착상전 유전진단을 위한 유전상담 현황과 지침개발을 위한 기초 연구

김민지(Min Jee Kim),이형송(Hyoung-Song Lee),강인수(Inn Soo Kang),정선용(Seon-Yong Jeong),김현주(Hyon J. Kim) 대한의학유전학회 2010 대한의학유전학회지 Vol.7 No.2

목적 : 착상전 유전진단(preimplantation genetic diag-nosis, PGD)은 유전질환을 가진 부부들을 대상으로 체외수정을 통해 획득한 배아에서 유전진단을 하는 방법이다. 다양한 유전질환을 가진 부부에게 그 질환에 맞는 PGD의 설계가 진행되어야 하기 때문에 PGD 시행 전 유전상담을 시행하는 것은 PGD 설계에 있어서 매우 중요하다. 이에, PGD 시행 시 필요한 유전상담의 내용에 대해 환자 및 가족과 전문가의 구체적인 의견을 수렴하고 분석하고자 하였다. 대상 및 방법 : 본 연구는 PGD에 있어서 유전상담의 필요성과 중요성에 대한 의견을 알아보고자, 2010년 2월 3일부터 4월 30일까지 PGD를 실시 또는 실시 예정인 부부들과 PGD 관련 전문가들을 대상으로 이메일과 직접 설문지를 배포하여 설문조사를 실시하였다. 결과 : 환자 60명과 전문가 31명을 포함하여 총 91명이 설문조사에 응답하였으며, 환자들은 염색체 이상 질환 49명(81.7%)과 단일유전자 이상 질환 11명(18.3%)이었다. 설문에 응답한 환자와 전문가 모두 유전상담이 PGD의 의료서비스 일환으로 반드시 필요하다고 답하였다. 환자의 충분한 이해를위하여 필요한 유전상담의 시간에 대해 환자와 가족 그리고 전문가 의견을 수렴한 결과, 각각 45명(75.0%)과 23명(74.2%)이 적정한 유전상담시간을 30분 이상이라고 응답하였다. 하지만, 현 의료시스템에서는 짧은 진료시간 내 진료와 유전상담을 동시에 진행함으로써 환자에게 완벽한 정보제공이 이루어지지 않는 것으로 나타났다. 한편, 전문가 그룹에서는 진료시간의 부족과 유전질환의 정보 부족이 유전상담의 어려운 점이라고 답하였으며, 이에 비 의사(non-MD) 전문유전상담사가 필요하다는 의견이 30명(96.7%)으로 높게 나타났다. 환자와 가족들은 PGD 시술 시 예기치 못한 결과의 가능성, 환자가 가진 유전질환의 위험을 예방할 수 있는 선택사항, 환자가 가지고 있는 유전질환의 위험도 평가, 유전자 검사 시 검사의 목적설명 및 검사기술의 한계점과 오진률의 설명, PGD시술 전반에 관한 기술적인 정보 등에 대하여 관심을 가지고 있으며 더 자세한 설명을 필요로 하는 것으로 나타났다. 이에 대한 전문가의견 역시 환자 및 가족이 관심 있고 자세한 설명을 원하는 정보와 대부분 일치하였다. 이에 따라 환자의 요구와 의견으로 나타난 위의 결과들을 향후 PGD를 위한 유전상담의 지침(guide-line) 구축 시 반영하여야 할 것으로 사료된다. 결론 : 본 연구에서 유전진단과 생식의학 기술의 발전과 더불어 PGD의 적용과 효율성 등에 대한 인식이 높아짐에 따라, PGD를 시행함에 있어서 구체적이고 체계적인 유전상담이 필요하다는 것을 확인할 수 있었다. 본 연구의 설문조사 결과가 향후 PGD를 위한 유전상담 지침서(guideline)에 반영되어 적절한 PGD의 설계, 실시, 사후 관리에 큰 도움이 되기를 기대한다. Purpose: Preimplantation genetic diagnosis (PGD), also known as embryo screening, is a pre-pregnancy technique used to identify genetic defects in embryos created through in vitro fertilization. PGD is considered a means of prenatal diagnosis of genetic abnormalities. PGD is used when one or both genetic parents has a known genetic abnormality; testing is performed on an embryo to determine if it also carries the genetic abnormality. The main advantage of PGD is the avoidance of selective pregnancy termination as it imparts a high likelihood that the baby will be free of the disease under consideration. The application of PGD to genetic practices, reproductive medicine, and genetic counseling is becoming the key component of fertility practice because of the need to develop a custom PGD design for each couple. Materials and Methods: In this study, a survey on the contents of genetic counseling in PGD was carried out via direct contact or e-mail with the patients and specialists who had experienced PGD during the three months from February to April 2010. Results: A total of 91 persons including 60 patients, 49 of whom had a chromosomal disorder and 11 of whom had a single gene disorder, and 31 PGD specialists responded to the survey. Analysis of the survey results revealed that all respondents were well aware of the importance of genetic counseling in all steps of PGD including planning, operation, and follow-up. The patient group responded that the possibility of unexpected results (51.7%), genetic risk assessment and recurrence risk (46.7%), the reproduction options (46.7%), the procedure and limitation of PGD (43.3%) and the information of PGD technology (35.0%) should be included as a genetic counseling information. In detail, 51.7% of patients wanted to be counseled for the possibility of unexpected results and the recurrence risk, while 46.7% wanted to know their reproduction options (46.7%). Approximately 96.7% of specialists replied that a non-M.D. genetic counselor is necessary for effective and systematic genetic counseling in PGD because it is difficult for physicians to offer satisfying information to patients due to lack of counseling time and specific knowledge of the disorders. Conclusions: The information from the survey provides important insight into the overall present situation of genetic counseling for PGD in Korea. The survey results demonstrated that there is a general awareness that genetic counseling is essential for PGD, suggesting that appropriate genetic counseling may play a important role in the success of PGD. The establishment of genetic counseling guidelines for PGD may contribute to better planning and management strategies for PGD.

