만성B형 간염에서 HBe 항원에서 항체로의 혈청 전환 중에 불안정하게 나타나는 HBe 항원

신선영,민경선,노경운,김현주,Shin, Sun-Young,Min, Gyeong-Sun,Noh, Kyung-Woon,Kim, Hyun-Joo 대한핵의학기술학회 2008 핵의학 기술 Vol.12 No.1

목적: 본 연구의 목적은 치료제를 복용하는 만성 B형간염환자의 혈청에서 seroconversion되는 과정 중에 불안정하게 나타나는 HBeAg과 HBeAb 사례를 연구하여, 검사자가 검사결과에 대한 정확한 이해를 하는데 도움을 주고자 하는 것이다. 방법: 만성 B형간염 환자로 진단을 받고 치료제를 복용하고 HBeAg 검사와 HBeAb검사를 시행한 3명을 대상으로 하였다. HBeAg과 HBeAb검사는 Radioimmunoassay법과 Immunoradiometric assay법으로 실시되었다. 결과: HBeAg이 음성화되는 과정에서 결과가 양성에서 음성으로, 다시 양성으로 불안정한 결과를 보였다. HBeAb가 양성화되는 과정에서 결과가 음성에서 양성으로, 다시 음성으로 변하는 불안정한 결과를 보였다. 결론: 이번 사례는 seroconversion 유도를 위해 약물치료중인 만성 B형간염 환자에서 볼 수 있는 불안정한 HBeAg과 HBeAb 혈액 결과이다. 불안정한 HBeAg과 HBeAb 검사 결과를 통하여 검사자는 환자가 바이러스 치료제를 복용하여 seroconversion되는 과정 중에 있을 수 있다는 것과 불안정한 결과는 치료제에 의해 일어나는 자연스러운 현상임을 알 수 있다. Purpose: In this study, we evaluated unstable serum data of HBe antigen (HBeAg) or HBe antibody (HBeAb) in patients who experienced HBeAg seroconversion. This study have been performed to assist a medical technologist in the recognition of patients who were chronically infected with the hepatitis B virus (HBV). Materials and Methods: A total number of 3 patients were enrolled in this study. All patients experienced HBeAg seroconversion. Serum data of HBeAg and HBeAb were measured by radioimmunoassay. Results: The data of HBeAg or HBeAb showed an unstable change during seroconversion from HBeAg to HBeAb in chronic type B hepatitis (CBH). Conclusions: Serum data of HBeAg or HBeAb can change during HBe seroconversion. These data suggest that patients with HBe seroconversion can experience an unstable oscillation of HBeAg or HBeAb value from positive to negative. Unstable data can appear naturally due to the seroconversion process.

Ultra-sensitive HBsAg IRMA 키트의 민감도 및 변이형 검출능 평가

하동혁,민경선,노경운,김현주,Ha, Dong-Hyuk,Min, Kyung-Sun,Noh, Gyeong-Woon,Kim, Hyun-Ju 대한핵의학기술학회 2011 핵의학 기술 Vol.15 No.1

