자동차용 Air Flow Sensor 개발

朴世光 경북대학교 센서기술연구소 1997 연차보고서 Vol.1997 No.-

급성 파라쿼트 중독에서 혈중 파라쿼트 농도

박승민,김세현,최수진,김현,이완구,김영남,이광영,이영희,신성혜 대한응급의학회 2000 대한응급의학회지 Vol.11 No.3

Background: Paraquat is a bipyridyl compound, and when ingested, concentrated paraquat can cause either rapid death from multisystem failure and cardiovascular shock or delayed death from progressive pulmonary fibrosis. Paraquat is poorly absorbed by inhalation, but when ingested orally, severe illness can occur. Death usually occurs within 2 days if more than 50 ㎎/㎏ of paraquat is ingested . The most important prognostic indicator is the quantity of paraquat absorbed, as shown by the plasma paraquat concentration, and the prognostic indication depends mostly on the description given by the patients and their families about the amount of paraquat ingested, which is often underestimated or overestimagted. For these reasons, we tried to compare the plasma paraquat concentrations with amount of paraquat described by patients or their families. Methods: We reviewed the medical records of 59 patients with acute paraquat poisoning from February 1998 through February 1999, the paraquat concentrations in plasma were measured at Presbyterian Medical Center by using high performance liquid chromatography. Results: There was a striking discrepancy between the plasma paraquat concentration and the ingested amount described by the patients or their families. Conclusion: We recommend that the plasma paraquat concentration be measured in patients being treated for acute paraquat poisoning.

임신부 뇨로부터 정제된 인간 상피세포 증식 인자 유사체의 in vitro bioassay 및 특성

박세철,전재현,남정현,권태종,고인영,유광현 한국미생물생명공학회 ( 구 한국산업미생물학회 ) 1996 한국미생물·생명공학회지 Vol.24 No.4

벤조산흡착, 음이온 교환수지, 단일클론항체을 이용한 immunoaffinity chromatography를 통하여 임신부 뇨로부터 천연의 hEGF를 정제하였다. 정제된 hEGF는 μ Bonda C_18 column을 사용한 HPLC 분석을 통하여 4개의 fraction으로 분리가 가능하였으며 western blot과 double immunodiffusion 실험 결과, 각각의 fraction이 hEGF의 특성을 가진 유사체인 것을 알 수 있었다. 또한 hEGF 표준 물질과의 spiking 및 아미노산 분석 등을 통하여 두 번째 fraction이 nhEGF와 동일한 것으로 확인하였다. nhEGF 및 그 유사체의 생물학적 활성 비교를 위하여 NIH 3T3 세포주에서 5'-Brdu incorporation 측정을 위한 labelling 시간, 혈청 농도의 최적 조건을 결정하였다. NIH 3T3 세포주의 DNA 합성능은 0.2% FCS가 포함된 저혈청 배지에서 hEGF가 0.1~10 ng/ml 농도로 첨가하였을 때 증가하는 경향을 나타냈다. HPLC를 통하여 분리된 두번째 hEGF 유사체가 다른 유사체보다도 생물학적인 활성이 우수하였으며, rhEGF 표준물질과의 spiking 및 아미노산 서열 분석등을 통하여 nhEGF로 밝혀졌다. 임신부의 뇨의 hEGF 유사체 함량중 natural hEGF는 46%이었다. Natural human epidermal growth facto (nhEGF) was purified from pregnant human urine by benzoic acid adsorption, DEAE-Sepharose ion exchange, and immunoaffinity chromatography. The purified nhEGF was further separated into four fractions using Bondapak C_18 HPLC system. Following characterization by Western blot and double immunodiffusion, we found that each fraction corresponds to four derivatives of the nhEGF. For biological analysis of nhEGF, we optimized the labeling time and serum concentration for the incorporation of 5-bromo-2'-deoxy-uridine (BrdU), a non-radioactive alternative for [^3H]-thymidine uptake, into NIH 3T3 cells. The DNA synthesis of NIH 3T3 cells was gradually increased at the nhEGF concentrations between 0.1~10 ng/ml in the Dulbecco's Modified Eagles Medium (DMEM) containing 0.2% Fetal calf serum (FCS). When we assayed the biological activity of four fractions, the activity of the second fraction was superior to that of the others.

