유황오리로부터 항종양 활성 성분의 분리 및 정제

윤원호,황진용,김창한,Yoon Won-Ho,Hwang Jin-Yong,Kim Chang-Han 한국축산식품학회 2004 한국축산식품학회지 Vol.24 No.3

This study was carried out to investigate the antitumor activity from sulfur fed duck. The antitumor substances were crude purified by solvent extraction, silica gel column chromatography, and HPLC using C18 column. In MTT assay, the active compounds exhibited more cytotoxic activity on tumor cell lines than normal cell line. In addition of 100 $\mu\textrm{g}$/mL concentrations of crude purified active compounds, the growth inhibition rate of tumor cell lines was 56% (Hep-2j human larynx), 58% (KB; human epidermoid of mouth carcinoma), and 28% (MDBK; bovine normal kidney), respectively. The survival rate of clonogenic assay was 26% in Hep-2 and 28% in KB at 200 $\mu\textrm{g}$/mL. 본 연구에서는 유황오리로부터 항종양 효과를 나타내는 물질을 용매 추출법과 각종 크로마토그래피를 사용하여 분리 및 정제하였다. 유황오리로부터 정제한 활성 물질의 각종 종양세포에 대한 항암 효과를 측정한 결과 MTT assay는 100 $\mu\textrm{g}$/mL의 농도에서 HEp-2는 56%, KB는 58%의 세포 증식 억제 효과가 나타났다. 정상 세포주인 MDBK는 28%의 세포증식억제 효과가 나타나 정상 세포에 대한 세포 독성은 나타나지 않았다. Clonogenic assay는 200 $\mu\textrm{g}$/mL의 농도에서 HEp-2는 26%, KB는 28%의 생존율을 나타내었다. 따라서 유황오리로부터 정제한 활성 물질은 후두암 세포주인 HEp-2와 구강암 세포주인 KB에서만 특이적으로 세포 증식 억제 효과를 나타내었다.

BHA 와 NaCl 의 혼합첨가에 의한 미생물의 생육저해효과

윤원호,양종범,김창한 ( Won Ho Yoon,Jong Beon Yang,Chang Han Kim ) 한국축산학회 1985 한국축산학회지 Vol.27 No.1

These experiments were carried out to investigate the growth inhibition of Staphylococcus aureus, Escherichla coli and Pseudomonas fluorescens, respectively, in nutrient broth, and total viable cell counts in meat, using combination of butylated hydroxyanisole(BHA) and sodium chloride(NaCl). The results obtained were summarized as follows: 1. In the bacteria, Staphy. aureus was the most sensitive especially, bactericidal effect was shown at 200ppm BHA. With 5%-, 7%-NaCl and 50ppm BHA, a bacteriostatic effect was observed at 18, 12hr, respectively. 2. Cell numbers of E. coli increased at 200ppm BHA in the absence NaCl, but bactericidal effect was perceived at 5%-NaCl and 200ppm BHA, as well as, 7%-NaCl and 100ppm BHA. 3. The effect of bactericide on Ps. fluorescens was not present at below 200ppm BHA without NaCl, but at any level of BHA with above 5%-NaCl. 4. The addition of BHA and NaCl was effective in the prevention of total viable cell counts in raw meat (pork).

미생물 일반 , 생리 및 대사 Pyricularia oryzae 의 성장을 억제하는 물질을 생산하는 Streptomyces sp . NA - 52 의 분리 및 동정

윤원호,임대석,이명섭,김창한 ( Won Ho Yoon,Dae Seog Lim,Myung Sub Lee,Chang Han Kim ) 한국미생물생명공학회 1997 한국미생물·생명공학회지 Vol.25 No.6

차나무 종자 추출물의 항균활성 및 항종양활성

윤원호,최재훈,이경호,김창한,Yoon, Won-Ho,Choi, Jae-Hoon,Lee, Keyong-Ho,Kim, Chang-Han 한국식품과학회 2005 한국식품과학회지 Vol.37 No.1

