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        Lung Injury Indices Depending on Tumor Necrosis Factor-$\alpha$ Level and Novel 35 kDa Protein Synthesis in Lipopolysaccharide-Treated Rat

        최영미,김영균,권순석,김관형,문화식,송정섭,박성학,Choi, Young-Mee,Kim, Young-Kyoon,Kwon, Soon-Seog,Kim, Kwan-Hyoung,Moon, Hwa-Sik,Song, Jeong-Sup,Park, Sung-Hak The Korean Academy of Tuberculosis and Respiratory 1998 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.45 No.6

        Background : TNF-$\alpha$ appears to be a central mediator of the host response to sepsis. While TNF-$\alpha$ is mainly considered a proinflammatory cytokine, it can also act as a direct cytotoxic cytokine. However, there are not so many studies about the relationship bet ween TNF-$\alpha$ level and lung injury severity in ALI, particularly regarding the case of ALI caused by direct lung injury such as diffuse pulmonary infection. Recently, a natural defense mechanism, known as the stress response or the heat shock response, has been reported in cellular or tissue injury reaction. There are a number of reports examining the protective role of pre-induced heat stress proteins on subsequent LPS-induced TNF-$\alpha$ release from monocyte or macrophage and also on subsequent LPS-induced ALI in animals. However it is not well established whether the stress protein synthesis such as HSP can be induced from rat alveolar macrophages by in vitro or in vivo LPS stimulation. Methods : We measured the level of TNF-$\alpha$, the percentage of inflammatory cells in bronchoalveolar lavage fluid, protein synthesis in alveolar macrophages isolated from rats at 1, 2, 3, 4, 6, 12, and 24 hours after intratracheal LPS instillation. We performed histologic examination and also obtained histologic lung injury index score in lungs from other rats at 1, 2, 3, 4, 6, 12, 24 h after intratracheal LPS instillation. Isolated non-stimulated macrophages were incubated for 2 h with different concentration of LPS (0, 1, 10, 100 ng/ml, 1, or 10 ${\mu}g/ml$). Other non-stimulated macrophages were exposed at $43^{\circ}C$ for 15 min, then returned to at $37^{\circ}C$ in 5% CO2-95% for 1 hour, and then incubated for 2 h with LPS (0, 1, 10, 100ng/ml, 1, or 10 ${\mu}g/ml$). Results : TNF-$\alpha$ levels began to increase significantly at 1 h, reached a peak at 3 h (P<0.0001), began to decrease at 6 h, and returned to control level at 12 h after LPS instillation. The percentage of inflammatory cells (neutrophils and alveolar macrophages) began to change significantly at 2 h, reached a peak at 6 h, began to recover but still showed significant change at 12 h, and showed insignificant change at 24 h after LPS instillation compared with the normal control. After LPS instillation, the score of histologic lung injury index reached a maximum value at 6 h and remained steady for 24 hours. 35 kDa protein band was newly synthesized in alveolar macrophage from 1 hour on for 24 hours after LPS instillation. Inducible heat stress protein 72 was not found in any alveolar macrophages obtained from rats after LPS instillation. TNF-$\alpha$ levels in supernatants of LPS-stimulated macro phages were significantly higher than those of non-stimulated macrophages(p<0.05). Following LPS stimulation, TNF-$\alpha$ levels in supernatants were significantly lower after heat treatment than in those without heat treatment (p<0.05). The inducible heat stress protein 72 was not found at any concentrations of LPS stimulation. Whereas the 35 kDa protein band was exclusively found at dose of LPS of 10 ${\mu}g/ml$. Conclusion : TNF-$\alpha$ has a direct or indirect close relationship with lung injury severity in acute lung injury or acute respiratory distress syndrome. In vivo and in vitro LPS stimulation dose not induce heat stress protein 72 in alveolar macrophages. It is likely that 35 kDa protein, synthesized by alveolar macrophage after LPS instillation, does not have a defense role in acute lung injury. 연구배경 : 급성폐손상의 병태생리학적 기전에는 염증세포들이 분비하는 다양한 염증성 매개물질들이 매우 중요한 역할을 한다. 이중 특히 tumor necrosis factor-$\alpha$ (TNF-$\alpha$) 는 다른 염증세포들의 화학주성 및 각종 염증성 매개물질 분비에 영향을 미치는 proin-flammatory cytokine으로 작용하는 한편, 직접적으로 세포손상을 야기시키는 세포독성 cytokine으로도 작용하는데, 급성폐손상에서 TNF-$\alpha$와 폐조직 손상과의 직접적인 관련성에 대해서는 아직 구체적으로 확인된 바가 많지 않다. 또한, 최근에 생체내 방어기전으로 스트레스 단백질에 대한 관심이 높아지면서, 단핵구에 내독소를 처치하거나, 동물에 내독소를 투여하기 전에 미리 스트레스 단백질을 합성시킨 경우, 내독소에 의한 손상을 감소시켜 준다는 연구가 보고되었지만, 내독소 자극 자체만으로 스트레스 단백질 합성이 유도되는지는 아직 분명하지 않다. 이에 저자들은 내독소 유도성 급성 폐손상에서 TNF-$\alpha$ 분비와 폐조직 손상을 포함한 일련의 염증반응과의 관계를 분석하고, 생체내 내독소 자극에 대하여 폐포대식세포에서 스트레스 단백질을 포함한 새로운 단백질 합성이 유도되는지 여부를 분석하고자 하였다. 연구방법 : 흰쥐의 기관내로 내독소를 투여한 후 시간별로 기관지폐포세척액내 TNF-$\alpha$농도, 염증세포 백분율 변화, 병리조직학적 소견을 관찰하고, 또한 각 시간대의 폐포대식세포에서 sodium dodesyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis와 inducible heat stress protein72에 대한 면역화학염색을 시행하여 단백질 합성양상을 분석하는 한편, 폐포대식세포에 다양한 농도의 내독소 자극과 열처리를 가한 후, 배양상층액에서 tumor necrosis factor-a 농도를 측정하고, 폐포대식세포의 단백질 합성양상을 분석하였다. 연구결과 : 내독소 투여 후 tumor necrosis factor-$\alpha$는 첫 1시간째부터 현저하게 증가하여 (p< 0.0001) 3시간째 최고치에 이르렀고 6시간째는 감소하기 시작하여 12시간째는 정상 대조군 수준으로 감소하였다. 내독소 투여 후 염증세포 백분율의 변화는 2시간째부터 시작하여 6시간째 최고에 이르러 12시간째까지 지속하였으며, 장시간째에 정상 대조군 수준으로 회복하였다. 병리조직학적 소견상 폐손상 지표 점수는 내독소 투여후 6시간째 최고치에 이르러 24 시간째까지 지속하였다. 내독소 투여 후 분리한 폐포대식세포에서 첫 1시간째부터 장시간째까지 정상 대조군에서는 관찰할 수 없던 35kDa의 새로운 단백질 띠가 관찰되었으며, 면역화학염색상 inducible heat stress protein72는 관찰되지 않았다. 내독소 자극을 가하지 않은 정상 대조세포군에 비해 내독소 자극을 가한 세포군의 배양상층액에서 tumor necrosis factor-$\alpha$ 농도가 유의하게 높았으며 (p<0.001), 내독소 자극만 가한 세포군에 비해 열충격 전처치후 내독소 자극을 가한 세포군의 배양상층액에서 tumor necrosis factor-$\alpha$ 농도가 10 ${\mu}g/ml$ 내독소 자극군만 제외하고 모두 유의하게 감소하였다 (p<0.05). 내독소 자극만 가한 세포군은 10 ${\mu}g/ml$의 고농도에서만 35 kDa 의 단백질 띠가 합성되었고 inducible heat stress protein72는 관찰되지 않았다. 열충격 전처치후 내독소 자극을 가한 세포군은 모두 inducible heat stress protein72가 관찰되었다. 결 론 : 기관내 내독소 투여에 의한 급성 폐손상에서 tumor necrosis factor-$\a

