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구기자 투여 간손상 흰쥐에서 GOT 및 GPT의 활성화 연구
김병원,노광수 대한의생명과학회 2000 Journal of biomedical laboratory sciences Vol.6 No.3
구기자의 한방 약리효과를 보기 위하여 구기자 혼합 생체시료와 세포배양한 캘러스로부터 추출한 열수 추출물을 사염화탄소로 유발된 간장해 흰쥐 (SD계)에 하루 0.5 g/kg을 경구 투여한 결과, 대조군 (GOT 949, GPT 640 karmen unit)에 비하여 혼합 생체시료 (GOT 760.4, GPT 540 karmen unit) 와 세포배양 캘러스 (GOT 772.1, GPT 556.4 karmen unit) 처리구에서 거의 비슷한 혈청 중 GOT, GPT 활성의 상승을 억제하는 효과를 보였으며, 또한 비교약물 sylimarin 0.1 g/kg 투여 군에서도 대조군에 비하여 혼합 생체시료 (GOT 492.6, GPT 320.4 karmen unit)와 세포배양 캘러스 (GOT 492.6, GPT 320.4 karmen unit) 처리구에서 거의 비슷한 혈청 중 GOT, GPT 활성의 상승을 억제하는 효과를 보였다. 이 상의 결과를 통하여 볼 때 구기자 생체시료와 세포배양 캘러스는 간손상 흰쥐에 대한 간보호 효과가 동일하게 있는 것으로 판단된다. The present study was undertaken in order to investigate betaine production by tissue culture and its medicinal effect in Lycium chinense Mill. In order to investigate the protective effect of L. chinense on the hepatoxicity induced by CCl4, 0.5 g/kg water extract of the compound mixture (leaves, roots and shoots) of L. chinense and its callus were fed to rat (SD line) once a day. As a result, the activity of GOT and GPT in the the goup fed compound mixture (GOT 760.4 and GPT 540 Karmen unit) and callus (GOT 772.1 and GPT 556.4 Karmen unit) was decreased in the blood serums relative to the controlled rat group (GOT 949 and GPT 640 Karmen unit) and the same result was obtained in the group fed with 0.1 g/kg sylimarin (the activity of GOT and GPT was shown 492.6 and 320.4 Karmen unit respectively. These results strongly indicate that water extracts of the mixture and callus from L. chinense do have the same decreasing effect of GOT and GPT in the hepatotoxic rat induced by CCl4.
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Byung-Tae Park(박병태) 대한의생명과학회 1999 Biomedical Science Letters Vol.5 No.1
Mar (multiple-antibiotic-resistance) 대장균의 marRAB 돌연변이가 그람음성 세균들 사이로 전파될 수 있는지를 알아보기 위해서, 염색체 위의 marRAB 돌연변이를 λplacMu9 (Km<SUP>r</SUP>)를 이용하여 대장균의 다른 균주내의 pUC19 (Lac?, Ap<SUP>r</SUP>)의 클로닝 사이트, S. typhimurium 및 P. aeruginosa의 염색체 위로 각각 전달시킨 후, Mar phenotype, Km<SUP>r</SUP>, Lac?, 혹은 Ap<SUP>r</SUP> 균주를 선택한 다음, salicylate (SAL)의 유도 (induction) 유무에 따른 항생제 내성검사를 실시하였다. pUC19의 보유 유무에 관계없이 대조군인 야생형 대장균 JM109, NM522에 비해서, pUC19::marRAB 돌연변이를 가진 JM109 혹은 NM522의 대부분 균주들은 항생제 내성 수준들이 훨씬 더 높았으며, Mar 표현형의 유도도 SAL에 의해서 훨씬 더 높게 나타났다. 하지만 일부 소수의 항생제에 대해서는 예외적으로 내성 수준이 더 낮게 나타났는데, 야생형 JM109 균주에서는 chloramphenicol (Cm)과 tetracycline (Tc)이, pUC19::marRAB 돌연변이를 가진 NM522 균주에서는 Tc와 ciprofloxacin (Cp)에 대한 내성 수준이 각각 더 낮게 나타났다. S. typhimurium 및 P. aeruginosa에 대한 같은 실험의 결과도 야생형 대장균의 경우와 거의 대부분 일치하였다. 