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      • Characterization of genes controlling ginsenoside biosynthesis and application to metabolic engineering in Panax ginseng

        한정연 강원대학교 대학원 2008 국내박사

        RANK : 248655

        인삼 (Panax ginseng)은 예로부터 건강을 증진시키는 약재로 가장 널리 알려진 약용식물이다. 인삼 뿌리에는 트리터페노이드 사포닌이라고 불리는 진세노사이드가 함유되어 있는데 이는 인삼 생리활성 성분을 대표하는 이차대사 산물이다. 인삼 사포닌은 메발론산으로부터 이스프레노이드 생합성 사이클을 거친다. 스쿠알렌 에폭시다제는 스쿠알렌을 옥시도스쿠알렌으로 바꾸게 하는데 이과정으로부터 사포닌 및 식물스테롤의 생합성과정이 분지된다. 한편 인삼 진세노사이드의 생합성에 결정적으로 관여하는 옥시도스쿠알렌 사이클라제는 담마란다이올 II 합성 유전자이며 이로부터 담마린다이올이라는 인삼 사포닌의 전형적인 골격이 만들어진다. 본 학위논문에서는 스쿠알렌 에폭시다제와 담마란다이올 합성 유전자를 분리하고 기능을 규명하였다. 또한 3국의 삼 (wild-grown P. ginseng, P. quinquefolium, 및 P. japonicum)으로부터 부정근을 유도하고 증식하기 위한 배양조건 개발하였고 특히 메틸 자스몬 산을 처리하였을 경우 인삼 진세노사이드 생합성에 관여하는 유전자의 발현을 비교하였다. 이 결과 스쿠알렌 에폭시다제(PgSE1)는 1,609-bp로 된 유전자이며 59.1 kDa 아미노산으로 구성되어 있었다. 인삼 진세노사이드 합성 전구물질 및 메틸 자스몬산을 처리한 경우 PgSE1 mRNA의 발현이 증가함을 확인하였으며 아울러 진세노사이드 생합성이 증가되었다. 스쿠알렌 에폭시다제를 post-transcriptional gene silancing (RNAi)라는 기법으로 발현을 억제시킨 형질전환 뿌리를 유도한 결과 인삼 진세노사이드의 함량이 50% 줄어들어서 스쿠알렌 에폭시다제는 인삼 진세노사이드 생합성에 중요한 유전자임을 밝혔다. 한편 인삼 진세노사이드의 기본 골격은 담마란다이올이라는 아글리콘인데 이는 옥시도스쿠알렌 사이클라제 일종인 담마란다이올 합성 유전자가 관여한다. 담마란다이올이라고 추정되는 유전자를 인삼의 화아에서 분리한 유전자한 다음, DDS라고 명명하였다. 이 유전자는 화아에서 가장 발현율이 높았다. 메틸 자스몬산 처리시 강하게 DDS발현이 증가되었다. 또한 이 유전자를 이스트뮤탄트 (erg7)에 발현시켰을 경우 이스트에서 담마란다이올 및 하이드록시담마라논이 생성됨을 LC/APCIMS로 확인하였다. 한편 DDS 유전자를 RNA interference (RNAi) 방법을 이용하여 형질전환 인삼을 제작한 결과 형질전환체의 뿌리에 진세노사이드 함량이 84.5%가 감소됨을 확인하였다. 한편 산삼 뿌리로부터 부정근을 유도 하기위한 조건을 조사한 결과 배지에 NH4NO3를 제거해주는 것이 매우 효과적이었으며 이러한 경향은 미국삼 (P. quinquefolium) 및 죽절삼 (P. japonicum)에서도 같은 경향을 보였다. 산삼이 나이가 들수록 부정근 유도율이 현저히 감소 되었다. 산삼의 부정근을 효과적으로 증식시키기 위해서는 부정근 절편을 NH4NO3가 제거된 배지에서 2주간 배양한 후 NH4NO3가 첨가된 배지에서 배양하는 2단계 배양방법을 이용하는 경우 매우 효과적이었다. NH4NO3가 제거된 부정근의 유도를 촉진시키는 조건에서는 사포닌 생합성 유전자의 발현이 높게 나타났으며 진세노사이드 또한 생합성능이 증가되었다. Panax ginseng is one of the most highly regarded of herbal medicines in the Orient, where it has gained an almost magical reputation for being able to maintain the quality of life. Ginseng roots containing tetracyclic triterpenenoid saponins, called to ginsenosides, those are the major effective ingredients in P. ginseng. Mevalonate is the preferential precursor for triterpene biosynthesis. The enzyme squalene synthase catalyzes the first step from the central isoprenoid pathway towards triterpenoid biosynthesis. Squalene synthase catalyzes the reductive condensation of two molecules of FPP to squalene, via the intermediate presqualene diphosphate. Squalene epoxidase catalyzes the conversion of squalene to 2,3(S)-oxidosqualene which is the first oxygenation step in the sterol biosynthetic pathway. Both phytosterols and triterpenes in plants are synthesized from the product of cyclization of 2,3-oxidosqualene. The 2,3-oxidosqualene cyclases compose a family of biocatalysts that convert 2,3-oxidosqualene to polycyclic triterpenes. The step in ginsenoside synthesis involves cyclization of 2,3-oxidosqualene to oleanane and a dammarene-type triterpene skeleton. The first committed step in ginsenoside synthesis is the cyclization of 2,3-oxidosqualene to dammarenediol II by the oxidosqualene cyclase (dammarenediol synthase). In this thesis, two genes such as squalene epoxidase and dammarenediol II synthase were isolated and characterized their functions in thebiosynthesis of ginsenosides in ginseng roots. Moreover, adventitious root culture system in three Panax species (wild-grown P. ginseng, P. quinquefolium, and P. japonicum) were extablished, and expression of the genes involved in triterpene biosynthesis in the ginseng advnetitious roots was analyzed by RT-PCR after treatment with methyl jasmonate. Squalene epoxidase, catalyzes the epoxidation of squalene to 2,3-oxidosqualene, is branch points for the committed step for triterpene and phytosterol biosynthesis. In this thesis, squalene epoxidase gene (PgSE1) was isolated and the role of PgSE1 on the biosynthesis of triterpene and phytosterol was investigated. A ORF cDNA coding PgSE1 was a 1,609-bp with a predicted molecular mass of 59.1 kDa amino acids. Methyl jasmonate treatment resulted in obvious accumulations of PgSE1 mRNA in root compared with the response by the control. Three