착상전 유전자 진단에 대한 독일 법원의 논증 분석 ―형법적 가벌성의 인정여부에 따른 해석학적 구조의 차별화―

김나경 한국법철학회 2012 법철학연구 Vol.15 No.1

In 2010 wurde vom BGH beurteilt, dass die nach extrakorporaler Befruchtung beabsichtigte Präimplantationsdiagnostik mittels Blastozysten- biopsie und anschließender Untersuchung der entnommenen pluripotenten Trophoblastzellen auf schwere genetische Schäden hin keine Strafbarkeit nach §1 Abs.1 Nr.2 und §2 Abs.1 ESchG begründet. Die Vorschriften vom ESchG, durch die das LG und BGH seine Urteile begründet hat, haben die Eigenschaften, das ihr gemeinsames subjektives Tatbestandsmerkmal die Absicht inhaltlich nicht direkt oder positiv regelt, die die Strafbarkeit begründen kann. Daher ist es nicht klar, ob die Schwangerschaft nach dieser Vorschriften die einzige Absicht des Täters sein soll. In Hinblick auf der Interpretation des ESchG hat das Nicht-strafbarkeit-Argument den Tendenz, den Selbstzweck der PGD zu verneine und die Bedeutung der Selektion und Verwerfung von Embryonen zu vermindern. Dadurch ist die Bedeutung der Handlung vor der PGD verkleinert und wird die gesamt Tatensequenz integriet. Dagegen tendiert das Pro-Strafbarkeit-Argument dazu, den Selbstzweck der PGD zu bejahen, die Bedeutung der Selektion und Verwerfung von Embryonen zu vergrößern und die Handlungen in der Tatensequenz voneinander zu trennen. Zusammenfassend gesagt, kommt die normative Entscheidung über die biotechnologische Tathandlung darauf an, die biotechnololgische Tatensequenz festzustellen. Außerdem vermeiden die Argumente vom LG und BGH, über den rechtlichen Status von Embryonen konkret zu argumentieren und dies macht die Argumente nicht völlig überzeugend. Dazu gibt es viele unterschiedliche Hypothesen und Theorien wie Kontinuität-, Identität-, Kontinuität- und Spezies-Argument. Aus dieser verschiedenen Argumente kann zwar eine einheitliche Art und Weise des Lebensschutzes geleitet werden. Jedoch stellen die naturwissenschaflichen Eigenschaften den Zusammenhang von Embryonen und Menschen und den Schutzwürdigkeit von Embryonen können dadurch begründet werden. Außerdem begründet der beständige Meinungstreit über den normativen Status des Embryos, dass