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      • KCI등재

        Effects of epigallocatechin gallate on CoCl_(2)-induced apoptosis in PC12 cells

        Yang, Kyu-Ho,Mo, Hyun-Chul,Choi, Nam-Ki,Kim, Seon-Mi,Kim,Won-Jae 大韓小兒齒科學會 2006 大韓小兒齒科學會誌 Vol.33 No.1

        Neuronal apoptotic events, consequently resulting in neuronal cell death, are occurred in hypoxic/ischemic condition. This cell death has been shown to be accompanied with the production of reactive oxygen species (ROS), which can attack cellular components such as nucleic acids, proteins and phospholipid. However, the underlying mechanisms of apoptosis induced in hypoxic/ischemic condition and its treatment methods are unsettled. Cobalt chloride (CoCl_(2)) has been known to mimic hypoxic condition including the production of ROS. Epigallocatechin gallate (EGCG). a green tea polyphenol, has diverse pharmacologial activities in cell growth and death. This study was aimed to investigate the apoptotic mechanism by CoCl_(2) and effects of EGCG on CoCl_(2)-induced apoptosis in PC12 cells. Administration of CoCl_(2) decreased cell survival in dose- and time-dependent manners and induced genomic DNA fragmentation. Treatment with 100 µM EGCG for 30 min before PC12 cells were exposed to 150 µM CoCl_(2), being resulted in the cell viability and DNA fragmentation being rescued. CoCl_(2) caused morphologic changes such as cell swelling and condensed nuclei, whereas EGCG attenuated morphologic changes by CoCl_(2). EGCG suppressed the apoptotic peak and a loss of Δψ_(m) induced by CoCl_(2). CoCl_(2) decreased Bcl-2 expression but Bax expression was not changed in CoCl_(2)-treated cells. EGCG attenuated the Bcl-2 underexpression by CoCl_(2). CoCl_(2) augumented the cytochrome c release from mitochondria into cytoplasm and increased caspase-8, -9 and caspase-3 activity, a marker of the apoptotic executing stage. EGCG ameliorated the incruement in caspase-8, -9 and -3 activity, and cytochrome c release by CoCl_(2). NAC (N-acetyl-cysteine), a scavenger of ROS, attenuated CoCl_(2)-induced apoptosis in consistent with those of EGCG. These results suggest, that CoCl_(2) induces apoptotic cell death through both mitochondria- and death receptor-dependent pathway and EGCG has neuroprotective effects against CoCl_(2)-induced apoptosis in PC12 cells. 신경세포자멸사는 저산소 및 허혈환경에서 일어나며 이러한 세포죽은 reactive oxidant species (ROS) 생성을 동반함이 알려져있다. 그러나, 저산소 및 허혈환경에서 일어나는 세포자멸사의 기전 및 그 치료방법은 아직 정립되어 있지 않다. CoCl_(2)는 ROS를 생성하는 등 저산소환경과 유사한 조건을 초래하는 것으로 알려져 있다. Epigallocatechin gallate (EGCG)는 녹차의 polyphenol 성분으로서 세포성장과 죽음에 다양한 약리학적 효과를 나타냄이 알려져 있다. 본 연구는 PC12 세포에서 CoCl_(2)에 의한 세포자멸사기전을 밝히고 이에 미치는 EGCG의 효과를 조사하는데 목적이 있다. Cell viability는 MTT 측정으로 조사되었고, DNA fragmentation은 DNA laddering으로 조사되었다. Bcl-2와 Bax발현 정도는 RT-PCR로, caspase-3와 -9의 활성은 spectrophotometer, caspase-8의 활성은 flow cytometry에 의해 측정되었다. 미토콘드리아에서 세포질로 분비된 cytochrome c는 western blot으로, 분해된 DNA 양과 미토콘드리아 세포막전위 (Δψ_(m))는 FACScan으로 조사되었다. CoCl_(2)투여로 PC12 세포수는 용량 및 시간 의존형태로 감소하였고, genomic DNA fragmentation이 발생하였다. CoCl_(2)투여로 야기된 cell viability의 감소와 DNA fragmentation은 EGCG 전처치에 의해 억제되었다. CoCl_(2)은 세포용적팽창과 condensed nuclei 같은 형태적 변화를 일으켰으며, apoptotic peak, Δψ_(m)감소 및 cytochrome c 유리를 야기하였다. EGCG는 CoCl_(2)에 의한 세포형태변화, apoptotic peak, Δψ_(m)소실 및 cytochrome c 유리를 억제시켰다. CoCl_(2)는 Bcl-2 발현을 감소시켰지만, Bax 발현에는 영향을 미치지 않았다. EGCG는 CoCl_(2)에 의해 야기된 Bcl-2 발현 감소를 억제시켰다. CoCl_(2)는 caspase-3, -8, 그리고 -9의 활성을 증가시켰으며, EGCG는 CoCl_(2)에 의한 세포자멸사를 억제시켰다. 본 실험결과는 PC12 세포에서 CoCl_(2)가 미토콘드리아 의존 및 death receptor의존 기전으로 세포자멸사를 일으키며, EGCG는 세포자멸사기전을 억세지킴으로 신경보호기능을 가짐을 시사하였다.