형질전환 (transformation)과 형질도입 (transduction)의 방법을 주로 사용한 이 실험의 결과는, marRAB 돌연변이가 그람음성 세균들 사이로 전파될 수 있음을 간접적으로 암시한다. To evaluate the spreading possibilities of the marRAB mutation of E. coli Mar mutant among gram-negative bacilli, chromosomal marRAB mutations of Mar mutants were transduced by λplacMu9 into pUC19 (Lac?, Ap<SUP>r</SUP>) cloning site in another strains of E. coli or onto the chrmosome of S. typhimurium and P. aeruginosa, selected for transduction by Mar phenotype, Lac?, or Ap<SUP>r</SUP>, and tested for their antimicrobial resistance with or without addition of salicylate (SAL). Compared with wild type strains of JM109, NM522, harboring pUC19 or not, respectively, all strains of JM109 or NM522 carrying pUC19::marRAB mutation showed higher levels of antimicrobial resistance and SAL induction of Mar phenotype than those of wild type. However, in contrast to the original Mar mutants, there were some tendencies of decreased antimicrobial resistance of JM109 or NM522 harboring pUC19::marRAB mutation with SAL induction against chloramphenicol (Cm) and tetracycline (Tc), or Tc and ciprofloxacin (Cp), respectively. Almost the same results, as shown as the cases of E. coli JM109 or NM522, were obtained from all transductants of S. typhimurium and P. aeruginosa, except Cp, against which increased antimicrobial resistance with SAL induction was shown. This study, employed the methods of transformation or transduction among intercellular gene transfer methods between gram-negative bacteria, shows the evidences that suggest indirectly the spreading possibilities of marRAB mutation among gram-negative bacilli.
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양용석(Yong-Suk Ryang),류장근(Jang-Keun Ryu),주난영(Nan-Young Ju),송강원(Kang-Won Song) 대한의생명과학회 1996 Biomedical Science Letters Vol.2 No.2
저자들은 마우스를 실험모델로 하여 간흡충의 항원을 투여 했을 때 비장조직에 대한 CD3, CD4 및 CD8 모노클로날 항체의 반응 여부를 알아보고자 하였다. 즉, 간흡충에 대한 세포면역학적인 특성을 규명고자 하였으며 특히 비장 조직에 대한 phenotype을 관찰한 결과 다음과 같은 결과를 얻었다. 간흡충의 조항원을 면역증강제와 함께 복강 투여한 다음 일정 기간 후에 비장조직을 Avidin-biotin complex 면역조직염색을 실시한 결과 CD3에서 강한 양성 반응을 나타냈고 CD4와 CD8에서는 약한 반응을 나타냈다. 조직부위를 보면 피막, 혈관, 임파관, 백수부위와 림프구 및 대식세포의 세포막에서 양성반응을 보였다. The authors inquired into what reactions comprise the response of mice(as a model) CD3, CD4 and CD8 monoclonal antibodies in spleen tissue when injected intraperitoneally by antigens of Clonorchis sinensis. The author is objective was focused on investigating the property of cellular immunity for liver fluke. In particular, the results of having examined the phenotype of the tissue of spleen were revealed as follows: a certain length of time after having been intraperitoneally injected with antigens of Clonorchis sinensis and Freund's adjuvant, the tissue of spleen was embedded and immunohistochemically stained by the avidin-biotin complex method. A strong reaction in response to CD3, while a feeble reaction resulted from CD4 and CD8. The tissue region showed a positive reaction to all antibodies, especially from capsules, vascular areas, white pulps and membrane of blood cells.
