연구논문 : 의약화학 ; 만가닥버섯에서 분리된 hypsiziprenol A의 HepG2 세포주기진행의 저해효과

장종선 ( Jong Sun Chang ),손종근 ( Jong Keun Son ),이호 ( Gao Li ),오은정 ( Eun Jung Oh ),김지영 ( Ji Young Kim ),박선희 ( Sun Hee Park ),배준태 ( Joon Tae Bae ),김현정 ( Hyun Jeong Kim ),이인선 ( In Seon Lee ),김옥미 ( Ok Mi Kim 영남대학교 약품개발연구소 2004 영남대학교 약품개발연구소 연구업적집 Vol.14 No.-

연구논문 : 생명과학 ; 퀴니졸리노카볼린 앙카로이드계인 루테칼핀의 일반신경약리에 관한 연구

장종선 ( Jong Sun Chang ),김대경 ( Da Qing Jin ),박병철 ( Byung Chul Park ),장영동 ( Yurng Dong Jahng ),유봉규 ( Bong Kyu Yu ),최한곤 ( Han Gon Choi ),용철순 ( Chul Soon Yong ),정태천 ( Tae Cheon Jeong ),김정애 ( Jung Ae Kim ) 영남대학교 약품개발연구소 2005 영남대학교 약품개발연구소 연구업적집 Vol.15 No.-

목이버섯 메탄올 추출물이 벤조피렌(B(a)P) 투여한 마우스의 지질과산화 및 간 손상 억제에 미치는 영향

장종선(Jong-Sun Chang),김현정(Hyun-Jeong Kim),배준태(Jun-Tae Bae),박선희(Sun-Hee Park),이승언(Sung-Eun Lee),김옥미(Ok-Mi Kim),이갑랑(Kap-Rang Lee) 한국식품영양과학회 1998 한국식품영양과학회지 Vol.27 No.4

간독성물질인 벤조피렌을 투여한 마우스에서 목이버섯 메탄올 추출물의 지질과산화 및 간 손상 억제에 미치는 영향을 살펴보았다. 벤조피렌 투여로 인한 혈청 ALT와 AST의 활성, 간조직 중의 과산화지질 함량, 시토크롬 P-450 함량, SOD, 카탈라아제 그리고 GSH-Px의 활성이 유의적으로 증가하였다가 목이버섯 메탄올 추출물의 투여시 이들 활성 및 함량이 유의적으로 감소하였다. 반면, 간조직 중의 GSH 함량과 GST 활성은 벤조피렌만 투여한 군에 비해 목이버섯 메탄올 추출물을 투여하였을 경우 그 함량이 다소 증가하였다. 이와 같이 목이버섯 메탄올 추출물은 벤조피렌에 의한 간손상에 대한 보호 효과를 가지는 것으로 사료된다. This study was undertaken to investigate the inhibition effects of Auricularia auricula-judae methanol extract in edible mushroom on lipid peroxidation and liver damage in benzo(a)pyrene(B(a)P)-treated mice. The activities of serum aminotransferase, cytochrome P-450, superoxide dismutase, catalase, glutathione peroxidase and the hepatic content of lipid peroxide after B(a)P-treatment were markedly increased than control but those levels were significantly decreased by the treatment of Auricularia auricula-judae methanol extract. Glutathione S-transferase activity and the hepatic glutathione content were decreased by B(a)P-treatment than control, but those were also inhibited by the treatment of Auricularia auricula-judae methanol extract. These results suggest that Auricularia auricula-judae methanol extract have a protective effect on liver damage by B(a)P.

노루궁뎅이 버섯 추출물의 벤조피렌 유발 간 독성에 대한 보호효과

박선희(Sun-Hee Park),김지영(Ji-Young Kim),장종선(Jong-Sun Chang),오은정(Eun-Jung Oh),김옥미(Ok-Mi Kim),배준태(Jun-Tae Bae),김현정(Hyun-Jeong Kim),하대중(Dae-Joong Hae),이갑랑(Kap-Rang Lee) 한국식품영양과학회 2001 한국식품영양과학회지 Vol.30 No.5