      • 흉선종 제거후에 발생한 재생 불량성 빈혈 : 증례보고

        전원선,이상철,김현정,배상병,김찬규,이남수,박노진,이규택,박성규,홍대식,박희숙,원종호 순천향의학연구소 2007 Journal of Soonchunhyang Medical Science Vol.13 No.2

        Thymoma is associated with myasthenia gravis, Pure red cell aplasia, and autoimmune diseases such as autoimmune hemolytic anemia, aplastic anemia, and hypogammaglobulinemia. It's association with aplastic anemia is rare and aplastic anemia appearing after surgical removal of thymoma is especially rare. The authors hereby report a case of aplastic anemia occuring in a patient who was diagnosed with thymoma and myasthenia gravis and had the tumor surgically removed. The patient was treated with anti-thymocyte globulin, cyclosporin, and prednisolone, and showed partial remission with hematologic improvements after 12 months.

      • 시토키닌의 종류와 농도가 포도의 기내생장에 미치는 영향

        金昇熙,金善圭 충북대학교 농업과학기술연구소 1998 農業科學硏究 Vol.15 No.-

        Shoot tips and node segments derived from cuttings of four grape cultivars (Cabernet Sauvignon, Chardonnay, S. 9110, Sheridan) were cultured in vitro on MS media supplemented with varying levels of cytokinins (1.0 and 3.0 mg/L BA, kinetin, and 2-iP, 0.1 and 1.0 mg/L zeatin, 0.01 and 0.1mg/L thidiazuron). Shoot growth of 'S. 9110' and 'Sheridan' was quite normal at 1.0 mg/L BA while that of 'Cabernet Sauvignon' and 'Chardonnay' was enhanced in 1.0 mg/L zeatin. Shoot multiplication was favored by BA for 4 grape cultivars, but varietal differences were noted in optimal concentration, showing abundant shoot proliferation at 3.0 mg/L with 'Cabernet Sauvignon' and 'S. 9110' or at 1.0 mg/L with 'Chardonnay' and 'Sheridan'. Varying levels of callus were formed according to cultivar and cytokinins except 'Chardonnay' which failed to form callus. Rhizogenesis was recognized in all cultivars tested, and zeatin and 2-iP were most favorable for root formation. Simultaneous root and callus formation were not noted. Total plantlet weight of 'Cabernet Sauvignon', 'Chardonnay' and 'S. 9110' was higher at 1.0mg/L BA, but that of 'Sheridan' was higher at 3.0 mg/L BA.

      • KCI등재

        활동 중심 문학 교수-학습의 문제점과 그 극복방안

        김규선,진선희 한국초등국어교육학회 2004 한국초등국어교육 Vol.26 No.-

        문학 영역에서 '활동'중심 교수-학습의 의의와 한계를 밝혀 그 문제점을 해결할 수 있는 대안을 살펴보고, 실제 현장의 적용가능성을 탐색해보는 것을 목표로 한다. 활동중심 문학 교수-학습은 여러 가지 의의를 가짐에도 불구하고 구체적인 교수-학습의 상황에서는 자칫 학습독자들에게 진정한 문학 감상이나 체험을 제공하지 못한 채 학습독자들이 활동 자체에 매몰되어 활동은 있었으되 문학 감상은 없는 수업이 되는 경우 등 몇 가지 문제점을 가지고 있다. 이러한 문제점을 극복하고 보다 효율적인 활동중심 문학 교수-학습의 전개를 위한 방안으로, 계획된 활동이 어떤 문학능력을 기르려고 하는 것인지를 교사와 학생모두 교수-학습의 전 과정에서 분명하게 인식하도록 여러 번 되새기는 기회를 갖는 것과 더불어 활동의 결과와 과정에 대한 반성적 사고를 하도록 하는 것이 필요하다. 또 전개되는 학생 활동을 교사의 계획적이고 의도적인 발문에 의해 관리하고 지도하는 것, 교수-학습의 목표에 맞추어 활동들의 시간을 적절하게 배분하는 교사의 능력, 활동의 방향을 조절하고 통제할 수 있는 간단한 메타적 조작과정을 병행하는 것 등을 활동중심 문학 교수-학습이 가진 문제점을 극복하는 각명(inscription)장치로 제시하였다. This study set out to investigate 'activity-based' teaching-learning methods adopted in literature in terms of its implications and limitations, to search for the alternatives to solve the problems, and to examine the possibility of their application to the field. Despite the many implications, the activity-based literature teaching-learning method does have some limitations such as failing to provide true literary appreciation or experiences to the students under specific teaching-learning situations and letting the students be lost themselves in the activity itself with no literary appreciation. The followings are the plans to overcome those limitations and to make the activity-based literature teaching-learning method more effective: first, they should remind themselves of what literary capacities are targeted in the planned activity over and over again so that both the students and the teachers can have a clear understanding of them throughout the teaching-learning process. They also need to do reflective thinking on the results and process of the activity. The teachers need to use their planned and intentional postscripts to monitor and guide the student activities, to increase their ability to allocate time to each activity properly according to the goals of teaching-learning, and to introduce a simple meta-manipulation process to adjust and control the directions of the activities in order to improve the effects of the activity-based literature teaching-learning method.

