포유동물 세포에서의 Homologous Recombination

송규영 ( Kyu Young Song ) 생화학분자생물학회 1992 생화학총설집 Vol.4 No.-

Acetobacter sp. CS5 Alcohol Dehydrogenase의 분리 및 특성

김춘성(Chun Sung Kim),송규영(Kyu Young Song),김성준(Sung Jun Kim),김호상(Ho Sang Kim),박현균(Hyun Gyun Park),이숙영(Sook Young Lee),박종필(Jong Phil Park) 한국생물공학회 1999 KSBB Journal Vol.14 No.5

Tumor Necrosis Factor-$\alpha$로 유도되는 백서의 급성 폐손상에 열충격반응이 미치는 효과

고윤석,임채만,김미정,조원경,정병오,송규영,이상도,김우성,김동순,김원동,Koh, Youn-Suck,Lim, Chae-Man,Kim, Mi-Jung,Cho, Won-Kyung,Jeoung, Byung-O,Song, Kyu-Young,Shim, Tae-Sun,Lee, Sang-Do,Kim, Woo-Sung,Kim, Dong-Soon,Kim, Won-Dong 대한결핵및호흡기학회 1997 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.44 No.6

연구배경 : 패혈증이나 이에 합병된 급성호흡곤란증후군 환자들은 고열을 동반하는 경우가 많다. 발열은 조직의 대사를 항진시키므로 조직내 산소공급에 제한이 초래되는 패혈증 환자들에서 발열이 동반되는 경우 열을 동반하지 않는 경우보다 중요기관의 산소공급이 상대적으로 저하될 가능성이 있다. 반면, 발열상태는 조직내 열충격단백질 (heat shock protein, HSP)의 생성을 유도하여 패혈증에 의한 비가역적인 손상으로부터 세포들을 보호함으로써 생체의 방어기전에 유려하게 작용할 수도 있어 패혈중 이에 합병된 급성 폐손상 환자들의 발열에 대한 임상적 의미는 아직 규명되어 있지않았다. 본 연구는 열을 전처치 하였거나 하지 않은 Sprague-Dawley rat의 기도에 TNF를 주입한 후 TNF에 의해 유도되는 급성 폐손상의 정도를 비교함으로써 열이 급성 폐손상에 미치는 효과를 관찰하고자 하였다. 대상 및 방법 : 급성 폐손상의 지표로는 백서의 우측폐내 $I^{125}$의 분당 측정량 대비 1mL의 혈중내 $I^{125}$의 분당 측정량의 비율로 정의한 단백누출지표와 백혈구의 조직내 침윤정도를 반영하는 myeloperoxidase(MPO)의 활성도를 측정하였다. 결과는 평균(${\pm}$ 표준오차)로 표기하였다. 결 과 : 백서의 기도에 생리식염수를 주입한 백서들은 열을 전처치 하였거나 하지 않은 경우 두 군사이의 단백 누출 지표는 각각 0.099(${\pm}0.024$) 및 0.123(${\pm}0.005$)로서 차이가 없었으며 MPO도 4.58(${\pm}0.79\;U/gm$) 및 7.32(${\pm}0.97\;U/gm$)로서 열을 전처치 할 경우 다소 감소되는 경향(P=0.064)를 보였으나 차이가 없었다. 백서의 기도에 TNF-$\alpha$을 주입한 치료군에서 열 전처치한 백서군은 단백누출지표 0.137(${\pm}0.012$) 및 MPO 7.01(${\pm}0.89\;U/gm$)로서 열 전처치 않은 백서군 단백누출지표 0.186(${\pm}0.015$) 및 MPO 14.11(${\pm}1.08\;U/gm$)에 비해 낮았으며(각 P<0.05) 정상군과는 차이가 없었다. MPO 활성도가 단백 증가되었다(r=0.564, P<0.005). 열 전처치 하지 않은 백서에 비해 열 전처치한 백서의 폐 조직내 HSP 72 단백질의 발현은 열 충격 후 18시간 및 23시간 뒤에도 증가되어 나타났다. 결 론 : 백서에 열을 전처치 할 경우 TNF-$\alpha$로 유도되는 급성 폐손상이 경감되므로 발열이 백서의 방어기전에 유리하게 작용한 것으로 사료되었다. Background : Heat-treated cells are known to be protected from lysis by TNF, which is considered to play a central role in the pathogenesis of sepsis-induced acute lung injury. The objective of the study was to investigate the effect of heat shock response by heat-pretreatment on the acute lung injury of the rats induced by intratracheally administered TNF-$\alpha$, Methods : We intratracheally instilled either saline or TNF (R&D, 500ng) with and without heat pretreatment in Sprague-Dawley rats weighing 250~350 g. The heated rats were raised their rectal temperature to $41^{\circ}C$ and was maintained thereafter for 13 minutes at 18 h before intratracheal administration of saline or TNF. After 5 h of intratracheal treatment, lung leak, lung myeloperoxidase activity (MPO) and heat shock proteins were measured in rats. Lung leak index was defined as counts per minute of $I^{25}$ in the right lung divided by counts per minutes of $I^{25}$ in 1.0 ml of blood. All data are expressed as means ${\pm}$SE. Results : There is no difference in acute lung leak index ($0.099{\pm}0.024$ vs $0.123{\pm}0.005$) among the rats given saline intratracheally with and without heat pretreatment, but MPO activity showed a decreased tendency in heat-pretreated rats ($4.58{\pm}0.79\;U/g$) compared with heat-unpretreated rats ($7.32{\pm}0.97\;U/g$) (P=0.064). Rats administered TNF intratracheally with heat-pretreatment had decreased lung leak index ($0.137{\pm}0.012$) and lung MPO activity ($5.51{\pm}1.04\;U/g$) compared with those of heat-unpretreated and TNF-administered rats ($0.186{\pm}0.016$, $14.34{\pm}1.22\;U/g$) (P<0.05 in each). There were no significant difference of lung leak index and MPO activity between TNF-treated rats with heat-pretreatment and saline-treated rats with and without heat-pretreatment. Conclusion : The heat shock response attenuated neutrophil recruitment and acute lung leak induced by intratracheal instillation of TNF-in rats.

