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        Mannose 선발체계를 이용한 HSP101 유전자의 배추형질전환

        허설혜,민병환,Hur, Suel-Hye,Min, Byung-Whan 한국식물생명공학회 2010 식물생명공학회지 Vol.37 No.2

        새로운 선발마커체계를 이용하여 배추의 자엽에 형질전환을 수행하였다. 이러한 선발체계는 mannose-6-phosphate를 fructose-6-phosphate로 전환시키는 효소인 phosphomannose-isomerase를 인지하는 유전자인 pmi를 사용하여 오직 형질전환식물체만이 mannose를 fructose로 분해하여 탄소원으로 사용할 수 있다는 원리를 이용한 것이다. 발아하여 5일된 배추의 자엽을 내서성 유전자인 HSP101이 연결된 벡터 pNWB-HSP101을 포함하는 Agrobacterium tumefaciens LBA4404를 접종하였다. 배양 후 3 mg/L BAP, 1 mg/L NAA, 0.6% mannose 그리고 2.0% sucrose가 첨가된 MS배지에서 선발하였다. PCR분석과 Southern blot 분석 및 Northern blot 분석을 통하여 형질전환식물체내에 HSP101 유전자가 삽입되었음을 확인하였다. 형질전환식물체는 순화과정을 거쳐 온실에서 채종하였다. A new selectable marker system has been adapted for use in Agrobacterium mediated transformation of Chinese cabbage. This selection system utilizes the pmi gene encoding for phosphomannose-isomerase that converts mannose-6-phosphate to fructose-6-phosphate. Only transgenic plants were able to metabolize the selection agent, mannose, into a usable source of carbon, fructose. Cotyledon explants from 5-day-old seedlings with 2 days pre-culture were infected with Agrobacterium tumefaciens strain LBA4404 harboring a new constructed vector pNWBHSP101 containing the heat tolerance responsible heat shock protein 101 (HSP101) gene with full codon modification. After culture and selection on MS medium supplemented with 3 mg/L BAP, 1 mg/L NAA, 0.6% mannose, 2.0% sucrose. Polymerase chain reaction, Southern blot analysis and Northern blot analysis were used to identify and characterize the transgenic plants with the integrated HSP101 gene. Transgenic plants have been established in soil and flowered in the greenhouse.

      • SCOPUSKCI등재

        FT-IR 스펙트럼 데이터의 다변량 통계분석을 이용한 곶감의 원산지 및 품종 식별

        허설혜(Suel Hye Hur),김석원(Suk Weon Kim),민병환(Byung Whan Min) 한국식품과학회 2015 한국식품과학회지 Vol.47 No.1