Escherichia coli에서 발현된 재조합 인간 상피세포 증식인자의 정제 및 특성

박세철,유광현 한국미생물생명공학회 ( 구 한국산업미생물학회 ) 1996 한국미생물·생명공학회지 Vol.24 No.4

E. coli BL21(DE3, pYHB101)을 이용한 rhEGF의 최적 생산조건은 25℃, 48시간 배양에서 변형된 MBL 배지에 glucose를 10g /l 첨가한 배지로 배양한 경우이었고 유도물질로 1mM IPTG를 사용하여 2시간 배양 후에 유도 배양하였을 때 최대 rhEGF가 68.7 mg/l가 발현되었다. 배양액으로부터 Amberlite XAD-7, ultrafiltration, DEAE Sepharose column chromatography 정제 과정을 거쳐 rhEGF가 정제되었으며 이때 정제도는 267배이었으며 66.6%의 회수율을 보였다. 정제된 rhEGF는 HPLC 분석 결과 2개의 분획으로 나누어졌으며 N말단 아미노산 서열 분석결과 Asn-Ser-Asp-Ser-Glu-Cys-Pro-Leu-Ser-His로 나타났다. 또한 5'-bromo-2'-deoxy-uridine (BrdU)의 삽입에 의한 DNA 생성능을 조사하였다. 상기의 결과로 E. coli BL21(DE3, pYHB101)에 의하여 생산된 rhEGF는 nhEGF와 동일한 것으로 추정되었다. Recombinant human epidermal growth factor (rhEGF) was produced strain was cultured at 25℃ for 48 hours in the modified MBS medium containing 10 g/l glucose with 1 mM IPTG induction at 2 hours after inoculation. The rhEGF was purified upto 267 folds by Amberlite XAD-7 chromatography, ultrafiltration, and DEAE Sepharose fast fow ion exchange chromatography with an overall yield of 66.6%. The purfied rhEGF was further separated into two fractions by HPLC. The N-terminal amino acid sequence of the second fraction was Asn-Ser-Asp-Ser-Glu-Cys-Pro-Leu-Ser-His. The effect of rhEGF on the DNA synthesis was examined using in vitro biological assay based on the incorporation of 5'-bromo-2'-deoxy-uridine (BrdU). The purified rhEGF shows no difference with natural human epidermal growth factor (nhEGF) in N-terminal amino acids residues and biological activity. From the results, we concluded that rhEGF produced from E. coli harboring the plasmid pYHB101 was apparently the same as nhEGF.

출아효모에서 TAR 클론닝법을 이용한 고등동물의 게놈으로부터 특정 염색체 부위의 분리

박정은,윤영호,이윤주,김광섭,윤세련,안태진,임선희,선우양일 동아대학교 기초과학연구소 2003 基礎科學硏究論文集 Vol.20 No.1

복잡한 게놈 분석에 용이하도록 효모의 인공 염색체(YAC) 클론닝 시스템은 발달되어왔다. YAC은 박테리아의 인공 염색체(BAC)보다 더 큰 단편을 클론닝할 수 있고, 또한 클론된 단편을 쉽게 변형시킬 수 있다. 형질전환과 연계된 재조합법(Transformation-Associated Recombination; TAR)은 게놈 라이브러리를 만들지 않고 직접 게놈 DNA로부터 분리하고자 하는 유전자나 특정 염색체 부분을 클론닝 할 수 있는 방법이다. 이 방법은 spheroplast transformation을 수행하는 동안, 목적으로 하는 유전자의 5' 그리고 3' 염기 배열(hooks)을 지닌 TAR 벡터와 게놈 DNA 사이에서 일어나는 상동성 재조합에 의해 이루어진다. 효모 내의 in vivo 재조합을 이용한 TAR 클론닝법은 복잡한 게놈으로부터 목적의 염색체 부분을 원형 YAC의 형태로서 선택적으로 분리할 수 있다. 그러므로 TAR 클론닝 법은 특정 염색체로부터 YACs을 만드는데 매우 유용하여, 전체 게놈으로부터 특이적 유전자나 유전자의 family를 분리하는데 효과적인 방법으로 사료된다. Yeast artificial chromosome (YAC) cloning systems have advanced the analysis of complex genomes considerably. They permit the cloning of larger fragments than do bacterial artificial chromosome systems, and the cloned material is more easily modified. Transformation-associated recombination (TAR) is a cloning technique that allows specific chromosomal regions or genes to be isolated directly from genomic DNA without prior construction of a genomic library. This technique involves homologous recombination during spheroplast transformation between genomic DNA and a TAR vector that has 5' and 3' gene targeting sequences (hooks). Using in vivo recombination in yeast, TAR cloning selectively isolates, as circular YACs, desired chromosome segments or entire genes from complex genomes. We propose that TAR cloning can provide an efficient means for generating YACs from specific chromosomes and that TAR cloning may be useful for isolating families of genes and specific genes from total genome DNA.