본 연구는 폐기되는 차나무 열매를 이용하여 향균활성과 항종양활성을 비교하고 이용가능성에 대하여 탐색하고자 하였다. 항균활성과 항종양활성을 알아보기 위하여 70% 에탄올과 물 추출물의 활성을 측정하였다. 항균활성은 식중독균과 몇 종의 병원균, 효모, 곰팡이 등 17균주에 대하여 추정하였고, 항종양 활성은 6종류의 인체 암세포주, 1종류의 정상세포주에 대하여 조사하였다. 차나무 잎, 종자와 과피의 항균활성을 비교한 결과는 종자의 70% 에탄올과 물 추출물에서 효모에 대하여 항균활성이 높게 나타났다. 특히, candida albicans, Cryptococcus neoformans에 대하여 항균활성을 보였다. 종자 물 추출물을 $80,\;100^{\circ}C$에서 30분, $121^{\circ}C$에서 15분간 열처리 후 항균활성을 검색한 결과 가열온도에 따른 차이는 크게 나타나지 않았다. 항종양 활성을 검색하기 위하여 MTI assay를 통해 활성을 측정하였다. 과피 추출물에서 전혀 활성이 없었지만 종자 추출물에서는 큰 활성을 나타내었다. 극성용매인 70% 에탄올과 물 추출물의 종양세포 증식억제효과가 높게 나타났으며 그중에서 물 추출물이 70% 에탄올 추출물 보다 높게 항종양 활성이 나타났다. 차나무 종자로부터 추출한 활성물질의 종양세포와 정상 세포에 대한 세포독성을 MTT assay로 비교한 결과 $50{\mu}g/mL$의 농도에서 난소암 세포인 SK-OV-3는 70%의 억제율을 나타낸 반면 정상세포에서는 10% 미만으로 나타나 정상세포보다 종양세포에 대하여 보다 큰 선택 독성을 나타내는 것으로 보인다. Antimicrobial and antitumor activities of Camellia sinensis L seed extracts were investigated. Seed extracts showed antifungal activities against Candida albicans IFO 1594 and Cryptococcus neoformans. Inhibition zone of 20 mm was shown by 70% ethanol extract against C. albicans IFO 1594 at 100 mg/mL. Antifungal activity of seed extract was not decreased by heating at 80 and $100^{\circ}C$ for 30 min or at $121^{\circ}C$ for 15 min, indicating heat-stability of seed component. Growth-inhibitory effects were observed in 70 and 10% of tumor cell line SK-OV-3 and normal ceil line NIH/3T3 at $50{\mu}g/mL$, respectively.

Lactobacillus bulgaricus와 Kluyveromyces marxianus의 혼합 스타터를 이용한 기능성 발효유의 특성

윤원호,남보라,김진만,김창한,Yoon Won-Ho,Nam Bo-Ra,Kim Jin-Man,Kim Chang-Han 한국축산식품학회 2006 한국축산식품학회지 Vol.26 No.2

본 연구는 기능성 발효유로서 티벳산 발효유에서 분리한 효모(Kluyveromyces marxianus)와 유산균(Lactobacillus bulgaricus)의 혼합스타터를 이용한 발효유를 제조하여 배양 기간별 균수 측정, pH, 적정산도, ethanol 함량, 항암 활성에 대해 알아보았다. 배양은 $30^{\circ}C$에서 curd가 형성되는 시점에 마치게 되는데 이때의 최종 산도는 0.68, pH는 4.5 이었다. 배양 36시간 후의 균수는 K. marxianus는 $5.3{\times}10^9 CFU/mL$, L. bulgaricus는 $3.2{\times}10^9 CFU/mL$ 이었고 ethanol 함량은 0.35%까지 증가하였다. 36시간 배양하여 제조된 발효유의 항종양 활성은 HEp-2에 대해서는 86.6%, HEC-1B에 대해서는 70.3%, SW-156에 대해서는 60.4%, SK-MES-1에 대해서는 57.14%의 항종양 활성을 나타내었다. 이상의 결과 기존의 유산균 발효유에 효모를 첨가한 알코올 발효유의 제조가 가능하며, 제품의 항종양 활성의 측면에서도 높은 기능성을 나타내는 것으로 나타났다. This study was carried out to investigate characteristics of acid and alcohol fermented milk by mixed starters made by Lactobacillus bulgaricus (KCTC 3635) and Kluyveromyces marxianus (KCTC 17212) for 36 hours when the curds were formed. Final pH and titratable acidity were about 4.5 and 0.68%, respectively. The viable cell counts of lactic acid bacteria and yeast for alcohol fermented milk were increased to $3.2{\times}10^9 CFU/mL$ and $5.3{\times}10^9 CFU/mL$, respectively. The ethanol contents increased to 0.35% during fermentation. Antitumor activities of the fermented milk against tumor cell lines, such as HEp-2, HEC-1B, SW-156 and SK-MES-1 showed to 86.6, 70.3, 60.4 and 57.14%, respectively.

당첨가 및 가열처리에 의한 근원섬유 단백질의 전기영동 Pattern 변화

양종범(Jong-Beom Yang),윤원호(Won-Ho Yoon),고명수(Myung-Soo Ko),김창한(Chang-Han Kim) 한국식품과학회 1990 한국식품과학회지 Vol.22 No.6

Isolation and Physico-Chemical Properties of Cycloheximide-isomer from Streptomyces sp.NA-52

Yoon,Won-Ho,Lim,Dae-Seog,Kim,Chang-Han,Yoon,Sang-Kun 건국대학교 동물자원연구센터 1999 動物資源硏究誌 Vol.20 No.-