노루궁뎅이 버섯의 간 손상 억제 작용을 확인하고자, B(a)P 투여로 간 독성이 유발된 마우스에서 과산화지질의 생성, 항산화에 관련된 효소 및 물질의 변화를 살펴 본 결과, B(a)P 투여로 인해 혈청 ALT와 AST의 활성, 간조직 중의 과산화지질 함량, cytochrome P450 함량, SOD, catalase 그리고 GSH-Px의 활성이 유의적으로 증가하였고, GSH 함량과 GST 활성은 감소하였다. 반면 노루궁뎅이 버섯 메탄올 추출물의 전처리로 인해 ALT와 AST의 활성, 과산화지질 함량, cytochrome P450 함량 그리고 항산화 효소인 SOD, catalase 및 GSH-Px의 활성이 유의적으로 감소하였으며 GSH 함량과 GST 활성은 증가하였다. 그리고 마우스의 간조직에서 cytochrome P450 1A1 isozyme의 단백질 발현을 western blotting으로 조사한 결과, B(a)P 투여로 대조군에 비해 현저히 증가한 단백질 발현이 노루궁뎅이 버섯 메탄올 추출물을 투여함으로써 감소됨을 확인하였다. 이상의 결과로 노루궁뎅이 버섯 메탄올 추출물은 생체 내에서 자유기로 인해 야기되는 간장의 산화적 손상을 효과적으로 억제할 수 있을 것으로 사료된다. The protective effect of Hericium erinaceus methanol extract was investigated on benzo(a)pyrene (B(a)P) induced hepatotoxicity in mice. Hericium erinaceus extract was intraperitioneally injected once a day for successive 5 days, followed by treatment with B(a)P on the fifth day. The elevated activities of serum aminotransferase and hepatic cytochrome P-450 by B(a)P were decreased by pretreatment with Hericium erinaceus extract. Moreover, hepatic lipid peroxide content and glutathione S-transferase activity increased by B(a)P were significantly decreased, but depletion of glutathione content induced by B(a)P was prevented by Hericium erinaceus extract. In addition, the increased activities of superoxide dismutase, catalase and glutathione peroxidase after B(a)P-treatment were decreased. Immunoblott analysis of hepatic microsomes showed that methanol extract of Hericium erinaceus suppressed protein level of the cytochrome P-450 1A1 increased by B(a)P. These results suggest that Hericium erinaceus extract may protect liver from damage induced by B(a)P.

헛개나무 잎 추출물의 벤조피렌 유발 간 독성에 대한 보호효과

박선희(Sun-Hee Park),장은영(Eun-Young Chang),장종선(Jong-Sun Chang),윤경영(Kyung-Young Yoon) 한국식품영양과학회 2009 한국식품영양과학회지 Vol.38 No.5

헛개나무 잎 추출물의 간 손상 억제 작용을 확인하고자, B(α)P 투여로 간 독성이 유발된 마우스에서 과산화지질의 생성 및 관련 효소의 활성 변화를 살펴본 결과 B(α)P 투여로 인해 혈청 ALT와 AST의 활성, 간 조직 중의 과산화지질 함량, cytochrome P450 함량, SOD, catalase 그리고 GSH-Px의 활성이 유의적으로 증가하였고(p<0.05), GSH 함량과 GST 활성은 감소하였다. 반면 헛개나무 잎 메탄올 추출물의 전 처리로 인해 ALT와 AST의 활성, 과산화지질 함량, cytochrome P450 함량 그리고 항산화 효소인 SOD, catalase 및 GSH-Px의 활성이 유의적으로 감소하였으며(p<0.05), GSH 함량과 GST 활성은 증가하였다. 이상의 결과로 헛개나무 잎 메탄올 추출물은 생체 내에서 자유기로 인해 야기되는 간장의 산화적 손상을 효과적으로 억제할 수 있을 것으로 사료된다. This study was carried out to investigate the protective effect of Hovenia dulcis Thumb leaves extract on liver damage in benzo(α)pyrene (B(α)P)-treated mice. Hovenia dulcis Thumb leaves methanol extract was intraperitoneally injected once daily for 5 successive days, followed by treatment with B(α)p. The elevated activities of serum aminotransferase and hepatic cytochrome P450 by B(α)p were decreased by pretreatment with Hovenia dulcis Thumb leaves extract. Hovenia dulcis Thumb leaves extract also significantly prevented the elevation of hepatic malondialdehyde content and depletion of glutathione content induced by B(α)P. In addition, the increased activities of superoxide dismutase, catalase and glutathione peroxidase after B(α)P-treatment were decreased. On the other hand, glutathione S-transferase activity was increased by pretreatment with Hovenia dulcis Thumb leaves extract. These results suggest that Hovenia dulcis Thumb leaves extract have a protective effect on liver damage by B(α)P through the mechanisms of decreasing lipid peroxide and activities of free radical generating enzymes.

