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Influenza Virus Type A 감염 MDCK 세포에 있어서 Glutathione S-transferase의 활성 변동
김병렬,박남표,윤종국,전태원,이상일 대한의생명과학회 2000 Journal of biomedical laboratory sciences Vol.6 No.1
농도와 기간에 따른 바이러스 감염 및 항바이러스제인 amantadine병행 첨가 시 Maddin-Darby canine kidney (MDCK) 세포 내의 free radical 해독계 효소인 glutathione S-transferase (GST)와 lactate dehydrogenase (LDH)의 활성 변동을 상호비교 관찰하였다. 바이러스에 감염된 MDCK 세포는 감염 3일 후 1 TCID50군은 80% 이상, 10 TCID50군은 거의 대부분의 단층세포가 탈락되는 병변 효과가 나타났다. Amantadine cytotoxic dose %가 증가함에 따라 MDCK 세포 내의 GST 및 LDH 활성은 농도에 따라 유의하게 감소되었고, 감염배지 내 LDH활성은 대조군 보다 유의한 증가를 보였다. 인플루엔자 바이러스 type A접종농도와 기간에 따른 MDCK세포 내의 GST및 LDH활성은 1 및 10 TCID50감염 군에서 감염 3일 후부터 유의하게 감소되었고, 감염배지 내의 LDH활성은 10배 이상 증가되었다. 인플루엔자 바이러스 type A 100 TCID50 감염과 amantadine 병행 첨가 시 GST 및 LDH 활성은 바이러스만 감염한 군 보다 MDCK세포 내에서 대조군에 비하여 감소율이 낮았고, 감염배지 중 LDH활성 역시 증가율이 낮았다. 또한 바이러스 감염 후 amantadine 90 ㎛/ml첨가 시에 세포 내와 감염배지 중에서 가장 낮은 감소와 증가를 나타냈다. This study was performed to evaluate the activities of glutathione S-transferase (GST) and lactate dehydrogenase (LDH) in Maddin-Darby canine kidney (MDCK) cells infected with virus and/or treated with amantadine. On cell morphological findings, monolayer fractions in MDCK cells infected with virus were exfolated more than 80% in 1 TCID50 group and that in 10 TCID50 were completely exfolated after 3 days during infectious process. In proportion to the dose of amantadine, activities of GST and LDH of MDCK cells were significantly decreased and those of LDH in medium fraction were more significantly increased compared with control. According to in both dose and time of virus innoculation, activities of GST and LDH in MDCK cells were significantly decreased in 1 and 10 TCID50 infected cells after 3 days. LDH activities in infectious medium were remarkably rised at 10 fold. In case of the cell line inoculated with type A 100 TCID50 and additionally treated with amantadine, the decreasing rate to the control in activities of GST and LDH was lower than that in those in case of that infected with virus only. These results suggested that virus infection and amantadine treatment may effect the activity of the detoxicating enzyme in the target cells.
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Influenza Virus Type A 감염 MDCK 세포에 있어서 Glutathione S-transferase의 활성 변동
김병렬(Byung-Ryul Kim),박남표(Nam-Pyo Park),윤종국(Chong-Guk Yoon),전태원(Tae-Won Jeon),이상일(Sang-Il Lee) 대한의생명과학회 2000 Biomedical Science Letters Vol.6 No.1
농도와 기간에 따른 바이러스 감염 및 항바이러스제인 amantadine 병행 첨가 시 Maddin-Darby canine kidney (MDCK) 세포 내의 free radical 해독계 효소인 glutathione S-transferase (GST)와 lactate dehydrogenase (LDH)의 활성 변동을 상호비교 관찰하였다. 바이러스에 감염된 MDCK 세포는 감염 3일 후 1 TCID?? 군은 80% 이상, 10 TCID?? 군은 거의 대부분의 단층세포가 탈락되는 병변 효과가 나타났다. Amantadine cytotoxic dose %가 증가함에 따라 MDCK 세포 내의 GST 및 LDH 활성은 농도에 따라 유의하게 감소되었고, 감염배지 내 LDH 활성은 대조군 보다 유의한 증가를 보였다. 인플루엔자 바이러스 type A 접종농도와 기간에 따른 MDCK 세포 내의 GST 및 LDH 활성은 1 및 10 TCID?? 감염군에서 감염 3일 후부터 유의하게 감소되었고, 감염배지 내의 LDH 활성은 10배 이상 증가되었다. 인플루엔자 바이러스 type A 100 TCID?? 감염과 amantadine 병행 첨가 시 GST 및 LDH 활성은 바이러스만 감염한 군 보다 MDCK 세포 내에서 대조군에 비하여 감소율이 낮았고, 감염배지 중 LDH 활성 역시 증가율이 낮았다. 또한 바이러스 감염 후 amantadine 90 ㎍/㎖ 첨가 시에 세포 내와 감염배지 중에서 가장 낮은 감소와 증가를 나타냈다. This study was performed to evaluate the activities of glutathione S-transferase (GST) and lactate dehydrogenase (LDH) in Maddin-Darby canine kidney (MDCK) cells infected with virus and/or treated with amantadine. On cell morphological findings, monolayer fractions in MDCK cells infected with virus were exfolated more than 80% in 1 TCID?? group and that in 10 TCID?? were completely exfolated after 3 days during infectious process. In proportion to the dose of amantadine, activities of GST and LDH of MDCK cells were significantly decreased and those of LDH in medium fraction were more significantly increased compared with control. According to in both dose and time of virus innoculation, activities of GST and LDH in MDCK cells were significantly decreased in 1 and 10 TCID?? infected cells after 3 days. LDH activities in infectious medium were remarkably rised at 10 fold. In case of the cell line inoculated with type A 100 TCID?? and additionally treated with amantadine, the decreasing rate to the control in activities of GST and LDH was lower than that in those in case of that infected with virus only. These results suggested that virus infection and amantadine treatment may effect the activity of the detoxicating enzyme in the target cells.
