음을 확인하였다. 이상의 결과들은 수영의 전초 추출물이 <sup>1</sup>O<sub>2</sub>을 비롯한 활성산소종을 소광 또는 소거함으로써 태양 자외선에 노출된 피부에서 항산화제로서 작용할 수 있음을 가리키며 항노화 기능성 화장품 원료로서 응용 가능성이 있음을 시사한다. In this study, the antioxidative effects and component analysis for the extracts of Rumex acetosa L. were investigated. All experiments were performed with 50% ethanol extract, ethyl acetate fraction and aglycone fraction obtained from dried R. acetosa L.. Free radical scavenging activities (1,1-diphenyl-2- picrylhydrazyl) size of, in the order of aglycone fraction > ethyl acetate fraction > 50% ethanol extract, aglycone fraction (45.10 μg/mL) showed the highest radical scavenging activity. Reactive oxygen species (ROS) scavenging activity (total antioxidant capacity, OSC<sub>50</sub>) on ROS generated in Fe<sup>3+</sup>-EDTA/H<sub>2</sub>O<sub>2</sub> system was also, in the order of ethyl acetate fraction> aglycone fraction> 50% ethyl acetate fraction, ethyl acetate fraction (2.68 μg/mL) was shown a great antioxidant capacity. The total antioxidant capacity of the ethyl acetate fraction was found to be greater than L-ascorbic acid, known as a typical hydrophilic antioxidant (6.88 μg/mL). The cellular protective effects of R. acetosa L. extracts on the <sup>1</sup>O<sub>2</sub>-induced cellular damage of human erythrocytes were exhibited at all concentration-dependent (1 ∼ 25 μg/mL). Especially, aglycone fraction (τ<sub>50</sub>, 104.80 min) in 25 μg/mL showed the most protective effect among extracts. Components of the ethyl acetate fraction obtained from R. acetosa L. extracts were analyzed by TLC, HPLC chromatogram, LC/ESI-MS/MS. As a result, the ethyl acetate fraction contained several flavonoids, such as orientin, isoorientin, vitexin, isovitexin. These results indicate that the R. acetosa L. extracts can be used as antioxidants in biological systems, particularly skins exposed to UV radiation by quenching and/or scavenging <sup>1</sup>O<sub>2</sub> and other ROS. Thus, the extracts of R. acetosa L. could be applicable to new anti-aging cosmeceutical ingredients.

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