die Stärke des Schutzes zwischen Embyonen und geborenen Menschen differenziert werden kann. Dann kann die Verwerfung von Embryonen nicht immer die selbstständige Strafbarkeit darstellen und es ist klar, dass die Strafbarkeit der PGD nach dem ESchG nicht angemonnen werden kann. In Hinblick auf die Rechtspolitik ist es erforderlich, die Schwangerschaftsherbeiführung als das Subjektivestatbestandsmerkmal mit dem Verständnis vom Leben des Embryos zu konkretisieren und durch dieses Merkmal die Tatensequenz zu integrieren. 2010년 독일연방법원에서는, ‘배아가 중대한 유전적인 결함을 지니고 있는지를 알기 위하여’ ‘배반포기 단계의 배아로부터 다능세포를 추출하여 검사하는 방식으로’ 착상전 유전자 진단(PGD)을 시행하는 경우, 이러한 행위에 대해 배아보호법(ESchG) 제1조 제1항 제2호 및 동법 제2조 제1항을 적용할 수 없다는 판결을 내렸다. 이 연구는 이 판결을 기초로 관련 법규정과 규율대상이 갖는 특성을 분석하고, 이를 기초로 연방법원의 결정이 있기까지 내려졌었던 각 단계에서의 독일 법원들의 논증이 갖는 구조적 특징을 밝힘으로써 생명공학적 행위에 대한 법적 규율의 기초와 법정책에 대한 제언을 하는 것을 주된 내용으로 한다. 독일법원이 근거로 삼는 관련 법규정들은―이 판결 이후 있게 된 배아보호법의 개정을 차치하면―PGD를 직접적으로 규율하지 않고 유전자 진단에 선행되거나 후속하는 행위들을 규율하는데, 이러한 규율은 결국 각 조항들에서 공통적으로 요청하는 행위자의 ‘주관적 의도’의 확정을 가벌성 판단의 결정적 기준으로 삼게 된다. 그런데 이 조항들은 행위의 가벌성을 ‘직접’ 근거지을 수 있는 특정한 고의의 내용을 적극적으로 규정하지 않고 불가벌성을 근거짓는 고의를 규정하는 소극적인 태도를 취한다. 따라서 이러한 조항들만으로는 ‘임신’이 행위자가 지녀야 하는 ‘유일한’ 목적이어야 하는 것인지의 여부가 불분명하며, 특히 PGD 이후에는 배아의 ‘이식’ 그리고 ‘냉동보관 또는 폐기’라는 ‘상반된 속성’을 지니는 이질적인 행위들이 공존한다는 점은 그러한 판단을 더욱 어렵게 한다. 이러한 상황에서 우선 가벌성의 부인론은 PGD의 자기목적성을 부인하고 선별(폐기)과 임신의 목적이 양립가능하다고 보면서, 후속 행위의 의미를 축소한다. 그리고 이를 통해 선행행위의 의미가 확대되면서 임신목적에 의해 전체 행위과정이 통합된다. 하지만 이와는 반대로 가벌성의 인정론은 PGD의 자기목적성을 인정하고 후속행위의 의미를 확대하면서, 전체 행위과정을 분리하는 경향을 보인다. 이와 같은 독일 법원의 논증들을 분석해보면, 생명공학적 행위에 대한 규범적인 판단은 결국 ‘생명공학적 행위시퀀스’를 확정하는 것이라는 점을 확인할 수 있다. 그러나 독일 법원의 논증들이 갖는 한계는, 종국적으로 논증이 설득력을 갖추기 위해서는 필수적으로 드러나야 하는 배아의 법적 지위에 관한 언급을 회피하고 있다는 점이다. 배아의 생명에 대해서는 잠재성 논증, 연속성 논증, 동일성 논증, (생물학적) 종 논증 등 다양한 논증이 존재한다. 이와 같은 자연과학적 사실에 기초한 논증들은 그 자체로서 다양한 해석의 가능성을 지니므로 이로부터 통일된 생명보호의 방식을 도출해낼 수 없다. 다만, 이러한 자연과학적 사실은 배아와 우리를 ‘관련지음’으로써 우리가 우리 자신을 이해할 수 있는 매개체가 된다는 점에서 ‘배아에 대한 보호 필요성’을 근거지을 수 있으며, 배아의 생명 보호 강도와 관련하여 끊임없이 서로 다른 견해들이 대립한다는 점은 배아의 생명과 태어난 인간 생명간의 보호를 ‘차별화’할 수 있는 가능성에 대한 근거가 된다. 그렇다면 배아의 폐기는 항상 독자적인 불법성을 표상할 수 있는 것이 아니며, 이러한 점에서 독일 배아보호법 체계 하에서 PGD의 가벌성을 인정하기 어렵다는 점은 보다 분명해진다. 더 나아가 법정책적으로는, ...