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신증후출혈열 환자의 혈청학적 및 분자생물학적 진단 검사법 비교
우영대,문희주,배형준 대한의생명과학회 2000 Journal of biomedical laboratory sciences Vol.6 No.2
우리나라에서 발생하고 있는 급성 출혈성 질환인 신증후출혈열의 원인 바이러스는 Family Bunyaviridae의 Genus Hantavirus에 속하는 한탄과 서울바이러스에 의하여 발생되고 있다. 본연구에서는 신증후출혈열로 의뢰된 환자에서 한탄바이러스에 대한 항체가를 간접면역형광항체법(indirect immunofluorescent antibody technique, IFAT), 면역효소측정법(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA) (IgG, IgM), 고비중입자응집반응(high density composite particle agglutination, HDPA) 및 플라크감소중화시험(plaque reduction neutrafization test, PRNT)등으로 비교 측정하였고, 신증후출혈열환자로 확진된 15명의 한타바이러스 혈청형을 PRNT와 혈청형 특이 역전사 효소 중합효소연쇄반응(nested reverse transcriptase polymerase chain reaction, nested RT-PCR)으로 확인하였다. 신증후출혈열로 의뢰된 환자에서의 한탄바이러스에 대한 IFAT, ELISA(IgG,IgM),HDPA 그리고 PRNT 비교에서 형광항체, ELISA IgG, 응집항체 및 중화항체는 8명 모두 높게 나타났으며, ELISA IgM은 5명에서는 현저히 높은 항체를 보유하고 있었다. 신증후출혈열 환자 15명에서는 높은 형광항체와 중화항체 역가를 나타내었고, 15명 중 12명은 한탄바이러스, 2명은 서울바이러스에 대한 높은 중화항체를 갖고 있었으며, 1명은 두 바이러스에 대하여 동일한 항체 역가를 나타내었으며, 혈청형 특이 primer를 사용한 nested RT-PCR에서는 15명 중 3명과 1명만이 한탄바이러스와 서울바이러스 primer에 대해 RNA가 검출되었다. The etiologic agents of haemorrhagic fever with renal syndrome(HFRS) in Korea are Hantaan and Seoul virus in the genus Hantavirus, family Bunyaviridae. Antibody titers of sera from HFRS patients against Hantaan virus were measured by immunofluorescent antibody technique(IFAT), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), high density composite particle agglutination (HDPA) and plaque reduction neutralization test (PRNT). PRNT and nested reverse transcriptase polymerase chain reaction (nested RT-PCR) was used for serotypic differentiation of Hantaviruses against Hantaan and Seoul virus. Eight doubtful HFRS patients showed higher fluorescent, IgG ELISA, agglutination and neutralizing antibody titer by IFAT, ELISA IgG, HDPA and PRNT, respectively. Five out of them showed high IgM antibody titer by IgM capture ELISA against Hantaan virus, remarkably. Fifteen HFRS patients showed higher fluorescent antibody titer by IFAT. In PRNT, 12 out of them showed high neutralizing antibody titer aginst HTNV, 2 against SEOV and 1 against both viruses. In nested RT-PCR using serotype specific-primer, 3 out of them showed positive against HTNV and 1 against SEOV.
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신증후출혈열 환자의 혈청학적 및 분자생물학적 진단 검사법 비교
우영대(Young-Dae Woo),문희주(Hi-Joo Moon),배형준(Hyung-Joon Bae) 대한의생명과학회 2000 Biomedical Science Letters Vol.6 No.2
우리 나라에서 발생하고 있는 급성 출혈성 질환인 신증후출혈열의 원인 바이러스는 Family Bunyaviridae의 Genus Hantavirus에 속하는 한탄과 서울바이러스에 의하여 발생되고 있다. 본 연구에서는 신증후출혈열로 의뢰된 환자에서 한탄바이러스에 대한 항체가를 간접면역형광항체법 (indirect immunofluorescent antibody technique, IFAT), 면 역효소측정법 (enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA) (IgG, IgM), 고비중입자응집반응 (high density composite particle agglutination, HDPA) 및 플라크감소중화시험 (plaque reduction neutralization test, PRNT) 등으로 비교 측정하였고, 신증후출혈열 환자로 확진된 15명의 한타바이러스 혈청형을 PRNT와 혈청형 특이 역전사 효소 중합효소연쇄반응 (nested reverse transcriptase polymerase chain reaction, nested RT-PCR)으로 확인하였다. 신증후출혈열로 의뢰된 환자에서의 한탄바이러스에 대한 IFAT, ELISA (IgG, IgM), HDPA 그리 고 PRNT 비교에서 형광항체, ELISA IgG, 응집항체 및 중화항체는 8명 모두 높게 나타났으며, ELISA IgM은 5명에서는 현저히 높은 항체를 보유하고 있었다. 