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        유통 축·수산물 중 잔류벤질페니실린의 검출 및 모니터링

        이효정(Hyo Jeong Lee),강영원(Young Won Kang),이수민(Soo Min Lee),안경아(Kyung A An),이륜경(Ryun Kyung Lee),서상철(Sang Cheol Seo),이주희(Ju Hee Lee),임무혁(Moo Hyeog Im),이정림(Jeong Rim Lee),홍충만(Choong Man Hong),장문익(Moon Ik Ch 한국식품과학회 2014 한국식품과학회지 Vol.46 No.3

        국내 유통 중인 돼지고기, 소고기, 닭고기, 넙치 232건의 시료에 대해 벤질페니실린의 잔류량을 조사하기 위해 현행 식품공전 상 축·수산물 중 벤질페니실린 분석법에 대한 검증을 실시하고 모니터링을 수행하였다. 그 결과 벤질페니실린에 대한 분석법은 CODEX에서 요구하는 기준에 적합한 정밀성과 정확성을 보였다. 벤질페니실린의 잔류량 모니터링 결과 축산물 193건 중 11건, 수산물 39건 중 2건 총 13건이 검출되었다. 검출된 수준은 축·수산물 12건에서 0.001-0.004 mg/kg으로 잔류허용기준 이하로 검출되었으나, 축산물 중 국내산 돼지고기 1건에서 잔류허용기준을 초과한 0.134 mg/kg 수준으로 검출되어 해당 유관기관에 부적합 통보 및 사후관리를 요청하였다. 따라서 벤질페니실린 등 항생제는 다른 동물용 의약품에 비해 사용빈도가 많은 만큼 지속적으로 잔류모니터링과 관리가 필요할 것으로 판단된다. Penicillin and its salts, including the benzatine, procaine, and sodium salts, have been widely used in human and veterinary medicine. Owing to their low toxicity, they currently form the most important group of antibiotics. However, overdose and abuse of these antibiotics may lead to potential risk in human health. Therefore, this study was conducted to validate the analysis method established by the Korea Food Code in 2012 and to monitor the levels of benzylpenicillin residues in products with reference to the maximum residue level (MRL). Of the 232 product samples tested, benzylpenicillin was detected in 11 livestock products and 2 marine products. Benzylpenicillin concentrations were found to be lower than the MRL in 12 products; however, the concentration of benzylpenicillin was found to be greater than the MRL in 1 pork product. The limit of quantification (LOQ) for benzylpenicillin was found to be 0.001-0.002 mg/kg, with an average recovery of 90.4-115.3%. Calibrations showed good linearity of 0.995 over a range of 0.002-0.05 mg/kg.

      • Baculovirus를 利用한 Canine Parvovirus VP2蛋自質의 發現

        朴鍾賢,宋載永,玄芳動,安動濬,姜永源,全茂炯,安壽煥 충남대학교 생물공학연구소 1998 생물공학연구지 Vol.6 No.-

        국내에서 分離된 개파보바이러스주(V20주)의 VP2 遺傳子를 baculovirus system을 이용하여 발현시켜 다음의 結果를 얻었다. 1. 개파보바이러스의 VP2 유전자를 PCR에 의해 增幅하여 1755bp의 VP2遺傳子를 pUC19에 클로닝하여, 클로닝된 遺傳子를 polyhedrin promoter를 가지는 baculovirus expression vector인 pVL1393에 옮겨 VP2 발현벡터인 pVL1393-VP2를 얻을 수 있었다. 2. pVL1393-VP2 plasmid와 baculovirus DNA와의 homologous recombination에 의해 재조합바이러스인 VP2-BV를 얻을 수 있었으며, 그 발현효율은 2.000-5.000 HAU/0.05 ml이었다. 3. 免疫沈澱法에 의해 발현된 단백질은 개파보바이러스의 VP2단백질과 유사한 64 kb에 달하는 것이었으며, 血球凝集能을 지니고 있었다 4. 血球凝集能을 지닌 蛋白質이 여러 陽性血淸에 있어서 抗體수준을 測定할 수 있는지 개파보바이러스항원과의 相關性을 比較한 바 0.94 (n=125. p<0.01)의 相關係數를 보였다 5. 발현 VP2白은 virus-like particles를 形成하였으며, 그 크기로는 개파보바이러스와 비슷한 25 ㎚의 크기를 갖았다. Canine parvovirus(CPV) is a member of autonomous replicating parvoviruses and is aetiologically associated with enteritis and mycoarditis in puppies. The capsids of CPV are composed of three structural proteins: VP1, VP2 and VP3. The VP2 protein is the major component of capsid. The VP2 gene of a canine parvovirus. V20 strain isolated in Korea was cloned into baculovirus expression vector, and subsequently the VP2 protein was expressed by a recombinant baculovirus under the control of polyhedrin promoter. The recombinant VP2 protein expressed in Spodoptera frugiperda 9(Sf9) cells was detected by haemagglutination(HA) test and immunofluorescent antibody assay. Molecular weight of the recombinant VP2 protein expressed was estimated as 64Kd when tested by immunoprecipitation test using anti-CPV monoclonal antibody. In haemagglutination inhibition(Ⅲ) test. 8 HA units of the recombinant VP2 protein antigen was successfully utilized to determine a level of antibody against CPV in various positive sera. The recombinant VP2 protein showed also the capability to form virus like particles similar in size and appearance to the CPV virions.