precursor treatments (mevalonate, farnesol and squalene) resulted in enhanced expression of squalene synthase (PgSS1), squalene epoxidase (PgSE1) and dammarenediol II synthase (PgDDS) but no change in the expression of cycloartenol synthase (PNX). Ginsenoside analysis revealed that squalene treatment was the most effective for accumulation of ginsenoside compared to other two precursor treatments. Post-transcriptional gene silancing (RNAi) of PgSE1 gene in transgenic P. ginseng resulted in silencing of PgSE1 expression, which resulted in reduced ginsenosides accumulation at 50% in roots. These results indicate that expression of PgSE1 is important regulator for the biosynthesis of ginsenosides in P. ginseng. The first committed step in ginsenoside synthesis is the cyclization of 2,3-oxidosqualene to dammarenediol II by the oxidosqualene cyclase (dammarenediol synthase). The expression of dammarenediol synthase gene (DDS) together with the genes involved in ginsenoside biosynthesis (SS, SE, PNX, PNY, PNY2 and PNZ) was analysed. Expression of DDS mRNA was higher in flower buds compared to root, leaf and petiole of ginseng plants. Elicitor (methyl jasmonate) treatment upregulated the expression of DDS mRNA. Ectopic expression of DDS in yeast mutant (erg7) lacking lanosterol synthase resulted in the production of dammarenediol and hydroxydammarenone, which were confirmed by LC/APCIMS. RNA interference (RNAi) of DDS in transgenic P. ginseng resulted in silencing of DDS expression, which leads reduction of ginsenosides production to 84.5% in roots. These results indicate that expression of DDS played a vital role in the biosynthesis of ginsenosides in P. ginseng. Adventitious roots were produced directly from root segments of Panax ginseng seedlings when cultured on an MS solid medium containing 3.0 mg L-1 IBA. Omitting NH4NO3 from this medium greatly enhanced both the frequency of adventitious root formation and the number of roots per explants. This frequency declined markedly with the age of the root, but could be increased through repeated sub-culturing events. A two-step procedure that included NH4NO3-free media for the first two weeks of culture, followed by transfer onto media containing NH4NO3 for another four weeks, greatly improved total fresh weights of these adventitious roots compared with a method of continuous culture over six weeks in media that always contained NH4NO3. Expression of the genes involved in triterpene biosynthesis was analyzed by RT-PCR. Ginsenoside contents were enhanced by the omission of NH4NO3 and were also greatly increased by treatment with methyl jasmonate. Adventitious root culture system in three Panax species (wild-grown P. ginseng, P. quinquefolium, and P. japonicum) was established to analyze their ginsenoside productivity. Adventitious roots were induced directly from segments of seedlings after cultured on MS solid medium containing 3.0 mg/l IBA. Omission of NH4NO3 from the medium greatly enhanced both the frequency of adventitious root formation and number of roots per explants in all the three Panax species. However, elongation of post-induced adventitious roots was enhanced on medium with NH4NO3. Two-step culture protocol: NH4NO3-free medium for first two weeks of culture, followed by NH4NO3 containing medium for further 4 weeks, greatly enhanced the fresh weight increase of adventitious roots in all the three ginseng species. The fresh weight of adventitious roots was high in P. quinquefolium and low in P. ginseng, followed by P. japonicum regardless of the composition of medium. Pattern and content of ginsenosides in adventitious roots differed among the three Panax species. Total ginsenoside content of adventitious roots in P. quinquefolium, P. ginseng, and P. japonicum was 8.03, 15.7 and 1.2 mg/g dry weight, respectively. Among the three speices, adventitious roots in P. quinquefolium produced high amount of ginsenosides. The pattern of ginsenoside fractions between P. ginseng and P. quinquefolium was similar but the amount of ginsenoside differed between the two. While, in P. japonicum, total ginsenoside content was very low and some ginsenosides such as ginsenoside Rb2 and Rf were not detected.