노루궁뎅이 버섯 추출물이 암세포의 성장과 세포주기 조절단백질에 미치는 영향

박선희(Sun-Hee Park),장종선(Jong-Sun Chang),이갑랑(Kap-Rang Lee) 한국식품영양과학회 2003 한국식품영양과학회지 Vol.32 No.6

본 연구에서는 항암효과를 가진 성분을 포함하여 여러 다양한 생리활성 물질을 함유하고 있을 것으로 기대되는 노루궁뎅이 버섯(Hericium erinaceus)을 이용하여 암세포 성장저해효과와 세포주기 조절자인 cyclin 단백질의 발현에 미치는 영향을 조사하였다. 노루궁뎅이 버섯의 메탄올 추출물과 그 분획물들의 사람의 암세포주인 HT29와 HepG2에 대한 성장 저해 효과를 MTT assay로 검토한 결과 노루궁뎅이 버섯의 메탄올 추출물과 헥산, 클로로포름 그리고 에틸아세테이트 분획물들이 높은 암세포 성장 저해 효과를 나타내었으며 농도 의존적인 경향을 보였다. 그러나 사람의 정상 간세포인 Chang cell에서는 세포독성이 나타나지 않았다. 그리고 노루궁뎅이 버섯 메탄올 추출물이 간암 세포주인 HepG2의 cyclin 단백질 발현에 미치는 영향을 조사한 결과 노루궁뎅이 버섯메탄올 추출물이 cyclin A와 D 단백질 발현을 다소 감소시켰으며 특히 cyclin B1에 대한 효과가 더욱 크게 나타나 1 mg/mL 농도에서 48시간 처리하였을 때 대조군에 비해 30% 정도까지 단백질 발현이 감소하였다. 이러한 결과로 노루궁뎅이버섯은 세포주기 중 G2기에서 M기로의 전환에 관여하는 cyclin B1 단백질의 발현을 크게 감소시키므로 세포주기 진행을 차단시켜 간암세포의 증식을 억제시키는 것으로 사료된다. We investigated inhibitory effects of Hericium erinaceus on the growth of cancer cells and the expression of cell cycle regulators, cyclins. Anticancer effects of Hericium erinaceus extract and fractions against cancer cell lines including HepG2 and HT29 were investigated. The methanol extract, the hexane fraction, the chloroform fraction and the ethylacetate fraction of Hericium erinaceus inhibited growth of cancer cells but they had no effect on the cytotoxicity of normal human liver cells under the same conditions. As shown by western blot analysis, the expression of cyclin B1 known as cell cycle regulator was markedly decreased after treatment with Hericium erinaceus extract in HepG2 cells. These results suggest that antiproliferative effect of Hericium erinaceus extract is associated with markedly decreased expression of cyclin B1.

연구논문 : 생명과학 ; 캅사이신에 의한 MBT-2 방광암세포에서의 활성산소종 생성의 감소와 아포토시스 유도에 관한 연구

이지선 ( Ji Seon Lee ),장종선 ( Jong Sun Chang ),이지열 ( Ji Youl Lee ),김정애 ( Jung Ae Kim ) 영남대학교 약품개발연구소 2005 영남대학교 약품개발연구소 연구업적집 Vol.15 No.-

HepG2세포에서 향버섯 추출물이 세포주기 조절단백질에 미치는 영향

배준태(Jun-Tae Bae),장종선(Jong-Sun Chang),이갑랑(Kap-Rang Lee) 한국식품영양과학회 2002 한국식품영양과학회지 Vol.31 No.2