道路交通事故에 대한 刑事制裁

朴光燮,金容世 忠南大學校 法學硏究所 1994 法學硏究 Vol.5 No.1

賂物의 職務關聯性

朴光燮,金容世 忠南大學校 法學硏究所 1995 法學硏究 Vol.6 No.1

성균관대학교 물리학과 방음실의 설계 및 제작

朴興秀,尹錫旺,李聖壽,朴光俊,吳世珍 성균관대학교 기초과학연구소 1986 論文集 Vol.37 No.1

An anechoic chamber was constructed to make to condition of acoustic free field at the Department of Physics, Sung Kyun Kwan University. In this paper the criteria for the design and construction of the anechoic chamber are described. 48cm long wedges of density 15.3kg/㎥ glasswool attached to the 40×20×20㎤ base were used for the lining of anechoic chamber with the cutoff frequency of 125Hz. The interior space of the chamber is 3.56m long, 3.38m wide and 2.37m high.

첨단 수송장비용 센서 및 응용시스템 개발

朴世光,崔時永,全國鎭,李光萬 경북대학교 센서기술연구소 1997 연차보고서 Vol.1997 No.-

자동차의 안전성 향상과 편리성은 정밀한 기계적 시스템과 첨단 전자 시스템의 조화에 의한 것이다. 현재 자동차의 전자 시스템 중 엔진의 고효율을 위해 엔진유입 공기량, 실린더의 압력, 엔진의 회전수 등을 검출하는 센서부와 사고의 원인인 타이어 펑크를 모니터링하는 시스템이 첨단 수송 장비의 핵심 부품이다. 따라서 이를 개발하기 위해서 1) 자동차용 Air Flow Sensor, 2) 자동차용 엔진 MAP Sensor, 3) 멀터센서 모니터링 시스템, 4) 자동차 실내 환경제어용 센서시스템 개발을 위한 연구를 수행하였다. 자동차용 엔진 공기유량센서를 제작하기 위해서 유한차분법과 SPICE로 시뮬레이션을 수행하고 이 결과로 센서를 설계하였다. 센서의 저항체를 제작하기 위해서 백금박막을 제작하고 각각 조건별로 특성을 조사하여 패터닝이 잘되고 저항값이 크고 온도계수가 큰 조건을 선택하여 센서를 제작하였다. 센서는 lift-off법으로 백금을 패터닝하고 PI-2723을 보호막으로 사용하였다. 구동회로는 정온도형으로 동작하도록 피이드백 회로를 사용하였고, 기준유량계 출력과 일치하도록 피이드백 회로의 출력전압을 증폭하였다. 유체의 온도와 유량을 변화시킬 수 있는 실험장비를 제작하고 기준유량계와 제작한 유량계의 출력을 동시 측정하여 실험결과를 비교하였다. 유량에 대한 실험에서는 증폭한 출력전압은 기준유량계 출력과 거의 일치하였고, 스텝응답과 과도응답에서도 기준유량계 출력과 거의 일치함을 보았다. 자동차용 엔진 MAP Sensor의 연구에서는 SDB 웨이퍼를 이용하여 절대압 압력센서를 제조하였다. 센서의 구조는 두 개의 휫스톤 브릿지 회로와 다이아프램으로 구성되어있다. 두 개의 휫스톤 브릿지중 하나는 다이아프램의 가장자리에 위치하고, 다른 하나는 다이아프램의 가운데 부분에 위치한다. 다이아프램의 공극은 10^-5 Torr의 진공에서 형성시켜 공극안의 공기로 인한 압력센서의 감도에 미치는 온도효과를 줄였다. 이것은 압력센서의 온도보상에 대한 부수적인 방법이다. 본 실험의 주된 온도 보상법은 두 브릿지의 오프셋 전압의 차를 이용한 방법이다. 이 방법을 이용하여 22 ∼ 100℃ 범위에서 온도 영향을 80 %이상 보상할 수가 있었다. 멀티센서 모니터링 시스템 연구에서는 첨단 수송장치용에 적합한 직접 디지털 출력을 갖는 압력 센서와 온도 센서를 멀티 센서에 적합한 형태로 제작하였다. 압력 센서는 PR 희생층과 금속 구조층으로 하는 표면 마이크로머시닝 기술을 이용하여 제작하였으며, 온도 센서는 n-well CMOS 공정을 이용한 substrate PNP BJT 트랜지스터를 이용하여 제작하였다. 이 두 센서를 함께 제작할 수 있는 공정을 개발하였으며 각각소자에 대하여 측정 셋업을 구성하여 측정하였다. 직접 디지털 압력 센서의 출력에 대한 기본적인 동작 특성을 확인하였으며, 제작된 온도 센서의 감도는 1.57 ㎷/℃ 이다. 자동차 실내환경제어용 센서시스템 개발에서는 표준 CMOS 공정기술과 실리콘미세가공기술을 이용하여 자동차 실내환경 제어용 센서시스템을 개발하기 위하여 마이크로 가스유량센서와 습도센서를 설계하고 제조공정을 수행하였다. 가스유량센서의 경우 설계된 칩의 크기는 3 × 3 ㎟이고, 히터 좌우에 6 쌍의 n-poly/p-poly 열전대를 구성하였다. 습도센서의 경우 칩의 크기가 0.8 × 1.2 ㎟이고 단일 n-poly 실리콘히터로만 구성되어 있는 매우 간단한 구조를 하고 있다. 최소의 열용량과 기판 및 페케지를 통한 열손실을 최소화하기 위하여 열적 및 기계적 특성이 우수한 NON 구조의 브릿지형 다이아프램을 실리콘 미세가공 기술을 이용하여 구현하였다. 또한 NON절연막의 열전도특성을 연구하기 위한 측정소자를 설계·제작하고 그 특성을 측정 중에 있다. 마이크로 습도센서의 동작원리를 기술하고 마이크로 열센서를 구동하게 될 구동회로를 설계·검증하고 있으며 CMOS 회로화 하여 센서와 함께 집적된 센서시스템을 구현할 것이다. The improvement of safety and convenience in motor car lies on the harmony of a minute mechanical system and high-tech electric system. Nowadays the core part of the high-tech transport equipment is the system and the sensor part. The system monitors the flat tire that causes accidents and the sensor part detects the air amount of a engine intake, the pressure of the cylinder and the turn number of an engine for high efficiency of engine in car electronic system. In order to develop it, therefore we have studied 1) an air flow sensor for car engine, 2) a pressure sensor for car engine, 3) the system