      • 푸드플랜과 연계한 식생활교육의 방향성 연구

        한정연 공주대학교 대학원 2022 국내석사

        RANK : 248639

        As various food problems arise, the public is increasingly interested in healthy food, and the food plan (Food Plan) is being promoted to respond to various food problems at the national level. The food plan is a policy that represents the transition to national agriculture that provides various economic, social, and environmental values that all citizens, including consumers, need, and the food plan is characterized by the expansion of the market in proportion to citizens' interest and response to food-related projects. Citizens' interest and consumer participation are important in revitalizing the food plan, and dietary education should be accompanied by understanding the food plan and practicing a sustainable diet together. Therefore, this study aims to investigate and analyze general consumers' perceptions of food plans and dietary education, derive the directions of dietaryary education linked to the food plan based on differences in consumer perceptions, and use it as basic data. The subjects of the study were 533 adult men and women aged 18 or older nationwide, and the period was conducted from November 01 to November 03, 2021. The statistical analysis of this study was analyzed using the SPSS (ver 21.0) program. In order to classify consumers' food plan awareness level 3, the top 66.7% or higher was divided into the upper group (G1), 66.6%-33.4% was divided into the middle group (G2), and the bottom group (G3) of 33.3%. The upper group G1 (M=3.38±.38) was divided into 213 people, the middle group G2 (M=2.70±.10) was 110 people, and the lower group G3 (M=1.93±.42) was divided into 210. Frequency analysis and technical statistics were used to find out demographic characteristics, dietaryary purchasing behavior, dietaryary perception, food plan-related perception, and dietary education-related perception, and response sample t and IPA analysis were used to analyze the importance and performance of the survey subjects. In addition, ANOVA was used to verify the difference in perception of the food plan recognition level 3 group, Scheffe test was used for post-analysis, and χ² analysis was used to compare and analyze the demographic characteristics, purchase behavior, and dietary education status of the food plan recognition level 3. Finally, a simple regression analysis was conducted to analyze the influence of agricultural policy or the degree of interest in agricultural and rural areas and the degree of interest in dietary education. As a result of the study, in terms of marital status according to the food plan recognition level group, unmarried people have a high proportion of sub-groups and married people have a high proportion of upper groups (P<.05), in the lowest age group, 18-29 years old and in the highest age group, 50 years old or older are high in the upper group, and in the middle age group, 30-39 years old and 40-49 years old are high in the lower group (P<.05). As a result of the consumer's food plan perception survey, consumers had low overall perception (M=2.67) in five items related to food plans, and recognized them in the order of local food, sustainable diet, public functions and values in agriculture and rural areas, basic food rights, and food plans. All five items related to the food plan according to the food plan recognition level group were significant (p<.001) It was found that the higher the perception related to the food plan, the higher the perception in all items related to the food plan. In addition, it can be seen that the higher the level of food plan awareness, the higher the interest in agricultural policy or agricultural and rural issues. As a result of the consumer's dietary behavior survey, supermarkets showed a very high rate of purchasing agricultural and livestock processed foods, and HMR purchasing rates were the highest in online purchasing foods. The higher the perception of food plans, the higher the perception of the importance of eco-friendly food or animal welfare food and the importance of brand when purchasing agricultural and livestock products (p<.001). In addition, the higher the perception of food plans, the higher the recognition of the importance of cooking food directly (p<.01), the higher the degree of satisfaction with the current diet (p<.01), and the higher the degree of interest in the food production process (p<.001). As a result of analyzing the importance and performance of consumers on sustainable diet, the overall average of consumers' importance on sustainable diet was 3.62 and the overall average of execution was 3.53. It was confirmed that consumers' importance and performance on sustainable eating was recognized in the order of purchasing safe food, purchasing seasonal food materials, purchasing domestic agricultural products, participating in reducing food waste, purchasing eco-friendly food, purchasing local food, and purchasing traditional food. As a result of a survey on consumers' perception of dietary education, it can be confirmed that consumers' willingness to participate in dietary education is higher, and the higher the perception of food plans, the higher the willingness to participate (P<.001). Consumers were found to be less interested in dietary education (M=3.93) than in dietary education (M=3.83). The overall score of consumers' perception of the importance of food plan dietary education was high (M=3.84), and consumers recognized the contents of food plan dietary education in the order of safe food education, food waste reduction education, ecological environment education, cooking class using local ingredients, agriculture and rural food culture experience. The higher the perception related to food plans, the more important the content of food plan dietary education was. Consumers are more interested in dietary education than in agricultural policy and agricultural and rural issues, and consumers are more interested in agricultural policy and agricultural and rural issues (p<.001). Through these results, it was found that consumers had a very low perception of food plans, and the difference in consumers' perception of food plans was verified. It was confirmed that the higher the level of awareness related to food plans, the higher the interest and awareness of agriculture, rural areas, sustainable diet, and dietary education, and the more practical they are. Therefore, an alternative is needed to plan according to the characteristics and perceptions of consumers in order to improve food plan awareness through dietary education so that they can understand the food plan and practice a sustainable diet together.

      • 대학생의 문화적 자기관 유형과 자기통제력이 주관적 안녕감에 미치는 영향

        한정연 숙명여자대학교 대학원 2008 국내석사

        RANK : 248639

        The report that the overall Korean university students' well-being is relatively lower than that of other countries' raises a question about the present state of Korean students' well-being and related factors. The subjective well-being means the evaluation of an individual's life, and the evaluation includes both the cognitive factors which evaluate the life satisfaction and emotional factors about positive- or negative emotion. The purpose of this study was to find out the effects of independent and interdependent self-construal types and self-control on the university students' well-being. To verify this purpose a questionnaire using indices of cultural self-construal, self-control and subjective well-being for the subjects of 300 university students was conducted. Four groups were formed on the basis of the medians of independent self-construal and interdependent self-construal which are cultural self-construal subtypes, and then differences among the groups in their subjective well-being according to the relative level of self-construal types were examined using ANOVA. The subjective well-being in the groups of high-independent and high-dependent self-construals was the highest, whereas that in the groups of low-independent and low-dependent was the lowest. In addition the analysis of the effects of each cultural self-construal type on the subjective well-being using the standard polynomial regression method revealed that interdependent self-construal increases the positive emotion and life satisfaction, and decreases the negative emotion in the life, but the independent self-construal did not affect the positive emotion significantly and increases the negative emotion and life satisfaction. The analysis of the effects of the self-control on the subjective well-being using the standard linear regression method revealed that the self-control increased the positive emotion and life satisfaction of the subjective well-being and decreased the negative emotion. Finally, the Stepwise Multiple regression analysis to identify the most affecting factor on the subjective well-being among cultural self-construal types and self-control showed that the self-control forecasted the most the subjective well-being at overall level. These results implicate the effects of the cultural self-construal types, each cultural self-construal and self-control according to relative level on the subjective well-being. Based on these results of the study were discussed the implication of effects of the cultural self-construal types and self-control on the subjective well-being, limits of this study and recommendations for further studies. 우리나라 대학생들이 다른 연령대 구성원보다 안녕감 혹은 삶의 만족 수준이 낮으며 다른 나라의 대학생들에 비해서도 상대적으로 낮은 주관적 안녕감을 나타낸다는 보고는 우리나라 대학생들의 주관적 안녕의 현황과 관련 요인에 대한 의문을 제기한다. 주관적 안녕감이란 개인의 삶에 대한 평가를 뜻하는 것으로 이러한 평가는 삶에 대한 만족을 판단하는 인지적 요소와 긍정 정서 또는 부정 정서에 대한 정서적 요소를 모두 포함하고 있다. 이에 본 연구는 문화적 자기관 유형과 자기통제력이 대학생의 주관적 안녕감에 미치는 영향을 살펴보기 위해 실시되었다. 본 연구의 목적을 확인하기 위해 대학생 300명을 대상으로 자기관 척도, 자기통제력 척도, 주관적 안녕감 척도를 사용하여 설문을 실시하였다. 문화적 자기관의 하위 유형인 독립적 자기관과 상호의존적 자기관의 중앙치를 기준으로 상하로 분류한 네 집단을 구성한 뒤 ANOVA를 사용하여 자기관 유형의 상대적 수준에 따른 집단 간에 주관적 안녕감에 차이가 있는지를 살펴보았다. 고독립-고의존 자기관 집단의 주관적 안녕감이 가장 높았으며 저독립-저의존 자기관 집단의 주관적 안녕감이 가장 낮은 것으로 나타났다. 또한 문화적 자기관 유형의 각각이 주관적 안녕감에 미치는 영향을 알아보기 위하여 실시한 표준 중다 회귀 방법으로 분석한 결과, 상호의존적 자기관은 생활에서의 긍정 정서와 삶 만족은 증가시키고 부정 정서는 감소시키는 것으로 나타났으나 독립적 자기관은 긍정 정서에는 유의미한 영향을 주지 않고 부정 정서를 증가시키며 삶 만족은 증가시키는 것으로 나타났다. 자기통제력이 주관적 안녕감에 미치는 영향을 알아보기 위해 표준 회귀 방법으로 분석한 결과, 자기통제력은 주관적 안녕감의 긍정 정서와 삶 만족은 증가시키고 부정 정서는 감소시키는 것으로 나타났다. 마지막으로, 문화적 자기관 하위 유형과 자기통제력 중 주관적 안녕감에 가장 큰 영향을 미치는 변인을 알아보기 위하여 단계적 회귀분석을 실시한 결과, 전체적인 수준에서 자기통제력은 주관적 안녕감을 가장 크게 예측하는 변인으로 나타났다. 이러한 결과는 상대적 수준으로 분류된 문화적 자기관 혼합유형에 따른 주관적 안녕감의 차이와 각각의 문화적 자기관 유형, 자기통제력이 주관적 안녕감에 미치는 영향을 시사하는 것이다. 이러한 연구결과를 토대로 문화적 자기관 유형과 자기통제력이 주관적 안녕감에 영향을 주는 점이 시사하는 바와 본 연구의 제한점과 후속연구를 위한 제언에 대해 논의하였다.