생쥐 정소에서의 Prostaglandin D2 system 및 estrogen에 의한 PGD2 system의 조절

하철민,이재은,오영석,계명찬 한국발생생물학회 2011 한국발생생물학회 학술발표대회 Vol.30 No.-

Prostaglandin D2 (PGD2)는 배아의 성결정 단계에서 Sertoli cell 분화의 주요인자인 SOX9의 발현을 촉진한다. PGD2는 Prostaglandin D synthase (PGDS)에 의해 Prostaglandin H2 (PGH2)가 이성화되어 만들어진다. PGDS는 스테로이드 생성 관련 유전자인 3β-HSDⅥ, 17β-HSDⅢ와 함께 Leydig cell에서 사춘기 이후 발현되는 것으로 알려져 있으며, lipocalin-type PGDS (L-PGDS)와 hematopoietic PGDS (hPGDS)가 있는 것으로 알려져 있다. L-PGDS는 수컷특이적인 효소로 알려져 있으나, hPGDS는 수컷의 생식소에서는 그 기능이 알려져 있지 않다. 또한, L-PGDS는 여러 조직에서 estrogen에 의해 조절된다고 알려져 있으나, 정소에서는 정확한 조절양상이 알려져 있지 않다. 본 연구는 정소내에서 정자형성 및 스테로이드 생성과정에서 두 가지 형태의 PGDS에서 생성된 각각의 PGD2의 역할을 규명하기 위한 일환으로 생쥐 정소 발생과 성숙단계에 따른 PGDS와 PGD receptor 및 GPR44의 발현을 조사하였으며, estrogen에 의한 PGD2 system의 조절양상을 규명하기 위해 ERα KO와 WT 생쥐에서의 L-PGDS, hPGDS, PGD receptor, GPR44의 발현을 조사하였다. 생후 1, 7, 14, 28, 56일령 생쥐 정소 및 ERα KO와 WT 생쥐 정소로부터 total RNA를 추출하여 정량적 RT-PCR법으로 L-PGDS, hPGDS, PGDR, GPR44의 mRNA 발현을 분석하였고, 정소 파라핀 절편에서 면역조직화학방법으로 L-PGDS, hPGDS, PGDR, GPR44의 단백질 발현을 분석하였다. ERα KO와 WT생쥐 정소 파라핀 절편에서 면역조직화학법을 통해 L-PGDS의 단백질 발현 정도를 분석하였다. 생쥐 정소에서 hPGDS, L-PGDS, GPR44, PGDR의 mRNA 모두 사춘기(생후 28일)이후 발현이 유의적으로 증가하였다. GPR44와 PGDR의 mRNA는 사춘기 이전에는 거의 발현되지 않았다. 하지만 L-PGDS의 경우는 생후 7일, 14일에 비해 생후 1일에서 높은 mRNA 발현량을 보였다. ERα KO와 WT 생쥐 정소 mRNA의 경우 hPGDS와 PGR에서는 차이를 보이지 않았으나 L-PGDS와 GPR44에서는 WT 생쥐보다 ERα KO 생쥐에서 낮은 발현량을 보였다. 면역조직화학법 결과, L-PGDS와 hPGDS는 생후 1일의 fetal Leydig cell에서 주로 발현하였으며, 사춘기 이후 adult Leydig cell에서 발현하였다. GPR44는 Sertoli cell에서 발현되며, 신생기에는 Spermatogonia에, 사춘기에는 elongating spermatid와 round spermatid에, 성체기에는 Leydig cell에서도 발현된다. PGDR은 생후 1일에서 Sertoli cell에서 발현되고, 사춘기와 성체기의 Sertoli cell과 Leydig cell에서 발현된다. 그리고 ERα KO 생쥐에서 L-PGDS는 WT 생쥐보다 낮은 단백질 발현량을 보였다. L-PGDS와 hPGDS는 fetal 및 adult Leydig cell에서 발현되므로 PGD2는 Leydig cell에서 발현되는 PGDR을 통해 Leydig cell의 분화 및 스테로이드 형성과정에 관여하는 것으로 사료된다. 또한 PGD2는 Sertoli cell과 germ cell에서 발현되는 GPR44를 통해 정자형성과정에 관여하는 것으로 사료된다. 그리고 estrogen에 의해 L-PGDS와 GPR44의 mRNA가 발현량이 증가하는 방향으로 조절되고, 그로 인한 단백질 발현 또한 증가하는 방향으로 조절되는 것으로 사료된다.