monitoring pressure of car tire. We designed air flow sensor in use of a finite different method and SPICE simulation to make it. In order to make resistors in the sensor, we made platinum thin film and then we tested the characteristics of the thin film in various conditions. So we chose the condition which is patterning better, higher resistor value and higher temperature coefficient. The sensor of platinum thin film was patterned by lift-off method and passivated with PI-2723. We used the feedback circuit to make an operation circuit drive in constant temperature. We amplified the output voltage of the fabricated sensor in accordance with that of a reference flowmeter. We made an equipment to change fluid temperature and flow. We measured the output of the reference flowmeter and the fabricated flow sensor simultaneously, and compared them. In the experiment, the amplified output voltage nearly agree to the output of the reference flowmeter. The absolute pressure sensor using SDB wafer has been fabricated. The structure of the sensor consists of two Wheatstone bridges and a diaphragm. One of the two Wheatstone bridges is located on the edge of diaphragm, and the other is located on the center of diaphragm. The diaphragm cavity is sealed in vacuum(∼10^-5 Torr) to reduce the effect of temperature due to the vapor in the cavity on the sensitivity of pressure sensor. This is the minor method of temperature compensation method. In this experiment the main compensation method is to use the differrence of the two bridge offset voltages. In this method the temperature effect in the range of 22 ℃ ∼ 100 ℃ was compensated over 80 %. We produced a pressure sensor and a temperature sensor, which are suitable for a multi sensor, and have the direct digital output suitable for an advanced transporting equipment. The pressure sensor was fabricated using a surface micromachining technique with a sacrificial PR layer and a structural metal layer. The temperature sensor was fabricated using a substrate PNP BJT made by use of an n-well CMOS process. We developed the process that could produce these two sensors together, organized and estimated the setup about each element. The basic operating characteristics are identified about the direct digital output of the pressure sensor, and the sensitivity of the produced temperature sensor is 1.57㎷/℃ Micro gas-flow sensor and humidity sensor were designed and fabricated using a standard CMOS process technology and silicon micromachining techniques for an Interior Environment of Automotive. The chip size of designed gas-flow sensor is 3 × 3 ㎟ with six pairs of n-poly/p-poly thermocouples around the heater. For the case of the humidity sensor, the size is 0.8 × 1.2 ㎟ with single n-poly silicon heater and simplicity. A bridge type diaphragm of NON structure having an excellent mechanical and thermal properties, was implemented by silicon anisotropic etch. The thermal properties of NON insulator is investigating using by the measurement device that was designed and made specially. The operating principle of micro humidity sensor was described and the driving circuits of the micro thermal sensors were designed and verified. The circuits in CMOS will be integrated into the sensor system with the thermal sensor.