      • Decoherence due to gravity : Open quantum system approach

        한정연 서울대학교 대학원 2018 국내석사

        RANK : 248639

        This thesis addresses various sources of fluctuation and discusses how quantum states are affected by these fluctuations based on the semi-classical gravity theory, especially in relation to the macroscopic quantum state. First, due to the time dilation effect of gravity, decoherence with respect to the proper time basis can arise. By taking a different approach from that taken in previous work (Zych et al.), we analyze the case of a constant-acceleration field using the concept of Rindler space-time. Furthermore, given that proper acceleration is proportional to the Unruh temperature, we link it to an experimental proposal of decoherence using the fluctuations in the Unruh temperature. Secondly, in a macroscopic system, the self-localization effect toward the position of the center of mass arises due to fluctuations in the interaction potential. This leads to decoherence with regard to the position basis (the Diósi-Penrose Model). Furthermore, when considering gravity as a classical channel with noise, localization can also be explained by a weak measurement of each mass (the Kafri-Taylor-Milburn Model). Finally, we checked the decoherence effect not merely by examining the quantum characteristics, as is usually done, but with classical fluctuation in the metric field stemming from the dynamics of the field source. In fact, due to the dominance of classical fluctuation, we attempt to analyze this from another perspective. Specifically (In particular), the energy scale between the gravitational wave which represents the classical field and graviton which indicates the quantum field is nearly 3 ∗ 10^37. Hence, the leading effect of gravitational decoherence is followed by fluctuation of the gravitational wave. Furthering this analogy, we obtain additional data pertaining to the kernel in terms of Newtonian interaction in the DP model from the fluctuation in the classical field and clarify what this solution indicates.