착상전 유전자 진단에 대한 생명윤리적 고찰

최진일 한국가톨릭신학학회 2014 가톨릭신학 Vol.0 No.24

본 논문은 착상전유전진단의 생명윤리적 고찰을 과학적 측면과 인간배아의 지위의 문제와 함께 시도한다. 본 논문에서, 인간배아의 지위는 어떤 법적인 절차나 사회·문화의 동의를 거쳐 규정하는 차원이라기보다는 그 존재론적 정체성에 대한 질문에서 고찰할 필요가 있음을 제기한다. 인격으로서 인간배아는 수정된 순간부터 반복될 수 없는 유일한 개별체로서 존엄성을 가지며, 그의 양도할 수 없는 기본권은 수정시부터 죽는 날까지 모든 인간이 갖는 생명권과 신체의 완전성을 침해당하지 않을 권리이다. PGD가 치료의 목적을 추구할 수 있게 된다면, 그것은 개입의 대상인 주체, 즉 인간배아를 위한 것이어야 하며, 어떤 사람의 이익을 위해 인간배아를 희생시켜서는 안 된다. 그러므로 오직 PGD의 주체인 한 생명의 구체적인 배아를 위한 치료적 이유가 있을 때 정당화 될 수 있을 것이다. This paper attempts to consider the bioethical issues of preimplantation genetic diagnosis (PGD) with scientific aspects of PGD and the question of the status of the human embryo. In this paper, it raises an issue that the status of the human embryo needs considering from the question of the ontological identity rather than defining the status within the process of law or social and cultural consent. The human embryo as a person has dignity owing to a unique individual from the moment of fertilization, and the inviolable fundamental right for every human person is the right to life and physical integrity from the moment of conception until death. When it comes to saying that the aim of PGD is treatments, it should be performed for the human embryo who is the subject of the diagnosis. It cannot be permissible to sacrifice one person (the human embryo) for another s interest. In this regard, PGD may be justified only when it treats this concrete human embryo who has a human life.