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GC 및 GC/MS에 의한 벌꿀 중의 이ㆍ삼당류 정성 및 정량 특성과 개선된 동시분석방법의 확립
김종배(Jong-Bae Kim),장은숙(Eun-Suk Jang),김인숙(In-Suk Kim),이희진(Hee-Jin Lee),이혜정(Hye-Jeong Lee),서현선(Hyun-Sun Seo),박남표(Nam-Pyo Park) 한국식품과학회 2015 한국식품과학회지 Vol.47 No.1
본 연구의 목적은 벌꿀에 함유되어 있는 이·삼당류를 정성 및 정량하기 위하여 벌꿀분석에 많이 사용하고 있는 20개의 표준당류를 대상으로 TMS, TMS-oxime, TMS-methoxime 당류를 조제한 다음 GC 및 GC/MS에서 그들의 분리특성과 분리능을 조사하여 정성과 정량이 가능한 완전히 분리된 하나의 당류 피크를 선정하여 이를 벌꿀시료의 이당류와 삼당류 분석에 이용하는 것이다. 실험결과, 세가지 유도체화 당류들의 GC 및 GC/MS 분석에서 당류들은 정성 및 정량이 가능한 한 개 이상의 피크를 나타내었으며, 전반적인 당류들의 피크 분리능은 GC보다 GC/MS에서 좀 더 양호하게 나타났다. 최적 기기분석조건은 DB-5MSUI 컬럼을 사용하여, 초기 oven 온도를 175oC에서 5분간 두고 3℃ 씩 증가시킨 후 245℃에서 20분간 머무르다가 7℃씩 증가시킨 다음 315oC에서 10분간 등온 분석할 때였다. 각각의 유도체화 조건에서 완전한 분리로 정량이 가능한 당류는 TMS 당류에서 sucrose, maltose (1), (2), cellobiose (1), (2), palatinose, α,β-trehalose, kojibiose (2), melibiose (1), (2), gentibiose, isomaltose (1), (2), raffinose, 1-kestose, erlose, melezitose였고, TMS-oxime 당류에서 sucrose, α,α-trehalose, α,β-trehalose cellobiose (E), maltulose (E), turanose (Z), nigerose (Z), kojibiose (Z), palatinose (E), melibiose (Z), isomaltose (E), (Z)와 삼당류 전체였으며, TMS-methoxime 당류는 sucrose, cellobiose (E), maltulose (E), cellobiose (Z), turanose (E), maltose (Z), α,α-trehalose, nigerose (E), (Z), kojibiose (E), (Z), gentibiose (E), melibiose (Z), isomaltose (Z) 등과 삼당류 전체로 나타났으며, 실제 벌꿀시료의 분석에서는 TMS-oxime과 TMS-methoxime 당류만으로도 이·삼당류의 정량이 가능하였다. 따라서, 본 연구에서 확립한 분석방법은 몇개의 당류들이 동시 용출 또는 유사한 tR을 가짐으로 해서 분석자체에 애로가 있거나 분석 후 다중회귀분석프로그램과 같은 통계처리 과정을 거쳐야 하는 기존의 분석방법과는 달리, 한 개의 capillary 컬럼과 한가지 GC 온도 프로그래밍 조건으로 크로마토그램 상에서 완전히 분리된 하나의 피크를 정량하는 방법이기 때문에 벌꿀을 연구하는 기관이나 관련 실험실에서 유용하게 사용될 수 있을 것이라 생각된다. The improved analytical method with gas chromatography (GC) and GC-mass spectrometry was established to identify and quantify disaccharides and trisacchrides in honey. In this method, the analysis of trimethylsilyl (TMS), TMSoxime and TMS-methoxime sugars takes into account the determination of a single peak of complete separation on the chromatogram. The number of possible peaks for the qualitative and quantitative determination of TMS, TMS-oxime, and TMS-methoxime sugars was 17, 22, and 25, respectively. This new analytical method allowed for the determination of diand trisaccharides in honey by TMS-oxime and TMS-methoxime derivatives. This study suggested that the improved method is more suitable and precise than the other analytical methods for the simultaneous determination of sugars in honey.
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