      • Aryl hydrocarbon receptor 에 의한 tetratricopeptide repeat domain3 발현 저하

        한정연 성균관대학교 일반대학원 2014 국내석사

        RANK : 248639

        다이옥신 (2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin; TCDD) 과 같은 환경오염물질을 포함하는 담배연기는 폐기종 (emphysema), 만성폐쇄성폐질환 (chronic obstructive pulmonary disease; COPD)과 같은 호흡기질환을 야기시키는 원인 중의 하나이다. Global Burden of Disease Study에 의하면 전세계적으로 COPD는 2020년에 사망원인 3위가 될 것이라고 예측하고 있다. COPD는 기도, 폐실질과 폐 혈관계에서 병리학적 변화가 발생한다. 폐의 각 부위에서 부위에 따른 특이 염증세포에 의한 염증성 변화와, 반복되는 손상과 복구 작용에 의해 기도의 구조적 변화가 발생한다. Tetratricopeptide repeat domain3 (TTC3)는 Akt ubiquitin E3 ligase으로써, Akt의 유비퀴틴-프로테아좀 분해 (ubiquitin-proteasomal degradation)을 유도한다. 본 연구진의 선행 연구에서 담배연기추출물 (Cigarette Smoke Extract, CSE)이 TTC3의 발현을 증가시켜 Akt가 유비퀴틴-프로테아좀 에 의해 분해되어 세포사멸에 관여한다고 보고하였다. 그러나 TTC3의 조절작용에 대해서는 아직 명확히 밝혀지지 않았다. Aryl Hydrocarbon Receptor (AhR)는 basic Helix–Loop–Helix bHLH - Per-ARNT-Sim (PAS) family 의 멤버로서 Polycyclic Aromatic Hydrocarbons (PAH), 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD) 등에 의해 활성화되어 xenobiotic metabolism에 중요한 역할을 수행한다. 비록, 담배연기 속에 AhR을 활성화 시키는 다수의 외인성화합물질을 함유하고 있으나, AhR이 CSE에 의한 활성을 억제한다는 연구보고가 있다. 본 연구진은 AhR이 CSE에 의해 발현된 TTC3의 조절작용에 어떠한 영향을 미치는 지를 확인하기 위해 실험을 진행하였다. 정상인간폐섬유화모세포 (Normal human lung fibroblasts)에서 AhR 발현억제가 TTC3의 발현을 유도하고, 반면에 AhR 과발현에 의해 TTC3의 발현이 감소하는 것을 확인하였다. Chromatin Immunoprecipitation (ChIP) assay를 통해 CSE에 의해 TTC3 프로모터 부위의 AhR 결합이 추정되는 부위와의 결합이 감소를 확인하였다. 또한, AhR repressor인 AhRR을 과발현시켜 CSE에 의해 TTC3의 발현유도가 증진됨을 확인하였고, 반대로 AhRR의 발현저하에 의해 CSE에 의해 유도된 TTC3의 발현이 감소하는 것을 확인하였다. 게다가, AhR의 내인성 활성물질인 6-formylindolo[3,2-b]carbazole (FICZ), 2-(1H-Indol-3-ylcarbonyl)-4-thiazolecarboxylic acid methyl ester (ITE) 와 L-Kynurenic acid (Kyn)에 의해 CSE에 의한 TTC3의 발현이 감소 하는 것을 확인하였다. 이러한 연구 결과를 토대로 본연구진은 AhR이 CSE에 의해 유도된 TTC3의 발현을 억제할 수 있음을 제시한다. Backgrounds: Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) is mostly caused by cigarette smoking, and expected to be the third leading cause of death worldwide by 2020. COPD is pathologically characterized by emphysema and chronic airway inflammation. Tetratricopeptide repeat domain3 (TTC3) is an Akt ubiquitin E3 ligase to ubiquitinate Akt and induce its proteasomal degradation. In the previous study, cigarette smoke extract (CSE) induced TTC3 expression, leading to Akt ubiquitination and degradation and eventually cell death. Even with clear relationship between cigarette smoking and TTC3 induction, however, a regulatory mechanism for TTC3 induction remains unknown. Aryl hydrocarbon receptor (AhR), a member of basic helix–loop–helix Per-ARNT-Sim (bHLH-PAS) family, plays a key role for induction of enzymes to metabolize xenobiotics including polycyclic aromatic hydrocarbon (PAH) and dioxin. Even though cigarette smoke contains xenobiotics to activate AhR, AhR was also reported to play a repressive role in cigarette smoke-exposed cells. Aim: I tried to reveal involvement of AhR signaling in TTC3 regulation upon CSE exposure in this study. Results: In normal human lung fibroblasts, AhR knockdown augmented CSE-induced TTC3 expression, while AhR overexpression prevented TTC3 induction. In chromatin immunoprecipitation assay, CSE exposure reduced AhR binding to the putative AhR binding sites that are located upstream of TTC3 gene. When AhR repressor (AhRR) was overexpressed, CSE-mediated TTC3 induction was enhanced. Oppositely, AhRR knockdown suppressed CSE-induced TTC3 expression. In addition, all the tested AhR endogenous ligands (6-formylindolo[3,2-b]carbazole, 2-(1′H-indolo-3′-carbonyl)-thiazole-4-carboxylic acid methyl ester, and kynurenin prevented CSE-mediated TTC3 induction. Conclusion: Taken together, the data suggest that AhR may play a repressive role in CSE-induced TTC3 expression.

      • 심첨부 비후성 심근증과 스트레스성 심근증에서 심전도 소견의 차이

        한정연 조선대학교 2010 국내석사

        RANK : 248639

        목적 심첨부 비후성 심근증과 스트레스성 심근증으로 허혈성 심질환과 비슷한 심전도 이상을 보일 수 있는 대표적인 질환으로 T파 역전이나 QT 간격의 연장을 일으킬 수 있다. 이로 인해 허혈을 배제하기 위한 불필요한 심도자술의 시행이 증가되고 있다. 이런 질환군의 환자들의 임상적 특징을 분석하고, 환자의 현병력, 계통검사, 임상 증상을 비교하고 심전도 소견의 차이점을 밝힘으로써 이들 질환 사이에 감별진단에 대하여 알아보고자 본 연구를 시행하였다. 방법 2004년 2월부터 2009년 11월까지 조선대학교 병원에 내원하여 심첨부 비후성 심근증과 스트레스성 심근증을 진단 받은 39명을 대상으로 하였다. 결과 심전도에서 QT 간격과 교정 QT 간격은 스트레스성 심근증에서 심첨부 비후성 심근증에 비해 통계학적으로 유의하게 연장되는 소견이 관찰되었으며, T파 역전 곡선의 최저점에서 끝나는 시점까지의 시간은 심첨부 비후성 심근증에서 스트레스성 심근증에 비해 짧았으며 T파 역전은 심첨부 비후성 심근증에서 더 좁고 깊게 나타났으며 깊이와 너비의 비를 측정한 결과 스트레스성 심근증에서 심첨부 비후성 심근증에 비해 크게 측정 되었으며 이는 통계학적으로 유의한 결과를 보였다. 결론 심전도에서 관찰되는 QT 간격이나 교정 QT 간격, T파 역전에 있어서 심첨부 비후성 심근증과 스트레스성 심근증의 두 군 사이에 통계학적으로 유의한 차이가 있으며, 이러한 심전도 소견의 차이를 통해 질환의 예측에 도움을 주리라 사료된다. (Background) Apical hypertrophic cardiomyopathy and stress-induced cardiomyopathy are the nonischemic causes that could show the T-wave inversion and QT prolongation in ECG. There are no established ECG criteria that adequately distinguish between the two. The aim of this study was to evaluate the distinctive ECG findings and to make a diagnosis accurately, thereby to discriminate between the two. (Method) Twenty patients diagnosed apical hypertrophic cardiomyopathy and nineteen patients diagnosed stress-induced cardiomyopathy were included at Chosun University Hospital from February 2004 to November 2009. We have analyzed retrospectively the admission 12-lead ECGs of patients for QT interval, corrected QT, peak to end time of T-wave, T-wave width, depth, and width/depth. The corrected QT was calculated by the Bazett's formula. (Result) The QT and cQT interval in patients with apical hypertrophic cardiomyopathy is more longer patients with than in those with stress-induced cardiomyopathy (p<0.009, p<0.001). Also, peak to end time of T-wave, T-wave width/depth in patients with apical hypertrophic cardiomyopathy is more longer and greater than in those with stress-induced cardiomyopathy (p<0.002, p<0.001). T-wave width and depth with apical hypertophic cardiomyopathy is more narrow and deeper than in those with stress-induced cardiomyopathy(p<0.004, p<0.001). (Conclusion) ECG findings results in a distinctive QT interval, cQT, T-wave amplitude difference that allows discrimination between apical hypertrophic cardiomyopathy and stress-induced cardiomyopathy. Key word : Apical hypertrophic cardiomyopathy, Stress-induced cardiomyopathy, Electrocardiography.