배경 : B형간염표면항원(HBsAg)은 B형간염의 진단에 있어 가장 중요한 혈청학적 지표 중 하나이다. HBsAg 검사에 대한임상검사실의 수요에 맞추어 자동화 장비 및 검사법이 계속 개발되어 왔다. 본 연구는 국내에 보급된 RIAKEY, BNIBT, RIAKEY Ultra Sensitive HBsAg, ROCHE 키트의 민감도 및 변이형 검출능과 CLIA법의 CENTAUR 장비와 RIAKEY Ultra Sensitive HBsAg의 상관계수를 알아보고자 하였다. 방법 : WHO $1^{st}$ International Standard 1985(80/549), WHO $2^{nd}$ International Standard 2003 (00/588) 표준물질 2개를 이용하여 농도별 0.08, 0.04, 0.02, 0.01, 0.005 IU/ml 까지 계단희석을 시행하였으며, Subtype ad 9종, Subtype ay 변이시료 1종을 이용하여 RIAKEY, BNIBT, RIAKEY Ultra Sensitive HBsAg, ROCHE 키트를 이용하여 시행하였다. 그리고, 아형 검출에 사용된 변이시료 10종에 대한 IRMA법의 RIAKEY Ultra Sensitive HBsAg와 CLIA법의 CENTAUR 장비를 이용한 상관계수를 비교하였다. 결과 : 표준물질의 농도별 측정 시 WHO 0.01 PANEL 에서 Index 1.0 이상의 결과 값을 얻었으며, 그 결과 민감도는 0.01 IU/ml로 측정되었다. RIAKEY Ultra sensitve HBsAg 키트가 민감도측면에서 우수함을 알 수 있었다. RIAKEY Ultra sensitve HBsAg IRMA 키트에서는 adw2 9종과 ayw1 1종의 변이형 형태에 따라 모두 Index 1.0 이상으로 혈청중의 HBsAg을 100% 측정할수 있었다. RIAKEY Ultra sensitive HBsAg와 CLIA의 결과가 Y=1.0075 X + 1.2434, $R^2$=0.9982으로 우수한 상관성을 보였다. 결론 : 4세대인 IRMA법의 Ultra Sensitive HBsAg 키트로 혈청중의 HBsAg과 여러 가지 아형을 신속하고 정확히 측정하여 질병을 진단 할 수 있을 것으로 여겨진다. Purpose: The DNA-type virus HBV, discovered by D. Dane and others in 1976, is approximately 42nm big and known as the main cause of liver-related diseases around the world. HBsAg has 4 kinds of subtypes including adw, adr, ayw and ayr and besides common antigen factor a, there are d, y, r, w. From the methods of serologically testing HBV, IRMA, EIA and CLIa were developed for testing HBsAg and are being used in examining the surface antigen of HBV. In this study, among the methods for testing HBV, the recently developed RIAKEY Ultrasensitive HBsAg IRMA kit's sensitivity level and performance in detection of mutant forms were measured and compared with CLIA. Materials and methods: Two certified reference materials, which are WHO 1st International Standard 1985(80/549) and WHO 2nd International Standard 2003(00/588. subtype adw2, genotypeA), were used in the examination and the sensitivity level was measured by diluting these materials from 0.08 IU/ml to 0.005 IU/ml. The materials for examining the detection of mutant forms included 9 kinds of subtype 'ad' and one kind of subtype 'ay' purchased from DSI company. Also, with the use of positive and negative samples, they was compared with CLIA. Result: Ultrasensitive HBsAg kit based on IRMA method showed the detection of up to 0.01 IU/ml not only for WHO 1st International Standard 1985(80/549) but also for WHO 2nd International Standard 2003(00/588. subtype adw2, genotypeA) and the sensitivity level was measured as 0.01 IU/ml by WHO standard. In testing the performance for detection of mutant forms, the 9 kinds of subtype 'ad' and one kind of subtype 'ay' mutant materials were detected, demonstrating the capacity of detecting various types of mutant forms. Conclusions: With the clinical importance of sensitivity level and performance in detection of mutant forms increasing in the field of HBsAg diagnosis, the examination of IRMA's effectiveness using RIA method in the aspects of the sensitivity level and performance in detection of mutant forms was carried out and its result is as follows. The sensitivity level was measured as 0.01 IU/ml by WHO standard and it was possible to measure various types of mutant forms with high sensitivity. Thus it is suggested that more speedy and accurate reports could be produced from a nuclear medicine laboratory for clinical practitioners requiring results of various situations.

핵의학 체외 검사에서 자동분주기를 이용한 Random Assay 가능성평가

문승환 ( Seung Hwan Moon ),이호영 ( Ho Young Lee ),신선영 ( Sun Young Shin ),민경선 ( Gyeong Sun Min ),이현주 ( Hyun Joo Lee ),장수진 ( Su Jin Jang ),강지연 ( Ji Yeon Kang ),이동수 ( Dong Soo Lee ),정준기 ( June Key Chung ),이명철 대한핵의학회 2009 핵의학 분자영상 Vol.43 No.4