      • 과수 조류피해 방지에 관한 연구

        김영호,윤철구,임상철,손인창,박재혁,김동환,김선규 충북대학교 한국과학재단 지정 첨단원예기술개발 연구센터 2002 연구보고서 Vol.6 No.-

        새로운 저비용 고효율 조류 피해 방지법의 개발을 위한 기초자료를 얻기 위하여, 현재 사과, 배 과수원에서 사용되고 있는 조류피해 방지 방법들의 정확한 효과를 서로 비교 검토하고, 아울러 충북지역 과수 재배 농가들을 대상으로 유해조류에 의한 피해 실태와 경제성 있는 조류 피해방지 방법에 대한 설문조사를 병행 실시한 결과는 다음과 같다. 1. 조류피해는 방조망 설치에 의해서만 완전히 방지할 수 있었으며, 조류 피해율별 손익계산 결과를 참고하여 이익이 있을 때는 표준방조망을 설치하고, 그렇지 않을 경우에는 설치비가 저렴하며 농가에서 간단히 시공할 수 있는 간이방조망 설치가 더 경제적인 것으로 판단되었다. 도내 과수 농가의 조류피해는 지역 간에 큰 차이가 있었으며, 음향적 방제인 버드가드와 보호봉지인 망사봉지에 의한 방제가 가장 효과적이었다. 그러나 버드가드는 높은 설치비용이 문제되므로, 퇴치 효과가 비슷하거나 더 우수하면서 저렴한 한국식 음향 기구를 개발할 필요가 있는 것으로 판단되었다. 보호봉지인 UV 봉지와 플라스틱 보호캡 및 망사봉지 처리는 품종에 관계없이 피해를 현저하게 감소시켰으나, 과실의 착색 등 품질에 미치는 영향에 대해서 추가적인 연구와 검토가 필요한 것으로 생각되었다. To obtain basic data for low cost-high efficiency control methods for bird damage, the available control methods currently in use mostly in Chungbuk Province were tested on site, and the control efficiency was compared. Also, a comprehensive survey of actual bird damage and the control methods on model apple and pear growers in Chungbuk Province was conducted. The results are summarized as follows. The perfect control for bird damage was possible only through bird net, it was recommended that profit-and loss account must be considered before installing bird net, and when the 'standard bird net' does not come up to break-even point, more economic and convenient 'simplified bird net' should be a alternative. Actual extent of bird damage varied according to the locality, and imported acoustic apparatus BirdGard^R, development of our own system with superior or same quality and reasonable price is necessary. Fruit bags such as UV bags, plastic protective caps, and net bags were highly effective for bird damage control, irrespective of fruit species and cultivar, but further study to resolve some problems such as poor coloration caused by bagging is necessary.