      • 노인부양의식에 미치는 영향요인 연구 : 인천지역 베이비부머들을 중심으로

        한정연 가천대학교 보건복지대학원 2012 국내석사

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        고령 사회의 진전과 저출산 현상의 심화는 예기치 못했던 여러 가지 사회문제를 발생시켰다. 그중에서 빼놓을 수 없는 것이 노인부양(老人扶養)의 문제이다. 노인 수는 계속 늘어나는데 비해, 이들을 부양해야 하는 젊은이들은 줄어듦으로써 노인부양 부담이 빠르게 증가하고 있는 것이다. 우리나라에선 전통적으로 노인들이 노후를 자녀에게 의지해서 살아가는 것이 일반적이었다. 그러나 산업화의 영향으로 핵가족제도가 확산되면서 자녀부양의 전통이 희박해지고 있다. 사회가치관도 급속히 바뀌면서 자녀가 부모부양에 있어서 규범적 책임을 다 해줄 것이라고 기대하는 것은 더 이상 어렵게 되었다. 사회 변화에 맞춰 노인들도 자녀들의 효(孝) 의식에 노후를 기대려는 생각을 스스로 접고 있다. 이런 가운데 경제성장에 따른 국민소득의 향상, 장수(長壽)시대의 도래는 한국인에게 노후생활에 대한 기대감을 높이고 있다. 이처럼 상반된 사회 분위기 속에서, 예비노인이라고 할 수 있는 베이비부머들이 단계적인 은퇴에 들어서고 있다. 우리나라 인구의 14.6%를 차지하는 베이비부머들의 동향은 앞으로 한국사회에 큰 영향을 끼치게 될 것이다. 본 연구는 이러한 관점에 입각하여 중․고령에 접어든 베이비부머들이 부모부양에 대해 어떤 인식을 가지고 있는지, 또 자신들이 노후에 대해 어떻게 생각하는지를 살펴보았다. 이를 위해 인천지역에 거주하는 베이비부머를 대상으로 설문조사를 실시하였다. 설문은 노인부양실태, 노인부양에 대한 인식과 부양의식 수준(경제적 부양, 신체적 부양, 정서적 부양)에 대한 것으로 구성되었으며, 주요 연구 결과는 다음과 같다. 첫째, 베이비붐 세대는 전통적인 가치관을 가지고 있으면서도 그 이데올로기를 고수하지는 않았다. 즉, 부모부양에 대한 책임이 ‘자녀’에게 있음을 인지하면서도, 본인의 노후 생활을 자녀와 함께하는 것에 대해서는 부정적인 입장을 보였다. 둘째, ‘베이비붐 세대’의 부양의식을 경제적, 신체적, 정서적인 측면으로 나누어 살펴본 바, ‘경제적 부양’은 ‘자가 주택 소유 여부’와 ‘가구유형(직계가족 여부)’에 따라서, ‘신체적 부양’은 ‘자가 주택 소유 여부’와 ‘부모의 건강 상태’에 따라서 유의미한 차이를 보이는 것으로 확인되었다. 한편, ‘정서적 부양’에는 ‘부모의 건강 상태’가 의미 있는 영향을 미치고 있었다. 이상의 연구를 통해 다음과 같은 시사점을 얻을 수 있다. ‘베이비붐 세대’에 있어서 노인부양(老人扶養)의 문제는 은퇴와 마찬가지로 경제적인 측면에서 매우 중요한 것이다. 그럼에도 불구하고 아직까지 사회적 관심이 매우 낮은 수준에 머물고 있다. 그 동안 노인부양의 문제는 청소년 계층에 국한되어 다루어져 왔다. 하지만 이는 더 이상 특정 연령층에만 해당되는 문제가 아니다. 노인부양과 관련된 정책의 실효성을 높이기 위해서는 관심의 대상과 연구의 범위를 확장하여 근거를 충분하게 마련할 필요가 있다. Low fertility and an ageing population create social problems. One of the most sensitive social issues is the support of senior citizens. It is difficult to assure that the support of aging parents is a common and normative responsibility of family members. With the improvement of economic and a longer average life expectancy, traditional family values have recently changed. It is expected that this phenomenon is more serious for the Korean Baby-Boom Generation(born from 1955-63) who have experienced dramatic social changes. This study examines the impact factors on the support for the elderly and subsequent public interest of the Baby-Boom Generation. For the empirical analysis, a survey was performed with structured questionnaires about the characteristics, actual conditions for support, and awareness of support for citizens located in the city of Incheon. The awareness of support is divided into: economic support, physical support and emotional support. The main findings are detailed as follows. The Baby-Boom Generation has a negative perception of living with children in their old age, despite the recognition that children have the responsibility to provide old-age support to parents. Secondly, there was little difference between the detailed components; economic support, physical support and emotional support; however, the component that showed the most significance was economic status. The house-owner has a strong awareness of the economic and physical aspects of support. Beyond that, individual factors like type of house(stem family) and parent's health conditions partially affected the Baby-Boom Generation consciousness to support senior citizens. This research help explains the Baby Boomer's behavioral patterns as well as the importance of a diversified study design. Current studies on awareness of support for the elderly have focused on adolescents; however, it is necessary to extend a range of interests to implement an evidence-based policy.