한국인에서 크론병과 Toll-Like Receptor 유전자의 연관성

예병덕 ( Byong Duk Ye ),양석균 ( Suk Kyun Yang ),송규영 ( Kyu Young Song ),양동훈 ( Dong Hoon Yang ),윤순만 ( Soon Man Yoon ),김경조 ( Kyung Jo Kim ),변정식 ( Jeong Sik Byeon ),명승재 ( Seung Jae Myung ),김진호 ( Jin Ho Kim ) 대한소화기학회 2009 대한소화기학회지 Vol.54 No.6

목적: Toll-like receptor (TLR)는 병원균의 특정한 분자 패턴을 인지하는 패턴 인지 수용체로 작용하여 친염증성 사이토카인 분비를 매개한다. 최근 서구에서 수행된 몇몇 연구들에서 TLR이 크론병의 감수성 유전자로 밝혀졌다. 이에 연구자들은 한국인에서 크론병과 TLR4 및 TLR9 유전자 변이의 관계를 규명하고자 하였다. 대상 및 방법: 380명의 크론병 환자와 380명의 대조군에서 TLR4 Asp299Gly (rs4986790), Thr399Ile (rs4986791) 및 TLR9 -1237T/C (rs5743836) 유전자형을 분석, 양 군 간에 비교하였다. 결과: TLR4 Asp299Gly 및 TLR9 -1237T/C 유전자형 분석을 시행한 크론병 환자 중 유전자 변이를 보인 환자는 없었다. 또한 TLR4 Thr399Ile 유전자형 분석을 시행한 모든 피험자에서도 유전자 변이는 확인되지 않았다. 결론: 이 연구 결과는 한국인에서 TLR4 및 TLR9의 주요 유전자 변이는 드물고, 또한 크론병 감수성과도 연관성이 없음을 시사한다. Background/Aims: Toll-like receptors (TLRs) serve as pattern recognition receptors that recognize specific molecular patterns of pathogens and can mediate the production of proinflammatory cytokines. Recently, TLRs have been identified as susceptibility genes for Crohn`s disease (CD) in several studies from Western populations. We investigated the association of genetic variations in TLR4 and TLR9 with CD in Korean population. Methods: In 380 CD cases and 380 healthy controls, we performed genotyping for TLR4 Asp299Gly (rs4986790) and Thr399Ile (rs4986791). The genetic variations in the TLR9-1237T/C (rs5743836) were also examined. Results: Among CD patients genotyped for TLR4 Asp299Gly and TLR9-1237T/C, none had variant alleles. Similarly, none of the subjects genotyped for TLR4 Thr399Ile showed genetic variations. Conclusions: Our results indicate that the major genetic variations in TLR4 and TLR9 are rare and may not be associated with susceptibility to CD in Koreans. (Korean J Gastroenterol 2009;54:377-383)