본 연구는 사람의 간암세포인 HepG2 세포를 대상으로 강력한 암 예방 효과물질을 함유하고 있을 것으로 추측되는 향버섯 메탄올 추출물의 암세포 성장 저해 효과를 검토하고 또한 암세포 성장 억제 효과의 분자생물학적 기전을 파악하기 위하여 암세포주의 세포주기 조절인자들의 발현을 조사하였다. 향버섯 메탄올 추출물의 HepG2 세포에 대한 성장 저해 효과를 MTT assay로 검토한 결과 높은 암세포 성장 저해 효과를 나타내었으며 사람의 정상 간세포인 Chang cell에서는 세포독성이 나타나지 않았다. 또한 향버섯 추출물의 작용으로 HepG2 세포에서 cyclin A와 D1 단백질의 발현이 억제되었으며 cyclin B1 단백질의 발현은 증가하는 경향을 나타내었다. 그리고 암 억제 단백질인 p53의 발현은 전반적으로 증가되었으며, 이와 대조적으로 PCNA 단백질은 감소하는 경향을 나타내었고 세포분열 억제 단백질 p27의 발현은 증가하는 경향을 나타내었다. 이러한 결과로 볼 때 향버섯 메탄올 추출물은 간암세포의 세포주기 중 G1기에서 S기로의 진행을 조절하는 인자인 cyclin A와 cyclin D1 발현을 억제시키고 p53, p27 단백질을 활성화 시킴과 동시에 PCNA 작용을 억제함으로써 세포주기 중 G1/S기 차단을 유도하여 암세포 증식을 억제한 것으로 추정된다. We investigated the effect of Sarcodon aspratus extract on expression of cell cycle regulators. Methanol extract of Sarcodon aspratus showed a growth suppression on HepG2. As shown by western blot analysis, the expressions of cyclin A and D1 known as cell cycle regulators were decreased after treatment of Sarcodon aspratus extract. On the other hand, the expression of cyclin B1 was increased in the presence of Sarcodon aspratus extract. Furthermore, the expression of p53, a tumor supressor gene, and p27, a cell cycle dependent protein kinase inhibitor, were increased, whereas the expression of PCNA was decreased. In conclusion, our study suggests that growth inhibitory effect of Sardodon aspratus methanol extract on HepG2 is induced by cell cycle arrest in the G1 phase caused by decrease in cyclin A, D1 expressions and increases in p53, p27 expression.

벤조피렌을 투여한 마우스에서 향버섯 추출물의 간 손상 예방 효과

배준태(Jun-Tae Bae),장종선(Jong-Sun Chang),박준홍(Jun-Hong Park),박선희(Sun-Hee Park),김지영(Ji-Young Kim),오은정(Eun-Jung Oh),김현정(Hyun-Jeong Kim),김옥미(Ok-Mi Kim),이별나(Byul-Ra Lee),이갑랑(Kap-Rang Lee) 한국식품영양과학회 2001 한국식품영양과학회지 Vol.30 No.2

향버섯 메탄올 추출물이 간독성 물질인 B(a)P을 투여한 마우스에서 간 손상 억제 및 cytochrome P 450 1A1 발현에 미치는 영향을 살펴보았다. B(a)P투여로 인한 혈청 ALT와 AST의 활성, 간조직 중의 lipid peroxide 함량, cytochrome P-450 함량, SOD, catalase 그리고 GSH-Px의 활성이 유의적으로 증가하였으며 향버섯 메탄올 추출물의 투여시 이들 활성 및 함량이 유의적으로 감소하였다. 반면, 간조직 중의 GSH 함량과 GST 활성은 B(a)P만 투여한 군에 비해 향버섯메탄올 추출물을 투여시 다소 증가하였다. 또한 immuno blotting 결과로부터 B(a)P 투여에 의해 현저히 증가되었던 cytochrome P-450 1A1 isozyme 단백질 함량이 향버섯 메탄올추출물의 투여로 감소됨을 확인하였다. 이와 같은 결과로부터 향버섯 메탄올 추출물은 B(a)P에 의한 간 손상에 대한 보호 및 예방 효과를 가지는 것으로 사료된다. To investigate the effect of Sarcodon aspratus methanol extract on liver damage in benzo(a)pyrene (B(a)P)-treated mice, mice were divided into 4 groups of control, B(a)P, Sarcodon aspratus methanol extract and Sarcodon aspratus methanol extract-B(a)P. The activities of serum aminotransferase, cytochrome P-450 and hepatic content of lipid peroxide after B(a)P-treatment were increased than control, but those levels were significantly decreased by the treatment of Sarcodon aspratus methanol extract. On the other hand, the hepatic glutathione content and glutathione S-transferase activity were increased by the treatment of Sarcodon aspratus methanol extract. Also the activities of superoxide dismutase, catalase and glutathione peroxidase were decreased by the treatment of Sarcodon aspratus methanol extract. In addition cytochrome P-450 1A1 isozyme protein level, which was remarkably increased by B(a)P treatment from results of immuno blotting, was decreased by the treatment with methanol extract of Sarcodon aspratus. These results suggest that Sarcodon aspratus methanol extract have protective effect on liver damage by decreasing lipid peroxide and activities of free radical generating enzymes.

