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재조합 Saccharomyces cerevisiae에서 Permeabilizing Agent를 이용한 HLY의 분비촉진
최선욱(Sun-Uk Choi),하정욱(Jung-Uk Ha),황용일(Yong-Il Hwang) 한국식품영양과학회 1999 한국식품영양과학회지 Vol.28 No.2
배양 말기까지 세포내에 30% 이상 존재하는 유전산물인 HLY를 효과적으로 분비를 유도하기 위해 다섯가지의 permeabilizing agent-CaCl₂, ethanol, Tween 80, Triton X-100, CTAB-를 사용하였다. 그 결과 효모형질전환체에 대한 CaCl₂, Tween 80, ethanol의 처리에서는 HLY의 분비촉진을 확인할 수 있었다. 특히 10% ethanol의 처리에서는 HLY 활성을 38.6% 증가시켰다. 이러한 결과는 ethanol이 직접적으로 세포막과 벽에 변화를 주어 세포내에 존재하는 HLY의 분비를 촉진시켰고, 배지 속에 첨가된 고농도 ethanol은 분비된 HLY의 안정성을 증가시킨 것으로 생각된다. 하지만 기대했던 계면활성제의 효과는 거의 없었는데 이러한 결과는 계면활성제가 유전산물 분비에 미치는 영향이 없다고 단정 내리기보다는 측정방법의 문제인 것으로 보인다. We have intended to accelerate the secretion of human lysozyme(HLY) with permeabilizing agents from the cultivated cells of the recombinant Saccharomyces cerevisiae. The five agents-CaCl₂, Tween 80, ethanol, Triton X-100, and cetyltrimethylammonium bromide(CTAB) were used as permeabilizing agents. Treatments of the yeast cell with CaCl₂, Tween 80, and ethanol were effective to increase the secretion from the yeast cells. Especially, treatment of 10% ethanol increased the extracellular HLY activity by 38.6% at 30℃ for 48 h in culture broth. But Triton X-l00 and CTAB unexpectedly didn′t playa role in increase of HLY secretion. Recovery of a foreign protein by permeabilizing agents is easier than by osmotic shock, and is less expensive than enzymatic digestion.