      • KCI등재

        코로나바이러스감염증-19에 대한 예비 초등교사의 지식, 교육요구도 및 예방행위 수행도- COVID-19 관련 경험, 연도, 심화전공 집단에 따른 비교 -

        최영미,홍승호 한국생물교육학회 2022 생물교육 Vol.50 No.4

        This study focused on inquiry preservice teachers' perceived ideas regarding Coronavirus disease 2019 (COVID-19) since their responsibilities to educate elementary school students concerning viruses became more important after the COVID-19 pandemic. This study intended to provide preliminary data for the development of teacher training programs for preventing infectious diseases through the investigation of their understanding, educational needs, and preventive behavior regarding COVID-19. In addition, the participants' variables such as exposure to COVID-19, teaching practicum, education experience, academic year, and specific major were used to figure out the group differences. A total of 309 participants from the fall and the spring terms in the 2021 and 2022 academic years were involved in the online survey, and their responses were statistically analyzed using a t-test and Kruskal-Wallis test of SPSS Statistics 24.0. The results indicated that the preservice teachers generally understood COVID-19 appropriately though minority participants incompletely understood to few questions of the category. In terms of their educational needs on COVID-19, it was revealed that regardless of the academic year or specific major the participants appealed the need to learn conditions of quarantine and discharge, routes of transmission, effective prevention methods, disease characteristics, protection equipment, diagnosis and check examination, a countermeasure for COVID-19, treatment, epidemiological survey, etc. The results of preventive behavior on the COVID-19 showed that they wore a mask daily whereas they answered social distancing is the hardest guideline to carry out. Consequently, being considered its leverage in the field classes, it is critical to grasp preservice teachers' perception of regarding the virus.

      • SCOPUSKCI등재

        A Case of T-cell Primary Pulmonary Lymphoma Diagnosed by $TCR{\gamma}$ gene rearrangement

        최영미,김승준,권순석,김영균,김관형,문화식,박성학,송정섭,Choi, Young Mee,Kim, Seung Joan,Kwon, Soon Seog,Kim, Young Kyoon,Kim, Kwan Hyoung,Moon, Hwa Sik,Park, Sung Hak,Song, Jeong Sup The Korean Academy of Tuberculosis and Respiratory 1996 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.43 No.6

        반복되는 흉막염 및 폐렴을 주소로 내원한 30세 남자환자에서 경기관지 폐생검과 흉수내 림프구에 대한 유세포 분석 및 T세포 수용체 유전자 재배열 분석을 실시하였다. 경기관지 폐생검 조직의 연역조직화학 염색상 대부분의 림프구가 T세포 표식자인 UCHLl 에 대해 강하게 염색되었고, B세포 표식자인 L26에 대해서는 거의 염색되지 않았다. 흉수에서 추출한 림프구의 유세포 분석상 CD3양성 CD2양성인 T림프구가 대부분이었고, 이들 림프구에 대해 중합효소연쇄반응을 이용한 T세포 수용체 유전자 재배열 분석을 하였더니 $TCR{\gamma}$ 유전자 재배열과 클론성을 관찰할 수 있었다. T세포 원발성 폐림프종으로 진단하였고, 문헌고찰과 함께 보고하는 바이다.

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