착상전 유전자 진단 및 산전 진단에 대한 법적 윤리적 고찰

김장한 ( Jang Han Kim ) 대한산부인과학회 2006 Obstetrics & Gynecology Science Vol.49 No.12

Objective: After `Bioethics & biosafety act` has been enacted since 2005, Preimplantation genetic diagnosis (PGD) for embryo and Prenatal diagnosis (PD) for fetus are regulated by this law. This article will discuss the problem and revision of that law. Methods: From the medical point of view, we consider the developmental stages of human embryo, genetic disease and PGD. According to the documentary records, we discuss the PGD allowance of European countries and USA and requisites for that allowance. We also discuss the PD in association with the `Motherhood act` and a related judicial decision. Results: On PGD, the attitude of quality of European countries is in the nature of variable spectrum and USA doesn`t have explicit federal regulations. PGD permission is based on the individual institution and the genetic disease. The genetic conditions for legitimate abortion of `Motherhood act are not included in Bioethics & biosafety act`. So The purpose and criteria of PD is now in a state of confusion. Conclusion: PGD should be regulated within the title of embryo in `Bioethics & biosafety act` not within the title of genetic test. Each PGD should be permitted individually on the basis of each institution and genetic disease and then the criteria could be more broadened. The provision for PD should include the legitimate abortion conditions of `Motherhood act`. To diagnose the sex linked genetic disease, the punishment for sex detection should be excepted to the `Medicine act`.

근이영양증에 대한 착상전 유전진단에서 Duplex-nested PCR과 Fluorescent PCR 방법의 효용성

이형송,최혜원,임천규,박소연,김진영,궁미경,전진현,강인수,Lee, Hyoung-Song,Choi, Hye Won,Lim, Chun Kyu,Park, So Yeon,Kim, Jin Young,Koong, Mi Kyoung,Jun, Jin Hyun,Kang, Inn Soo 대한생식의학회 2005 Clinical and Experimental Reproductive Medicine Vol.32 No.1

Objective: Preimplantation genetic diagnosis (PGD) is reserved for couples with a risk of transmitting a serious and incurable disease, and hence avoids the undesirable therapeutic abortion. In this study, we evaluated the efficacy of PGD for Duchenne muscular dystrophy (DMD) cases by the fluorescent PCR with polymorphic linked markers and the conventional duplex-nested PCR methods. Methods: Biopsy of one or two blastomeres was done from the embryos fertilized by ICSI on the third day after fertilization. We performed two cases of PGD-DMD by the duplex-nested PCR for the causative mutation loci and the SRY gene on Y chromosome. The triplex fluorescent PCR for the mutation loci, the SRY gene and the polymorphic microsatellite marker on X chromosome was applied for two cases of PGD-DMD. Results: By the duplex-nested PCR, successful diagnosis rate was 95.5% (21/22), but we could not discriminate the female embryos whether normal or carrier in this X-linked recessive disease. However, the triplex fluorescent PCR method showed 100% (27/27) of successful diagnosis rate, and all female embryos (n=17) were distinguished normal (n=10) from carrier (n=7) embryos. Unaffected and normal embryos were transferred into mother's uterus after diagnosis. A healthy normal male was achieved after PGD with the duplex-nested PCR method and a twin, a male and a female, were delivered with triplex fluorescent PCR method. The normality of dystrophin gene was confirmed by amniocentesis and postnatal genetic analysis in all offsprings. Conclusion: The fluorescent PCR with polymorphic marker might be useful in improving the specificity and reliability of PGD for single gene disorders.

형광직접보합법을 이용한 착상전 유전진단 기법의 최적화와 경험 축적에 의한 임신율의 향상

임천규,민동미,이형송,변혜경,박소연,류현미,김진영,궁미경,강인수,전진현,Lim, Chun-Kyu,Min, Dong-Mi,Lee, Hyoung-Song,Byun, Hye-Kyung,Park, So-Yeon,Ryu, Hyun-Mee,Kim, Jin-Young,Koong, Mi-Kyoung,Kang, Inn-Soo,Jun, Jin-Hyun 대한생식의학회 2004 Clinical and Experimental Reproductive Medicine Vol.31 No.1