      • 흰쥐에서 HMG-CoA환원효소억제제가 니페디핀 및 그대사체인 디히드로니페디핀의 약물동태에 미치는 영향

        한정연 조선대학교 대학원 2014 국내박사

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        The present study was designed to investigate the effects of HMG-CoA reductase inhibitors (atorvastatin, fluvastatin, pravastatin, simvastatin) on the pharmacokinetics of nifedipine and its active metabolite, dehydronifedipine in rats. Pharmacokinetic parameters of nifedipine and dehydronifedipine in rats were determined after oral and intravenous administration of nifedipine without and with HMG-CoA reductase inhibitors (0.3 or 1.0 mg/kg). The effect of HMG-CoA reductase inhibitors on p-glycoprotein (P-gp) and CYP3A4 activity were also evaluated. Atorvastatin, fluvastatin, pravastatin and simvastatin inhibited CYP3A4 activities with IC50 values of 47.0, 5.4, 14.8 and 3.1 μM, respectively. Simvastatin and fluvastatin (3-10, 100 μM) enhanced the cellular uptake of rhodamine-123 in a concentration-dependent manner, suggesting that P-gp activity was inhibited by fluvastatin and simvastatin. The area under the plasma concentration-time curve (AUC0–∞) and the peak plasma concentration (Cmax) of nifedipine were significantly (p<0.05) increased respectively by fluvastatin (1.0 mg/kg) compared to those of control. The area under the plasma concentration-time curve (AUC0–∞) and the peak plasma concentration (Cmax) of nifedipine were significantly (p<0.05, p<0.01) increased respectively by simvastatin (0.3 and 1.0 mg/kg) compared to those of control. The area under the plasma concentration-time curve (AUC0–∞) and the peak plasma concentration (Cmax) of nifedipine were increased respectively by atovastatin and pravastatin compared to those of control, but these were not singnificant. All pharmacokinetic parameters of nifedipine were not affected by low dosage of HMG-CoA reductase inhibitors (0.3 mg/kg). The total body clearance (CL/F) of nifedipine after oral administration with fluvastatin (1.0 mg/kg) was significantly decreased (by 50.6%) compared to that of control. The total body clearance (CL/F) of nifedipine after oral administration with simvastatin (0.3 and 1.0 mg/kg) was significantly decreased (by 46.9 and 55.7%) compared to that of control. Consequently, the absolute bioavailability (AB) of nifedipine after oral administration with fluvastatin was significantly increased (by 42.4%) compared to that of control. The absolute bioavailability (AB) of nifedipine after oral administration with simvastatin was significantly increased (by 41.1 and 51.9%) compared to that of control. The absolute bioavailability (AB) of nifedipine after oral administration with atovastatin and pravastatin was increased compared to that of control, but this was not significant. The relative bioavailability (RB) of nifedipine was 1.11-to 1.51-fold greater than that of the control by HMG-CoA reductase inhibitors. The area under the plasma concentration-time curve (AUC0–∞) of dehydronifedipine were significantly (p<0.05) increased respectively by fluvastatin and simvastatin (1.0 mg/kg) compared to those of control. The metabolite-parent AUC ratio (MR) of nifedipine with fluvastatin and simvastatin was significantly decreased respectively by 16.0 and 18.4%, suggesting that metabolism of nifedipine in the small intestine and/or liver was inhibited by fluvastatin 1.0 mg/kg) and simvastatin (0.3 and 1.0 mg/kg). After intravenous administration of nifedipine with HMG-CoA-reductase inhibitor, the AUC of nifedipine increased, but was not statistically significant. The CLt and t1/2 values of nifedipine tend to decrease, but was not statistically significant. This suggests that the effects of HMG-CoA-reductase inhibitor on the inhibition of hepatic metabolism of nifedipine via CYP3A4 were almost negligible. In conclusion, the enhanced bioavailability of nifedipine might be mainly due to inhibition of P-gp in the small intestine and CYP3A subfamily-mediated metabolism of nifedipine in the small intestine and/or liver and to reduction of the CL/F of nifedipine by fluvastatin and simvastatin. Since the present study raised awareness of potential drug interactions by concomitant use of nifedipine with HMG-CoA-reductase inhibitors, this result has to be further evaluated for dosage regimen of nifedipine in clinical studies. Keywords: Nifedipine; dehydronifedipine; HMG-CoA reductase inhibitors; pharmacokinetics; bioavailability; AUC0–∞; Cmax ; total body clearance; P-gp; CYP3A subfamily; rats 항콜레스테롤제와 항고혈압치료제인 니페디핀과의 병용투여가 순환기 질환 예방 및 치료를 위해서 처방되는 경우가 많다. 그러므로 이에 대한 상호작용을 연구하고자 흰쥐에 니페디핀 (경구; 10 mg/kg, 정맥; 2.5 mg/kg)과 HMG-CoA환원효소 억제제인 아톨바스타틴 (0.3, 1.0 mg/kg), 프루바스타틴 (0.3, 1.0 mg/kg), 프라바스타틴 (0.3, 1.0 mg/kg)과 심바스타틴 (0.3, 1.0 mg/kg)을 병용 경구 및 정맥 투여한 후 니페디핀 및 그 주요 대사체인 디히드로니페디핀의 약물동태학적 변수들을 대조군과 비교 검토하였다. 그리고 HMG-CoA환원효소 억제제인 아톨바스타틴, 프루바스타틴, 프라바스타틴과 심바스타틴이 cytochromeP450(CYP)3A4활성과 P-glycoprotein(P-gp)의 활성에 미치는 영향도 평가 하였다. 프루바스타틴과 심바스타틴이 CYP3A4활성과 P-gp의 활성을 유의성 있게 억제시켰다. 프루바스타틴 또는 심바스타틴과 각각 병용 투여시 니페디핀의 약물동태학적 변수는 유의성 있게 변화하였다. 대조군에 비해 프루바스타틴 (1.0 mg/kg) 또는 심바스타틴 (0.3, 1.0 mg/kg)과의 병용투여군에서 니페디핀의 혈장농도곡선하면적 (AUC0-∞)과 최고혈중농도 (Cmax)는 각각 유의성 (P < 0.05, P < 0.01) 있게 증가시켰으나, 아톨바스타틴과 프라바스타틴과 병용투여군에서는 증가시켰으나 유의성은 없었다. HMG-CoA환원효소 억제제의 저농도(0.3 mg/kg) 에서는 증가는 시켰으나 유의성은 없었다. 프루바스타틴 또는 심바스타틴(0.3, 1.0 mg/kg)과의 병용투여군에서 니페디핀의 전신클리어런스 (CL/F)는 유의성 (P < 0.05, P < 0.01) 있게 각각 감소되었다. 절대적생체이용률 (AB)도 대조군에 비해 각각 유의성 (P < 0.05) 있게 증가되었다. 프루바스타틴 (1.0 mg/kg) 또는 심바스타틴 (1.0 mg/kg)과 니페디핀을 병용투여한군에서 대조군에 비해 대사체인 디히드로니페디핀의 혈장농도곡선하면적 (AUC0-∞)이 유의성 (P < 0.05) 있게 증가되었다. 그리고 프루바스타틴 또는 심바스타틴과 병용투여군에서 니페디핀의 대사율 (MR)을 유의성 (P < 0.05) 있게 감소시켰다. 정맥투여군에서는 아톨바스타틴, 프루바스타틴, 프라바스타틴과 심바스타틴은 니페디핀의 약동학적 변수에는 거의 영향을 주지 못하였다. 본 연구에서 항콜레스테롤제인 프루바스타틴 또는 심바스타틴을 각각 고혈압치료제인 니페디핀과 병용투여 하였을 때 경구투여된 니페디핀의 생체이용률이 유의성 있게 증가된 것은 프루바스타틴 및 심바스타틴에 의해서 주로 소장에 존재하는 P-gp억제에 의한 흡수증가와 주로 소장과 간장에 존재하는 CYP3A 억제에 의한 니페디핀의 초회통과효과 (대사)감소와 전신클리어런스 감소에 기인한 것으로 사료된다. 항콜레스테롤제인 HMG-CoA환원효소 억제제와 (특히 프루바스타틴과 심바스타틴) 항고혈압치료제인 니페디핀과의 병용투여시 이들의 상호작용을 고려하는 것이 중요하다고 사료 되어진다.