      • Pocine Adenovirus-3의 E1B Region의 鹽基序列 分析

        朴鍾賢,宋載永,李重馥,玄芳勳,安東濬,車相昊,裵用泰,姜永源,Reddy, P S,全茂炯,安壽煥 충남대학교 생물공학연구소 1999 생물공학연구지 Vol.7 No.-

        돼지 아데노바이러스(PAV-3). 6618주의 EIB region이 包含되어 있는 map unit 4.0에서 9.7까지의 유전자에 대한 1,984 bp의 염기서열을 決定하였으며, 이 結果를 알려진 여러 아데노바이러스 유전자와 비교하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. PAV-3의 EIB유전자는 10개의 ORF로 구성되어 있으며, 그 중 아데노바이러스의 단백질과 유사성이 있는 것은 ORF1, ORF2 및 ORF3이었다. ORF1은 Ad41의 19kd 와 BAV-2에서의 EIB ORF2에서의 아미노산의 一致率은 각각 32%와 31%이었다. 2. ORF2는 Ad2 55kd protein과 tupaia adenovirus 44kd protein가 각각 34%로 아미노산 一致率이 가장 높았으며, Ad41의 52kd protein. BAV-3의 EIB ORF3에서도 33%의 一致率을 보였다. 3. ORF1은 61-666 uncleotide (606 bp), ORF 2에서는 429-1,850 uncleotide (1,422 bp)의 부위로 각각 202, 474 a.a로 構成되었으며, 예상되는 분자량은 20 kd와 52 kd이었다. 4. ORF3는 hexon-associated pIX유전자로 추정되며 내부에 1개의 polyadenylation signal(ATAAA)이 1938-1942 uncleotide에 위치하였으며, 이 부위는 TATA box (1937-1942 uncleotide)와 중복되어 존재하였다. Porcine adenovirus type 3 (PAV-3) does not cause severe infection in pigs. Adenovirus has been suggestive of live vaccine vector carrying foreign gene. One of insertion regions is delayed early (EIB) region. However, EIB region of PAV-3 has not been molecularly characterized to date. Nucleotide sequence of EIB of PAV-3 was determined. The EIB region was composed of 1,984 bp and located between 4.0 and 9.7 map units. Three potential open reading frames(ORFs) with low level of homology to other adenoviruses and a polyadenylation signal were identified in the rightward direction of genome. The nucleotide and the predicted amino acid sequences of EIB were compared to those of human and animal adenoviruses. One of the three potential ORFs. ORF1 encoded a polypeptide homologous to bovine adenovirus type 2(BAV-2) ORF2 and human adenovirus type 41(Ad41) 19 kd protein. ORF2 encoded a polypeptide homologous to human adenovirus type 2(Ad2) 55 kd protein, bovine adenovirus type 3(BAV-3) ORF3 and porcine adenovirus type 4(PAV-4) ORF2. The predicted protein of ORF1 had homology to those of Ad41 and BAV-2 with 32 and 31% respectively, whereas the deduced protein of ORF2 had homology to those of Ad2. BAV-3 and PAV-4 with 34, 33 and 29%, respectively.

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