PelB Signal Sequence로 유도된 제조합 인간 상피세포 증식인자 분비 발현 벡터의 제조

박세철,남정현,김정근,권태종,고인영,유광현 한국미생물생명공학회 ( 구 한국산업미생물학회 ) 1996 한국미생물·생명공학회지 Vol.24 No.5

전사개시 단계중에 삽입되는 N말단의 methionine이 제거되고 pelB signal sequence를 삽입하여 인체 epidermal growth factor (hEGF)가 직접 분비발현 되도록 고안된 T7과 tac promoter에 의하여 각각 발현되는 pYHB101과 pYHB2를 제조하였다. 또한 T7 promoter에 의하여 발현되지만 signal sequence를 삽입하지 않은 pYHB1도 제조하여 각각 제조된 재조합 plasmid들의 발현 및 분비효율을 비교하였다. pelB signal sequence hEGF 유전자를 갖도록 제조된 pYHB101을 포함하고 있는 균주가 pYHB1보다 균체 성장속도는 낮았지만 pYHB101을 1 mM IPTG로 5시간 induction 하였을 때 13 mg/l의 rhEGF가 분비발현되어 T7 promoter의 발현 체계를 갖는 경우가 tac promoter보다 높은 발현 효율을 보였다. 이때 pYHB101에서 발현되는 rhEGF의 발현량은 준최적 조건에서 14 mg/l이었다. We have designed nucleotide sequences of hEGF structural gene to eliminate the N-terminal methionine residue incorporated during the translation initiation step, and constructed recombinant human epidermal growth factor (rhEGF) secretion plasmids pYHB101, and pYHB2 in which pelB signal sequence-hEGF gene was expressed under the control of the T7, and tac promoter, respectively. We also constructed pYHB1 vector which contains rhEGF gene controlled by T7 promoter. The transformant with pYHB101 showed relatively slow growth pattern compared to the transformant with pYHB1. However, we observed that the transformant with pYHB101 secreted rhEGF of 13 mg/l significantly after 5 hr induction with 1 mM IPTG and that the T7 promoter was more effective than tac promoter when connected to pelB signal sequence. The amount of rhEGF was 14 mg/l under the sub-optimized condition.