      • 유치원 교사의 직무 및 수업이외의 스트레스와 교육활동간의 관계 연구

        한정연 아주대학교 2008 국내석사

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        본 연구의 목적은 유치원 교사의 직무스트레스와 교육활동 간의 관계와 유치원 교사의 수업이외에 오는 직무스트레스와 교육활동과의 관계를 밝히고자 하였다. 유치원 교사의 직무스트레스를 측정하기 위하여 본 연구자는 본 연구에서는 김지현(1994)이 6개의 요인으로 수정한 도구를 토대로 사용하였다. 유치원 교사의 교육활동을 조사하기 위하여 Sreeffy와 Jones(1980)의 교육활동에 관한 설문지를 유치원 조직에 맞도록 재구성하였다. 본 연구의 대상은 경기도 공·사립유치원 교사 122명이었으며, 수집된 자료는 평균, 표준편차, 일원변량분석, 상관관계분석을 실시하였다. 연구결과는, 첫째, 유치원 교사들의 직무스트레스 정도는 전체 평균점수는 보통수준으로 나타났다. 가장 스트레스가 높게 나타는 것으로는 ‘업무관련 요인’이었으며, 두 번째가 ‘원아들과의 관계’이며, 스트레스를 비교적 적게 느끼는 요인은 ‘개인 관련 요인’이었다. 둘째. 유치원교사의 직무스트레스와 교육활동과의 관계에서 유의한 상관관계를 나타냈다. 요인별로 대부분 높은 역 상관을 나타내어 직무스트레스가 높으면 교육활동의 수준이 떨어짐을 알 수 있었다. 각 요인별로 살펴보면 체벌빈도는 직무스트레스요인들과의 상관관계를 거의 갖고 있지 않고 있으며 직무 스트레스요인 중에서는 수입 요인이 교육활동 요인과의 상관관계에서 낮게 나타났다. 그러나 개인관련 요인과 행정적 지원관련 요인은 교육활동과의 높은 역 상관을 나타냈다. 셋째, 유치원 교사의 수업시간이외에 부담을 느끼는 업무와 교육 활동 간의 관계는 유의미한 차이가 없는 것으로 나타났다. 유치원교사들이 수업이외에 부담을 느끼는 업무를 살펴보면 유치원 교사가 수업이외에 부담을 느끼는 업무를 총 9개의 요인으로 분류하였다. 요인별로는 다음날의 수업준비, 수업활동 평가 및 아동평가기록, 환경정리 및 청소, 등하교 지도, 학부모 면담, 행정적인 사무처리, 교직원회의, 교육계획 및 교구제작, 기타로 나누었다. 그 중 빈도수가 10이하인 항목은 제외하였다. 유치원 교사가 수업이외에 업무 중 가장 부담을 느끼는 요인으로는 학부모 면담(20.5%)이 가장 높게 나타났으며, 그 다음으로는 행정적인 사무처리(19.7%), 수업활동 평가 및 아동평가 기록(18.0%)으로 나타났다. 가장 부담을 적게 느끼는 근무내용은 교직원회의(2.5%)임을 알 수 있다. 이와 같이 본 연구에서는 경기도 공·사립 유치원교사들을 대상으로 이루어졌지만, 공·사립 유치원교사의 직무스트레스의 차이검증, 또는 유치원교사의 직무스트레스 대처방법에 관한 후속 연구가 심층적으로 이루어졌으면 한다.

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