새로운 분리균주 Streptomyces sp. NA-52는 Pyricularia oryzae와 Chlorella regularis에 대해 항균활성물질을 생산하는 것으로 밝혀졌다. 그 균주에 의해 생산되는 항생물질 복합물 중 (compound A 및 B), 활성이 좋은 화합물 A가 분리되었으며, 그것의 이화학적 성질이 조사되었다. 그 화합물의 분자량은 281(EI-MS)로 결정되었고, UV, IR 및 ¹H, 13C NMR 스펙트럼 분석결과, cycloheximide(4-[2-(3, 5-dimethyl-2-oxocyclohexyl)-2-hydroxyethyl]-2,6-piperidinedione)의 이성체와 같은 glutarimide 그룹의 항생물질로 분류되었다. 한편, 백자무우 씨앗의 발아시험결과, compound A는 cycloheximide와 마찬가지로 백자무우씨앗에 대해 강한 독성을 가지고 있었으나, compound B는 그 씨앗을 100% 발아시켰다. 지금까지의 cycloheximide 이성체와 비교해 볼 때, compound B는 백자무우씨앗에 대해 전혀 독성을 나타내지 않는, glutarimide 그룹내의 새로운 cycloheximide 이성체로 추정되었다. 결과적으로 cycloheximide와 같은 glutarimide 그룹의 항생물질이 Streptomyces griseus가 아닌 다른 방선균종에서도 생산된다는 것으로 밝혀졌다. A new isolate of Streptomyces sp. NA-52 was found to produce antibiotics with antimicrobial spectra against Pyricularia oryzae and Chlorella regularis. The main active component, compound A, of the antibiotic complex (compounds A and B) produced by the strain was isolated, and its physico-chemical properties were investigated. The molecular weight of the compound was determined to be 281 (EI-MS). UV, 1R, and ¹H and 13C NMR spectra suggested that the compound is a cycloheximide (4-[2-(3,5-Dimethyl-2-oxocyclohexyl)-2-hydroxyethyl]-2,6-piperidinedione) isomerlike glutarimide group antibiotic. Ina germination test using BAIKJA radish seed, neither compound A nor cycloheximide germinated the seeds, but compound B completely germinated them. Compared with known cycloheximide-isomers, compound B may be thought of as a new cycloheximide-isomer, without toxicity for BAIKJA radish seed, in the glutarimide group.

항진균성 항생물질을 생산하는 Streptoverticillium sp. NA-4083의 분리 및 동정

임대석,윤상균,이명섭,윤원호,김창한 한국미생물생명공학회 ( 구 한국산업미생물학회 ) 1996 한국미생물·생명공학회지 Vol.24 No.6

전국 각지의 토양에서 441균주의 방선균을 분리한 결과 Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton rubrum, Nanniza otae 및 Pyricularia oryzae 등의 진균에 광범위한 항진균활성을 나타내는 방선균 NA-4803을 선발하여 그 균주의 동정을 실시하였다. 분리균주 NA-4803은 Gram 양성세균 4균주, Gram 음성세균 2균주, 효모 2균주, 곰팡이 5균주, 조류 1균주에 대해 약한 항균활성을 보이는 반면, 곰팡이 Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton rubrum, Nanniza otae 및 Pyricularia oryzae에 대해서는 비교적 강한 항진균활성을 나타내었다. 분리균주 NA-4803은 생리적 특성, 항균활성, lectithinase 및 lipolytic 활성, 각종 유기물의 분해력, 항생물질에 대한 저항성, 온도, pH 및 화학저해제의 첨가에 따른 생육, 질소원의 이용성 및 탄소원의 이용성 등에 있어서 cluster group F에 속하며 Cluster No. 58에 해당하는 Streptoverticillium blastmyceticum과 가장 유사하게 비교·동정되었으나 nitrate 환원성의 양성반응, L-tyrosine 분해력의 음성반응 및 cephaloridine에 대한 저항성에 음성반응을 보였고, 탄소원 중 L-rhamnose와 inulin을 이용하는 것으로 보아 Streptoverticillium blastmyceticum과 다른 특성을 나타내었다. 따라서 분리균주 NA-4803은 Streptoverticillium sp. NA-4803으로 동정되었다. The aim of the present research program was to develop a strain of actinomycetes producing antifungal substance. Soil samples were collected from various sites in Korea and a number of actinomycetes were isolated from the soil samples by applying selective agar for actinomycetes. Among over 440 isolates, a strain (NA-4803) producing antifungal substance against Trichophyton spp. Nannizzia otae and Pyricularia oryzae was selected. The strain NA-4803 was identified as strain similar to Streptoverticillium blastmyceticum with respect to morphological and physiological characteristics, lecithinase and lipolytic activity, degradation of organic compounds, resistance to antibiotics and utilization of carbon and nitrogen sources. But it showed some differences such as positive reaction of nitrate reduction, negative reaction of L-tyrosine degradation, resistance to cephaloridine, and utilization of I rhamnose and inulin. The strain NA-4803 was named as Streptoverticillium sp. NA-4803.