        본 연구에서는 상업용 곶감의 꽃받침과 종자를 이용하여 대사체 수준에서의 원산지와 품종 식별 체계를 확립하였다. 실험에 이용된 곶감 시료는 국내산 곶감 함안수시(Hamansusi), 예천고종시(Yecheongojongsi), 산청단성시(Sancheongdanseongsi), 그리고 논산월하시(Nonsanwalhasi) 4개 품종과 국내에서 판매되고 있는 중국산 곶감 2개 종류의 꽃받침과 종자를 사용하였으며, 꽃받침과 종자 시료의 전세포 추출물로부터 FT-IR 스펙트럼 데이터를 기반으로 다변량 통계분석(PCA, PLS-DA)을 실시하였다. 이 결과 국내산 곶감 4품종과 중국산 곶감 2종류가 두 그룹으로 확연히 나뉘어지는 것을 확인할 수 있었다. 상업용 곶감의 꽃받침을 PLS regression을 실시한 결과 국내산과 중국산 곶감을 100% 예측할 수 있었다. 또한 곶감 종자를 이용하여 품종 식별한 결과 각 4개의 그룹으로 나뉘어지는 것을 확인할 수 있었으며, PLS regression을 실시한 결과 약 86%의 정확도로 품종 식별이 가능함을 알 수 있었다. FT-IR 스펙트럼 분석의 간편성과 신속성을 고려할때, 본 연구 결과는 상업용 곶감에 대한 원산지나 품종 식별의 신속한 수단으로 활용할 수 있을 것으로 예상된다. 더 나아가 본 기술을 이용하여 다른 농산물의 원산지 또는 품종 식별 수단으로 활용이 가능할 것으로 기대된다. This study aimed to establish a rapid system for discriminating the cultivation origins and cultivars of dry persimmons, using metabolite fingerprinting by Fourier transform infrared (FT-IR) spectroscopy combined with multivariate analysis. Whole-cell extracts from the sepals of four Korean cultivars and two different Chinese dry persimmons were subjected to FT-IR spectroscopy. Principle component analysis (PCA) and partial least squares discriminant analysis (PLSDA) of the FT-IR spectral data successfully discriminated six dry persimmons into two groups depending on their cultivation origins. Principal component loading values showed that the 1750-1420 and 1190-950 cm<SUP>?1</SUP> regions of the FTIR spectra were significantly important for the discrimination of cultivation origins. The accuracy of prediction of the cultivation origins and cultivars by PLS regression was 100% (p<0.01) and 85.9% (p<0.05), respectively. These results clearly show that metabolic fingerprinting of FT-IR spectra can be applied for rapid discrimination of the cultivation origins and cultivars of commercial dry persimmons.

      • SCOPUSKCI등재

        ED-XRF (Energy Dispersive X-ray Fluorescence spectrometer)를 이용한 콩 원산지 판별

        이지혜(Ji-Hye Lee),강동진(Dong-Jin Kang),장은희(Eun-Hee Jang),허설혜(Suel-Hye Hur),신병곤(Byeung-Kon Shin),한국탁(Guk-Tak Han),이성훈(Seong-Hun Lee) 한국식품과학회 2020 한국식품과학회지 Vol.52 No.2

        본 연구는 무기성분을 활용하여 국산 콩과 외국산 콩의 원산지 판별법을 개발하기 위해 수행하였다. 2018년도에 수집한 국산100점, 미국, 중국, 베트남, 태국으로 구성된 외국산 97점에 대하여 ED-XRF를 이용하여 총 26종 무기성분의 농도를 산출하였다. T-test, ANOVA, CDA 분석을 통해 원산지판별에 영향을 주는 주요 변수로 5종(P, Ni, Br, Zn, Mn)의 무기성분을 선발하였다. 원산지 판별식을 설정한 결과 감응도 91.0%, 선택성 95.9%, 효율성 93.4%를 나타냈다. 2019년도에 수집한 국산 30점, 외국산 30점으로 원산지 판별식을 검증한 결과 국산 예측률 93.3%, 외국산 예측률 100.0%를 나타냈다. 복잡한 전처리 없이 ED-XRF와 통계처리를 통해 국산 콩과 외국산 콩을 판별할 수 있는 실용적인 판별 체계를 구축하였으며 부정유통 단속을 위한 과학적인 근거자료로서 활용이 가능할 것으로 판단된다. In this study we developed a method for determining the geographic origin of soybeans by combining energy dispersive X-ray fluorescence spectrometry with statistical analysis. In 2018, 197 soybean samples (100 Korean domestic samples and 97 foreign samples) were collected for the construction of a geographic origin model. The mineral concentrations of 26 elements were measured and determined via the fundamental parameters approach. One-way analysis of variance, t-test, and canonical discriminant analysis were employed to reveal five elements (P, Ni, Br, Zn, and Mn) that could be used for the determination of geographic origins. The sensitivity, specificity, and efficiency for the above method were 91.0, 95.9, and 93.4%, respectively. Validation results from 60 samples collected in 2019 showed a predictive rate of 93.3% for Korean domestic soybeans and 100.0% for foreign soybeans. In conclusion, the combination of energy dispersive X-ray fluorescence spectrometry and chemometrics could be used to effectively determine the geographic origin of soybeans.

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