목적: 방사면역측정법 및 면역방사계수법은 매 실험마다 표준용액을 넣고 표준곡선에 대비하여 결과를 산출하는 batch assay가 일반화되어 있다. 비용과 시간에 대한 효율성을 증가 시키기 위해서는 선행 표준 곡선을 이용하여 검사를 진행하는 random assay의 적용이 요구된다. 방사면역측정법 및 면역방사계수법에서 자동분주기를 이용한 random assay 적용 가능성을 평가 하기 위해 본 연구를 수행하였다. 대상 및 방법: Triiodothyronine (T3), free thyroxine (fT4), Prostate specific antigen (PSA), Carcinoembryonic antigen (CEA) 4가지 항목을 대상으로 하였으며 각 검사별 20명의 환자 검체를 이용하였다. 각 검사 항목별로 표준곡선을 얻기 위해 3시간 간격으로 4회 측정한 표준용액의 분당계수값(counter per minute, cpm)을 측정하였다. 이를 Friedman test를 이용하여 비교하여 검사 시 마다 얻는 표준 곡선간의 차이를 평가하였다. 각 검사별 저, 중, 고농도의 대조 용액을 이용하여 5회 측정하고 이를 Friedman test를 이용하여 비교하여 측정 내 정밀도를 평가하였다. 각 검사별 저, 중, 고농도의 대조용액을 batch assay와 자동분주기를 이용한 random assay로 3시간 간격으로 각각 4회 측정하였다. 측정값을 바탕으로 평균, 표준편차, 변이계수를 구하고 Wilcoxon test를 이용하여 비교하여 assay 방법에 따른 차이를 비교하였다. 두 assay간에 일치도(agreement)를 평가하기 위해 두 assay의 측정값 사이에 급내상관계수(Intraclass correlation coefficient, ICC)와 상관계수를 계산하였다. 결과: 모든 검사항목에서 표준 용액의 분당계수값은 측정 간에 통계적으로 유의한 차이가 없었다. T3, fT4, PSA, CEA 검사항목마다 측정한 저, 중, 고농도별 측정 내 변이계수는 T3(3.6%, 2.6%, 0.9%), fT4 (4.5%, 1.1%. 1.3%), PSA(3.9%, 3.1%, 1.2%), CEA(5.0%, 4.8%, 7.6%)였다. 검사 항목별 측정방법에 따른 대조 용액을 이용한 표준 곡선의 측정 간 정밀도 평가에서 두 검사 방법간에 유의한 차이가 없었다. 각 검사항목별로 20명의 환자 검체에서 측정한 측정 간 변이계수(inter-assay precision)의 평균과 표준편차 값은 batch assay로 시행했을 때 각각 3.2±1.7%, 3.9±2.1%, 7.1±6.2%, 11.2±7.2%였고 random assay로 측정하였을 때는 2.7±1.7%, 4.8±3.1%, 3.6±4.8%, 7.4±6.2였다. Batch assay와 random assay는 서로 높은 일치도를 보였다. 측정한 급내상관계수(Intraclass correlation coefficient)는 T3, fT4, PSA, CEA 각각 0.9968, 0.9973, 0.9996, 0.9901 였다. Batch assay로 측정한 값과 자동분주기를 이용한 random assay로 측정한 값 사이에 상관계수(R2)는 T3, fT4, PSA, CEA 각각 0.9924, 0.9974, 0.9994, 0.9989(p<0.005)로 모두 강한 상관관계를 보였다. 결론: T3, fT4, PSA, CEA 4가지 항목의 방사면역측정법(Radioimmunoassay)에서 기존의 batch assay와 자동분주기를 이용한 random assay간에 일치도와 상관성이 높았다. 결론적으로 자동분주기를 이용한 random assay를 방사면역측정법 및 면역방사계수법에 적절히 이용할 수 있을 것으로 생각된다. Purpose: Radioimmunoassay (RIA) was usually performed by the batch assay. To improve the efficiency of RIA without increase of the cost and time, random assay could be a choice. We investigated the possibility of the random assay using automatic dispenser by assessing the agreement between batch assay and random assay. Materials and Methods: The experiments were performed with four items; Triiodothyronine (T3), free thyroxine (fT4), Prostate specific antigen (PSA), Carcinoembryonic antigen (CEA). In each item, the sera of twenty patients, the standard, and the control samples were used. The measurements were done 4 times with 3 hour time intervals by random assay and batch assay. The coefficient of variation (CV) of the standard samples and patients` data in T3, fT4, PSA, and CEA were assessed. ICC (Intraclass correlation coefficient) and coefficient of correlation were measured to assessing the agreement between two methods. Results: The CVs (%) of T3, fT4, PSA, and CEA measured by batch assay were 3.2±1.7%, 3.9±2.1%, 7.1±6.2%, 11.2±7.2%. The CVs by random assay were 2.1±1.7%, 4.8±3.1%, 3.6±4.8%, and 7.4±6.2%. The ICC between the batch assay and random assay were 0.9968 (T3), 0.9973 (fT4), 0.9996 (PSA), and 0.9901 (CEA). The coefficient of correlation between the batch assay and random assay were 0.9924(T3), 0.9974 (fT4), 0.9994 (PSA), and 0.9989 (CEA) (p<0.05). Conclusion: The results of random assay showed strong agreement with the batch assay in a day. These results suggest that random assay using automatic dispenser could be used in radioimmunoassay. (Nucl Med Mol Imaging 2009;43(4):323-329)