신증후출혈열 환자 15명에서는 높은 형광항체와 중화항체 역가를 나타내었고, 15명 중 12명은 한탄바이러스, 2명은 서울바이러스에 대한 높은 중화항체를 갖고 있었으며, 1명은 두 바이러스에 대하여 통일한 항체 역가를 나타내었으며, 혈청형 특이 primer를 사용한 nested RT-PCR에서는 15명 중 3명과 1명만이 한탄바이러스와 서울바이러스 primer에 대해 RNA가 검출되었다. The etiologic agents of haemorrhagic fever with renal syndrome (HFRS) in Korea are Hantaan and Seoul virus in the genus Hantavirus, family Bunyaviridae. Antibody titers of sera from HFRS patients against Hantaan virus were measured by immunofluorescent antibody technique (IFAT), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), high density composite particle agglutination (HDPA) and plaque reduction neutralization test (PRNT). PRNT and nested reverse transcriptase polymerase chain reaction (nested RT-PCR) was used for serotypic differentiation of Hantaviruses against Hantaan and Seoul virus. Eight doubtful HFRS patients showed higher fluorescent, IgG ELISA, agglutination and neutralizing antibody titer by IFAT, ELISA IgG, HDPA and PRNT, respectively. Five out of them showed high IgM antibody titer by IgM capture ELISA against Hantaan virus, remarkably. Fifteen HFRS patients showed higher fluorescent antibody titer by IFAT. In PRNT, 12 out of them showed high neutralizing antibody titer aginst HTNV, 2 against SEOV and 1 against both viruses. In nested RT-PCR using serotype specific-primer, 3 out of them showed positive against HTNV and 1 against SEOV.
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Yong-Suk Ryang(양용석),Yoon-Kyung Cho(조윤경),Ji-Sook Lee(이지숙) 대한의생명과학회 1997 Biomedical Science Letters Vol.3 No.2
가토에게 간흡충을 감염시키고 3개월 후 거살한 다음 간흡충의 충체, 간흡충의 분비배설액 그리고 간토의 담즙을 조항원으로 제조한 후 이에 대한 항원단백질의 구성물질을 분석하였다. 그리고 cysteine계 면역억제제인 E-64와 serine계 면역억제제인 PMSF를 첨가하였을 때 단백질 구성물질의 발현 양상을 관찰하였다. 실험적으로 가토에서 얻은 간흡충 성충의 조항원은200-9 kDa의 범위에서 26개의 분획을 관찰하였으며, 간흡충 성충 조항원에 cysteine계 단백질분해효소 억제제인 E-64를 첨거하였을 때 잘 보존하여 200-9 kDa의 범위에서 29개의 분획을 관찰하였다. 간흡충 성충의 분비배설액 조항원은 200-9 kDa 범위에서 27개의 분획이 관찰되었으며, cysteine계 단백질분해효소 억제제인 E-64를 첨거하였을 때 잘 보존하여 200-9 kDa의 범위에서 29개의 분획이 관찰되었다. 그리고 간흡충을 감염시킨 가토의 담즙 조항원은 200-9 kDa의 범위에서 19개의 분획이 관찰되었으며, serine계 단백질분해효소인 PMSF를 첨거하였을 때 200-10 kDa의 범위에서 22개의 분획이 관찰되었으나, cysteine계 단백질분해효소인 E-64에서도 비슷한 양상을 보였다. 대조군인 건강 가토의 담즙 조항원은 200-10 kDa의 범위에서 22개의 분획이 관찰되었으며, serine계 단백질분해효소 억제제인 PMSF를 첨가하였을 때 잘 보존하여 200-12 kDa의 범위에서 23개의 분획이 관찰되었다. 앞으로 각 항원에 대한 면역학적 특정 및 단세포군 항체에 대한 구체적인 규명이 계속되어야 겠다. The authors characterized the proteins of the crude antigen obtained from Clonorchis sinensis worm and excretory-secretory and billis from rabbits, experimentally infected for 3 months. Protein composition was observed after adding a cysteine proteinase inhibitor E-64 and a serine proteinase inhibitor PMSF, respectively. SDS-PAGE of the crude antigen from C. sinensis recovered from the infected rabbits, the crude antigen from the adult worm excretory￢secretory, and the crude antigen from biIIis of the rabbits resolved 26, 27 and 19 profiles between 200-9 kDa, respectively. When E-64 supplemented 29, and 22 bands, respectively. More study should be carried out in the future on the immunological characteristics and the monoclonal antibody of the each antigen.
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