Objectives: This study was performed to evaluate the laboratory system for successful PGD using fluorescence in situ hybridization (FISH) and the clinical outcome of PGD cycles in five years experiences. Methods: A total of 181 PGD-FISH cycles of 106 couples were performed, and diagnosed chromosome normality in the preimplantation embryos. The laboratory and clinical data were classified by the following optimization steps, and statistically analyzed. Phase I: Blastomere biopsy with two kinds of pipettes, removal of cytoplasmic proteins without treatment of pepsin and culture of biopsied embryos with single medium; Phase II: Blatomere biopsy with single pipette, removal of cytoplasmic proteins with pepsin and culture of biopsied embryos with single medium; Phase III: Blastomere biopsy with single pipette, removal of cytoplasmic proteins with pepsin and culture of biopsied embryos with sequential media. Results: A total of 3, 209 oocytes were collected, and 83.8% (2, 212/2, 640) of fertilization rate was obtained by ICSI procedure. The successful blastomere biopsies were accomplished in 98.6% (2, 043/2, 071) of embryos, and the successful diagnosis rate of FISH was 94.7% (1, 935/ 2, 043) of blastomeres from overall data. Embryo transfers with normal embryos were conducted in 93.9% (170/181) of started cycles. There was no difference in the successful rate of biopsy and diagnosis among Phase I, II and III. However, the pregnancy rate per embryo transfer of Phase III (38.8%, 26/67) was significantly (p<0.05) higher than those of Phase I (13.9%, 5/36) and Phase II (14.9%, 10/67). Conclusions: The laboratory optimization and experience for the PGD with FISH procedure can increase the pregnancy rate to 38.8% in the human IVF-ET program. Our facility of PGD with FISH provides the great possibility to get a normal pregnancy for the concerned couples by chromosomal aberrations.

생쥐 모델을 이용한 배아의 할구 생검법과 할구가 생검된 배아의 배양시 공배양 효과에 관한 연구: 인간에서의 착상 전 유전진단 기술 개발을 위한 동물실험 모델의 개발

김석현,류범용,지병철,최성미,김희선,방명걸,오선경,서창석,최영민,김정구,문신용,이진용,채희동,김정훈,Kim, S.H.,Ryu, B.Y.,Jee, B.C.,Choi, S.M.,Kim, H.S.,Pang, M.G.,Oh, S.K.,Suh, C.S.,Choi, Y.M.,Kim, J.G.,Moon, S.Y.,Lee, J.Y.,Chae, H.D.,Kim, C.H. 대한생식의학회 1999 Clinical and Experimental Reproductive Medicine Vol.26 No.1

The genetic defects in human gametes and embryos can cause adverse effects on overall reproductive events. Biopsy of embryos for preimplantation genetic diagnosis (PGD) offers a new possibility of having children free of the genetic disease. In addition, advanced embryo culture method may enhance the effectiveness of embryo biopsy for the practical application of PGD. This experimental study was undertaken to evaluate the effects of coculture on the development in vitro of biopsied mouse embryos as a preclinical model for PGD of human embryos. Embryos were obtained after in vitro fertilization (IVF) from F1 hybrid mice (C57BLfemale/CBAmale). Using micromanipulation, 1, 2, 3 or 4 blastomeres of 8-cell stage embryos were aspirated through a hole made in the zona pellucida by zona drilling (ZD) with acidic Tyrode's solution (ATS). After biopsy of blastomeres, embryos were cultured in vitro for 110 hours in Ham's F-10 supplemented with 0.4% BSA or cocultured on the monolayer of Vero cells in the same medium. The frequence of blastocyst formation were recorded, and the embryos beyond blastocyst stage were stained with 10% Giemsa to count the total number of nuclei in each embryo. There was no significant difference in the blastocyst formation between the zona intact control group and the zona drilling (ZD) only, or biopsied groups. The hatching rate of all the treatment groups except 4/8 group was significantly higher than that of control group. In all the treatment groups, there was a significant reduction in the mean cell number of embryos beyond blastocyst stage ($50.2{\pm}14.0$ in control group vs. $41.2{\pm}7.9$ in ZD, $39.3{\pm}8.8$ in 7/8, $29.7{\pm}6.4$ in 6/8, $25.1{\pm}5.7$ in 5/8, and $22.1{\pm}4.3$ in 4/8 groups, p<0.05). When the same treatments were followed by coculture with Vero cells, a similar pattern was seen in the blastocyst formation and the hatching rate. However, in all the treatment groups, there was a significant increase in the mean cell number of embryos beyond blastocyst stage with coculture, compared with the parallel groups without coculture. In the cleavage rate of biopsied blastomeres cultured for 110 hours after IVF, there was no significant difference between coculture and non-coculture groups (87.2% vs. 78.7%). However, the mean cell number of embryos developed from the biopsied blastomeres was significantly higher in coculture group ($11.5{\pm}4.7\;vs.\;5.9{\pm}1.9$, p<0.05). In conclusion, biopsy of mouse embryos after ZD with ATS is a safe and highly efficient method for PGD, and coculture with Vero cells showed a positive effect on the development in vitro of biopsied mouse embryos and blastomeres as a preclinical model for PGD of human embryos.

