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이병재,Lee, Byeong-Jae 대한산업보건협회 2004 산업보건 Vol.191 No.-
직원들의 창의성과 적극적 참여의식을 유도하고 조직 내에서 유연한 개선활동을 전개해 나가기 위해 도입한 2003년 제안활동에서 최우수 제안으로 채택된 제안 전문을 싣는다. 비용의 숫자는 협회 내부방침으로 표기하지 않기로 하였으나 양해해 주시기 바란다.
Aspergillus nidulans의 tRNA 유전자의 구성과 발현에 관한 연구 2 차원 전개폴리아크릴 아마이드젤 전기영동에 의한 A . nidulans 의 특정 tRNA의 분리
김준,이병재,강현삼 ( Joon Kim,Byeong Jae Lee,Hyen Sam Kang ) 생화학분자생물학회 1983 BMB Reports Vol.16 No.4
tRNAs from fungus Aspergillus nidulans were purified by DEAE-cellulose column chromatography and polyacrylamide gel electrophoresis. These tRNAs were separated into about 40 tRNA spots on two-dimensional polyacrylamide gel electropheresis. Each isolated tRNA was eluted, aminoacylated with ³H-labeled amino acid by aminoacyltRNA synthetase which was prepared through ammonium sulfate fractionation, DEAE*cellulose and Sephadex G-50 column chromatography. We separated 4 kinds of g specific tRNAs which were going to be used as probes to find out specific tRNA clones from the total tRNA gene clones of Aspergillus. We report here that those are tRNA_(Lys), tRNA^(Gly), tRNA^(Val), and tRNA^(Leu)
김준,이병재,강현삼,Kim, Joon,Lee, Byeong-Jae,Kang, Hyen-Sam 생화학분자생물학회 1983 한국생화학회지 Vol.16 No.4
Aspergillus nidulans의 total tRNA로 부터 4종류의 특정 tRNA를 분리하였다. 모든 tRNA종류를 phenol로 추출한 후 DEAE-cellulose column chromatography로 정제한 tRNA를 2차원 polyacrylamide로 전기영동하여 40여개의 spot로 분리하고 이들을 gel로부터 유출시켰다. 그리고 특청한 tRNA종류를 규명하기 위하여 Aspergillus nidulans에서 황산암모늄분획, DEAE-cellulose column, Sephadex G-50 column.를 사용하여 이들 각 tRNA를 aminoacylation시키고 특정한 $^3H$으로 표지된 아미노산을 받아들이는 tRNA를 분석하여 $tRNA^{Lya}$, $tRNA^{Gly}$, $tRNA^{Val}$를 분리 동정하였다. tRNAs from fungus Aspergillus nidulans were purified by DEAE-cellulose column chromatography and polyacrylamide gel electrophoresis. These tRNAs were separated into about 40 tRNA spots on two-dimensional polyacrylamide gel electropheresis. Each isolated tRNA was eluted, aminoacylated with $^3{H}$-labeled amino acid by aminoacyl-tRNA synthetase which was prepared through ammonium sulfate fractionation, DEAE-cellulose and Sephadex G-50 column chromatography. We separated 4 kinds of 8 specific tRNAs which were going to be used as probes to find out specific tRNA clones from the total tRNA gene clones of Aspergillus. We report here that those are $tRNA^{Lya}$, $tRNA^{Gly}$, $tRNA^{Val}$, and $tRNA^{Leu}$.
김영준,이병재,강현삼,Kim, Young-Joon,Lee, Byeong-Jae,Kang, Hyen-Sam 생화학분자생물학회 1986 한국생화학회지 Vol.19 No.2
하등 진핵세포인 Aspergillus nidulans에서의 tRNA 유전자의 구성과 발현을 알아보기 위하여, 먼저 Aspergillus의 균사체로부터 hot phenol 방법을 수정하여 전체의 tRNA들을 추출하였으며, DEAE-cellulose column chromatography와 2차원 전개 polyacrylamide gel 전기영동을 하여 특정 tRNA를 분리시켰다. tRNA를 유출하여 $^{14}C$-aspartic acid와 charging test하여 $tRNA^{Asp}$를 고른후 [r-$^{32}P$] ATP를 사용하여 tRNA의 말단에 표지한 뒤 enzymatic partial digestion 방법에 의해 RNA의 염기순서를 결정하였다. 그 결과 anticodon은 GUC로 밝혀졌고 그 외의 tRNA의 독특한 구조와 invariable sequence들이 잘 일치하고 있는것을 보았다. Total tRNA of Aspergillus nidulans was obtained by the hot phenol extraction and DEAE-cellulose column chromatography. After separating the tRNA by two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis, a single tRNA was isolated and more purified. This tRNA was labeled with [r-$^{32}P$]ATP, then sequenced with base specific RNases. The RNA sequence revealed that the anticodon was GUc. This tRNA carries aspartic acid. This sequence was compared with those of the other $tRNA^{Asp}$ and some structural characteristics were found.
김영준,이승택,이병재,강현삼,Kim, Young-Joon,Lee, Seung-Taek,Lee, Byeong-Jae,Kang, Hyen-Sam 생화학분자생물학회 1986 한국생화학회지 Vol.19 No.2
A single clone harboring $tRNA^{Asp}$ gene was isolated by colony hybridization to the total tRN A gene clone of Aspergillus nidulans using the previously sequenced $tRNA^{Asp}$ probe. The gene was localized and sequenced by the method of Maxam and Gilbert. The sequence analysis revealed that the $tRNA^{Asp}$ gene has the anticodon of GUC, and contains an intervening sequence of 15 bases. The nucleotide sequence of this $tRNA^{Asp}$ gene was compared with $tRNA^{Asp}$'s of the other organisms. From this, some structural features in the flanking sequences and the gene were discussed. $tRNA^{Asp}$을 [r-$^{32}P$] ATP로 표지하여 Aspergillus nidulans 총 tRNA 유전자은행 (gene bank)과 colony hybridization 한 결과, pANt12가 양성반응을 나타내었다. pANt12 DNA를 추출하여 제한효소 지도를 작성하고 Southern hybridization하여 $tRNA^{Asp}$ 유전자를 포함하는 부분은 pASPI과 pASPII으로 두 번의 subcloning을 하고 유전자의 위치를 hybridization 방법으로 결정하였다. Maxam과 Gilbert의 방법으로 유전자의 염기순서을 결정하니 앞의 $tRNA^{Asp}$의 RNA 염기순서와 IVS 부분을 제외하고는 일치함을 보였다. $tRNA^{Asp}$ 유전자에는 다른 것과는 달리 15bp의 IVS 가 존재하는 것으로 나타났고 내부조절 부위에 대한 공통 염기순서, 가능한 ACT-TA box와 5'-측쇄부위의 TATTTT염기순서가 나타났다. tRNA 구조 유전자의 일부 염기순서와 같은 염기순서가 -15 부위에서 나타났으며 3'-측쇄부분에 short, discontinuous T-strech type이 존재하였다.