      • KCI등재

        치태 형성과 휘발성 유황화합물 생성을 억제하는 Lactobacillus salivarius의 분리 및 동정

        김미형,양규호,최남기,김선미,오종석 大韓小兒齒科學會 2005 大韓小兒齒科學會誌 Vol.32 No.2

        우리 인체에는 의학적으로 유용한 기능을 가진 세금들이 정상적으로 존재하며 구강내에도 독특한 기능을 나타내는 세균들이 상재한다. 본 연구에서는 치아우식증이 없는 소아의 타액에서 분리한 유산균 2주가 Streptococcus mutans에 의한 인공치태 형성과 혐기성 세균에 의한 휘발성 유황화합물 생성을 억제하는 것을 화인하고, API 50 CHL medium kit를 이용한 생화학적 검사와 165 rDNA sequencing으로 동정하여 다음과 같은 결과를 얻었다 1. 분리균주는 2주 모두 그람양성 간균으로 과산화수소를 생성하였다. 2. 인공치태의 무게는 Streptococcus 단독 배양시 124.4土30.4mg이었으나, 분리균주와 병합 배양시에는 각각 5.2±2.0mg, 10.6±6.6mg으로 현저하게 감소하였다(p<0.05). 3. Steptococcus mutans의 생균수는 단독 배양시 ml단 3.4×10^(9)이었으나, 분리균주와 병합 배양시에는 각각 ml당 4.6x1과 2.4×10^(8)으로 감소하였다. 4. Fusobacterium nucleatum을 30분간 진탕한 후 측정한 상청액의 흡광도는 1.286이었으나, Fusobacterium nucleatum과 분리균주를 병합으로 30분간 진탕한 후 측정한 상청액의 흡광 도는 각각 0.628과 0.497로 감소하였으며, 상호결합 정도는 29.4%와 57.8%이었다 5. Fusobacterium nucleatum 단독 배양시 cysteine과 FeSO₄를 첨가한 배지를 가한 후 측정한 침전물의 배지 흡광도는 1.794이었으나, 분리균주와 병합 배양시 측정한 침전물의 배지 흡광도는 각각 1.144와 0.915로 감소하였으며, Porphyromonas gingivalis단독 배양시 침전물의 배지 흡광도는 1.932이었으나 분리균주와 병합 배양시에는 침전물의 배지 흡광도가 각각 1 170과 1.266으로 감소하였다. 6. 분리균주를 API 50 CHL medium kit로 탄수화물 발효검사를 시행한 결과, 분리균주 1주는 Lactobacillus salivarius로, 다른 분리균주는 Lactobacillus delbruekii subsp. salicinius로 동정되었다. 7. 분리균주를 165 rDNA partial sequencing으로 동정 한 결과, 2주 모두 Lactobacillus salivarius subsp. sailcinius와 유전자 유사치가 99.60% 99.73%를 보여 Lactobacillus salivarius subsp. salicinius로 동정되었다. 이상의 결과를 종합하면 치아우식증이 없는 소아의 타액에서 분리된 유산균 중 과산화수소를 분비하여 인공치태 형성과 휘발성 유황화합물 생성을 억제하는 분리균주는 Lactobacillus salivarius subsp. Salicinius로 동정되었다. There are normal inhabitants doing medically useful functions in the body. There are many kinds of bacteria performing specific functions in the oral cavity. Two strains of lactic acid bacteria were isolated from inhabitants of caries-free children's oral cavity, which inhibited the formation of artificial plaque by Streptococcus mutans and the production of volatile sulfur compounds by anaerobic bacteria. The isolates were identified by the test using API 50 CHL medium kit and 16S rDNA partial sequencing. 1. Two isolates were Gram-positive bacilli and produced hydrogen peroxide. 2. When Streptococcus mutans was cultured in the media, the mean weight of formed artificial plaque on the orthodontic wires was 124.4±30.4 mg. whereas being reduced to 5.2±2.0mg and 10.6±6.6mg in the media cultured with Streptococcus mutans and each isolate, respectively (pW.05). 3. The number of viable cells of Streptococcus mutans was 3.4 x 10^(9) per ml in the cultured solution, whereas those of Streptococcus mutans in the combined culture with each of isolates were 4.6x 10^(8) and 2.4x 10^(8) per ml. 4. The optical density was 1.286 in the supernatant of Fusobacteriumn nucleatum after vortexing fol 30minutes, whereas in the supernatant of combined Fusobacterium nucleatum and each isolate, they were reduced to 0.628 and 0.497, which the percentages of coaggregation between them were 29.4% and 57.8%, respectively. 5. The optical density of Fusobacterium nucleatum precipitate was 1.794 in the culture media containing cysteine and FeSO4, being reduced to 1.144 and 0.915 in the coaggregated precipitates of Fusobacterium nucleatum and each isolate. The optical density of Porphyromonas gingivalis precipitate was 1,932 in the culture media, being reduced to 1.170 and 1.266 in the coaggregated precipitates of Porphyromonas gingivalis and each isolate, 6. When two isolates were tested with API 50 CHL medium kit, those were identified as Lactobaciallius salivarius and Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis. 7. The similarity values of 16S rDNA sequence between each of isolates and Lactobacillus salivarius subsp. salicinius were 99.60% and 99.73%, respectively, meaning that isolates were Lactobacillus salivarius sub-sp. salicinius. These results indicated that two strains isolated from caries-free children's saliva, which inhibited the formation of artificial plaque and the production of volatile sulfur compounds, were identified as Lactobacillus salivarius subsp. salicinius.

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