복합운동과 두피케어가 탈모 남성의 호르몬 및 PGD2에 미치는 영향

곽인실(Kwak In Sil) 한국인체미용예술학회 2018 한국인체미용예술학회지 Vol.19 No.1

The purpose of this study was to investigate how combined exercise and scalp care programs had an effect on scalp, Testosterone, dihydrotestosterone(DHT), and ProstaglandinD2(PGD2) with the 20s and 30s’unⅣersity men students who were suffering from Alopecia for 12 weeks. There were four groups in this study such as Combined Exercise Group(CEG), Scalp Care Group(SCG), Combined Exercise and Scalp Care Group(CESCG), and ControⅡed Group(CG) and 10 subjects participated in each group. For 12 weeks, the combined exercise was carried out three times a week and the scalp care once a week before the program and then the scalp of men with alopecia, Androgen (testosterone, and dihydrotestosterone :DHT), and PGD₂ were checked. The results obtained from the study were as foⅡows. there was no significant difference for Testosterone and DHT among the groups and those in the period and there was no difference within interaction effect of the groups either. and a significant difference was not found in PGD2 among the groups and those in the period, and was not found in the interaction effect of the groups. When focusing on this fact, there should be more thorough studies that suggest exercise methods and a variety of scalp care programs for people suffering from hair loss in the initial stages. This study implies that this program is needed to utilize effectⅣe exercise methods and scalp care programs by applying to different ways the intensity, frequency, and the number of times.

Analysis of five novel putative constitutive gene promoters in transgenic rice plants

Park, Su-Hyun,Yi, Nari,Kim, Youn Shic,Jeong, Min-Ho,Bang, Seung-Woon,Choi, Yang Do,Kim, Ju-Kon Oxford University Press 2010 Journal of experimental botany Vol.61 No.9

<P>Novel constitutive gene promoters are essential components of crop biotechnology. Our analysis of five such promoters, <I>APX</I>, <I>SCP1</I>, <I>PGD1</I>, <I>R1G1B</I>, and <I>EIF5</I>, in transgenic rice plants is reported here. The five promoter regions were linked to the <I>gfp</I> reporter gene and transformed into rice. Using fluorescent microscopy and q-RT-PCR, promoter activities were analysed in comparison with <I>OsCc1</I>, <I>Act1</I>, and <I>ZmUbi1</I>, previously characterized as strong constitutive promoters. The <I>APX</I> and <I>PGD1</I> promoters direct high levels of gene expression in all tissues and stages, producing GFP at levels of up to 1.3% of the total soluble protein. <I>PGD1</I> is particularly active in flowers and mature roots. The <I>R1G1B</I> is active in the whole grain including the embryo, endosperm, and aleurone layer, and thus represents a constitutive promoter with activity in whole seeds that has not been described previously. The <I>ZmUbi1</I> and <I>R1G1B</I> promoters are markedly less active in young roots and mature leaves whilst the <I>APX</I>, <I>PGD1</I>, <I>OsCc1</I>, and <I>Act1</I> promoters are highly active in both vegetative and reproductive tissues. Overall, our results demonstrate that <I>APX</I>, <I>PGD1</I>, and <I>R1G1B</I> are novel gene promoters that are highly active at all stages of plant growth with distinct levels of activity.</P>