Brevibacterium lactofermentum에서 ddh 유전자의 Overexpression이 $_L-Lysine$ 생산에 미치는 영향

박선희,김옥미,김현정,배준태,장종선,이갑랑,Park, Sun-Hee,Kim, Ok-Mi,Kim, Hyun-Jeong,Bae, Jun-Tae,Chang, Jong-Sun,Lee, Kap-Rang 한국식품과학회 1999 한국식품과학회지 Vol.31 No.1

$_L-Lysine$ 발효산업에 이용되고 있는 B. lactofermentum의 L-lysine 생합성은 succinylase 경로와 dehydrogenase 경로를 통하여 일어난다. 특히 lysine 생산 균주에 부가적으로 존재하는 dehydrogenase 경로는 lysine 생합성에 있어서 필수적인 경로로 작용하며 이때 meso-DAP-dehydrogenase (DDH)를 암호화하는 ddh gene이 관여한다. 그러므로 B. lactofermentum의 lysine 발효에 있어서 ddh gene의 over expression에 의한 lysine 생성량을 비교 조사하기 위하여, shuttle vector pEB1 및 pJC1으로 ddh gene을 삽입하여 재조합 plasmid pRK1 및 pRK31을 구축하였고 이를 B. lactofermentum으로 도입시켜 DDH 활성을 측정한 결과 pRK1을 함유한 균주는 대조균주보다 7배 정도, pRK31을 함유한 균주는 14배 정도 증가하였다. 또한 Shuttle vector를 함유한 대조균주와 재조합 plasmid를 함유한 균주간의 성장 비교에서는 서로 비슷한 수준을 나타내었으며 플라스크 배양에서 lysine 생성량의 비교 분석에서는 재조합 plasmid를 함유한 균주의 경우 48시간 이후부터 대조균주보다 lysine 생성량이 증가하기 시작하여 72시간때에는 최대치를 나타내었으며 그 이후는 오히려 감소하였다. 최대치를 나타낸 72시간 때의 lysine 생성량은 대조균주가 4.38g/L를 나타내었으며 pRK1 및 pRK31을 함유한 균주는 각각 5.34g/L 및 5.21 g/L이었다. 이상의 결과로 미루어 볼 때 B. lactofermentum내에서 ddh gene의 증폭에 의한 lysine 생성량은 pRK1 및 pRK31에서 대조균주보다 각각 20% 및 19% 증가하였다. 또한 발효조 배양에서의 lysine 생성량도 재조합 균주가 대조균주보다 23% 정도 증가를 나타내어 B. lactofermentum에서 ddh gene의 증폭으로 lysine 생성량이 증가하였음을 확인하였다. The ddh gene encoding meso-DAP-dehydrogenase (DDH) involved in the dehydrogenase pathway is essential for high-level lysine production in Brevibacterium lactofermentum. To investigate its influence on lysine production by overexpression of the ddh gene in a lysine-producing B. lactofermentum, recombinant plasmid pRK1 and pRK31 containing the ddh gene of B. lactofermentum were constructed and they were introduced into B. lactofermentum by electroporation. Multiple copies of pRK1 and pRK31 caused 7-fold and 14-fold increase of DDH activity in B. lactofermentum cell extracts, respectively. As determined in shake flask fermentation, lysine production of B. lactofermentum harboring pRK1 or pRK31 was 22% or 19% higher than that of the control, respectively.