Tumor Necrosis Factor-α로 유도되는 백서의 급성 폐손상에 열충격반응이 미치는 효과

고윤석 ( Youn Suck Koh ),임채만 ( Chae Man Lim ),김미정 ( Mi Jung Kim ),조원경 ( Won Kyung Cho ),정병오 ( Byung O Jeoung ),송규영 ( Kyu Young Song ),이상도 ( Sang Do Lee ),김우성 ( Woo Sung Kim ),김동순 ( Dong Soon Kim ),김원동 ( 대한결핵 및 호흡기학회 1997 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.44 No.6

UV , TPA , heterologous DNA inserts 가 동물세포에서 homologous recombination 에 미치는 영향

송규영,Kucherlapati, Raju 한국유전학회 1992 Genes & Genomics Vol.14 No.1

We have studied the plasmid x plasmid recombination system to examine factors that might increase the frequency of homologous recombination. Treatment of input DNA with UV doses up to 100 Jm^(-2) did not have a significant effect on recombination, on the other hand, treating the recipient EJ cells with UV light at a dose of 1 Jm^(-2) prior to transfection resulted in a two fold increase in recombination. The tumor promoter TPA treatment did not have an effect on recombination or transformation. We have studied the effect of heterologous inserts on homologous recombination and observed that as the length of insert increased, there was a decline in the frequency of recombination.

PC12 세포에서 Lipopolysaccharide 처리에 의한 Interferon-Y-Inducing Factor의 유도

송규영,김춘성,김성준 조선대학교 부설생명과학 연구소 1999 생명과학 연구 Vol.7 No.-

IL-1α, IL-β, IL-2, IL-4, IL-6, TNF(tumor necrosis factor)-α, IFN (interfreron)-γ와 NO (nitric oxide)와 같은 사이토카닌은 면역반응 내에서 숙주 방어기작, 조직상해와 염증반응에서 중요한 역할을 한다. IGIF는 IL-18이라고도 불리며, IFN-γ를 유도하는 생물학적 기능이 있다. 또한 IFN-γ와 GM-CSF를 생성하지만, IL-10을 억제한다. 본 연구에서는 PC 12세포에서 IGIF cDNA를 분리하였고 Northern blot을 실시하여 LPS 처리 4시간 후 IGIF mRNA의 유도를 확인하였다. 그 결과 LPS를 최종농도가 10μM이 되도록 처리하여 IGIF가 유도됨을 확인하였다. 또한 항 IGIF 항체를 이용하여 IGIF 유전자가 PC 12세포에서 발현됨을 확인하였다. Cytokines such as IL (interleukin)-1α, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, TNF (tumor necrosis factor}-α, IFN (Interferon)-γ, and NO (Nitric oxide) play an important role in the host defense mechanism, tissue injury, and inflammation in immune system. IGIF (interferon-γ-inducing factor) which is also called IL-18 has potent biological activities, including the induction of IFN-γ production. The IGIF promotes the production of IFN-γ and GM-CSF and inhibits IL-10 production. We report here the isolation of IGIF cDNA from PC 12 (pheochromocytoma) cells. Using the Northern blot analysis, the induction of IGIF mRNA was detectable by 4 hr after LPS treatment. It was revealed that IGIF could be induced by the toxic drugs when cells were treated with LPS to a final concentration of 10 μM. We confirmed the localization of expression of IGIF gene in all zones of the PC 12 cells with polyclonal antibodies of IGIF.

Purification and Determination of in vitro and in vivo Activities of Recombinant Human Annexin Ⅰ

Kim,Chong-Kook,Cho,Sung-Woo,Hwang,On-you,Lee,Jae-Dam,Song,Kyu-young,Kim,Kyoung-Mi,Lee,Jong-Wook,Na,Doe-Sun 울산대학교 의과대학 1993 울산의대학술지 Vol.2 No.1

아넥신 Ⅰ은 칼슘의존적으로 인지질막에 결합하는 단백질군의 하나인 아넥신류에 속하며 상피성 성장 인자 수용체 키나제의 기질로 알려져있다. 그러나, 생체내 역할과 그 기전에 대하여는 밝혀지지 않고 있다. 아넥신Ⅰ의 생물학적 기능에 대한 자세한 연구를 하기위해 재조합 아넥신Ⅰ을 수용성 상태로 생산하였고, 대장균에서부터 EGTA추출한 후, DE-52 이온 교환, gel filtration, hydroxylapatite 칼럼을 통과시켜 대량으로 정제하였다. 정제된 아넥신Ⅰ은 시험관내에서 PLA를 억제하였고, 생체내에서 쥐 발바닥 부종에 대한 소염 효과를 나타내었다.