http://chineseinput.net/에서 pinyin(병음)방식으로 중국어를 변환할 수 있습니다.
변환된 중국어를 복사하여 사용하시면 됩니다.
- 中文 을 입력하시려면 zhongwen을 입력하시고 space를누르시면됩니다.
- 北京 을 입력하시려면 beijing을 입력하시고 space를 누르시면 됩니다.
RISS 인기검색어
- 검색키워드
- 저자 : 김윤섭 ( Yun Seup Kim ) (검색결과 6 건)
- 무료
- 기관 내 무료
- 유료
-
폐상피세포에서 Triptolide에 의한 NF-${\kappa}B$ 의존성 IL-8 유전자 전사활성 억제기전
지영구,김윤섭,윤세영,김용호,최은경,박재석,김건열,채기남,곽상준,이계영,Jee, Young-Koo,Kim, Yoon-Seup,Yun, Se-Young,Kim, Yong-Ho,Choi, Eun-Kyoung,Park, Jae-Seuk,Kim, Keu-Youl,Chea, Gi-Nam,Kwak, Sahng-June,Lee, Kye-Young 대한결핵및호흡기학회 2001 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.50 No.1
연구배경 : 폐상피세포가 능동적으로 IL-8을 분비한다는 것은 주지의 사실이다. NF-${\kappa}B$는 IL-8 발현 조절에 있어서 가장 중요한 역할을 담당하는 전사인자이다. Triptolide는 최근 밝혀진 NF-${\kappa}B$ 억제제로서 중국한약제인 뇌공등 (Tripterygium Wilfordii)에서 추출된약제이다. 연자들은 새로운 NF-${\kappa}B$ 억제제인 triptolide가 폐상피세포에서 NF-${\kappa}B$ 의존성 IL-8 유전자의triptolide가 염증성 폐질환에서 새로운 치료제로서의 가능성을 확인하기 위하여 본 연구를 시행하였다. 방법 : 폐상피세포로서 A549 사용하였고 triptolide는 미국의 Pharamagenesis(Palo Alto, CA)사로부터 제공받았다. NF-${\kappa}B$ 활성유도물질로는 IL-$1{\beta}$(R&D)와 PMA(Sigma)를 이용하였다. IL-8 유전자의 발현은 RT-PCR과 ELISA를 이용하여 측정 하였다. NF-${\kappa}B$의존성 IL-8 유전자의 전사활성을 평가하기 위하여는 IL-8 NF-${\kappa}B$ luciferase construct를 안정적으로 유전자주입한 A549 IL-8 NF-${\kappa}B$ luciferase 세포주를 제조해 사용하였고 NF-${\kappa}B$ DNA 결합은 electromobility shift assay(EMSA)를 이용하였다. p65 전사활성을 assay하기 위해서는 Gal4-p65 fusion protein expression system을 유전자주입과 luciferase assay를 통하여 시행하였다. Transcriptional coactivator의 역할을 규명 하가 위하여서는 CBP(CREB-binding protein)와 SRC-1(steroid receptor coactivator-1) 발현 벡터를 유전자 주입하고 luciferase assay를 이용하여 확인하였다. 결과 : Luciferase assay로 triptolide가 PMA와 IL-$1{\beta}$자극에 의한 IL-8 NF-${\kappa}B$ 활성을 의미있게 감소시킴을 확인하였다. IL-8 ELISA와 RT-PCR로 triptolide가 PMA와 IL-$1{\beta}$ 자극에 의해 유도되는 IL-8 발현을 각각 단백질과 mRNA 수준에서 억제함을 관찰하였다. Triptolide가 PMA와 IL-$1{\beta}$에 의한 IL-8 NF-${\kappa}B$의 전사활성을 억제시킨 반면 EMSA와 $I{\kappa}B{\alpha}$ Western blot을 이용한 실험에서는 triptolide가 NF-${\kappa}B$ DNA 결합과 $I{\kappa}B{\alpha}$의 분해에 전혀 영향을 미치지 못함을 확인하였다. 이러한 전사활성 억제와 DNA 결합 간의 불일치의 원인으로서는 DNA 결합 이후에 발생하는 핵내 에서의 transactivation에 triptolide가 영향을 미치리라고 생각되어 p65 transactivation study를 Gal4-p65T A(p65의 transactivation domain) fusion protein 발현 시스템과 luciferase assay를 이용하여 시행한 결과 triptolide가 p65 transactivation을 억제함으로써 NF-${\kappa}B$를 억제함을 확인하였다. 그러나 CBP나 SRC-1과 같은 coactivator의 역할을 규명하기 위한 유전자주입 실험에서 triptolide에 의한 p65 transactivation 억제에 대해 CBP나 SRC-1의 과발현이 별다른 영향을 미치지 못하였다. 결론 : Triptolide는 폐상피세포에서 NF-${\kappa}B$ 의존성 IL-8 유전자의 전사활성을 억제하고 그 기전은 $I{\kappa}B{\alpha}$ 경로가 아닌 핵내에서의 p65 transactivation 억제에 의해 발생하며 이에는 CBP나 SRC-1과 같은 coactivator가 관여하지 않음을 확인하였다. Background : NF-${\kappa}B$ is the most important transcriptional factor in IL-8 gene expression. Triptolide is a new compound that recently has been shown to inhibit NF-${\kappa}B$ activation. The purpose of this study is to investigate how triptolide inhibits NF-${\kappa}B$-dependent IL-8 gene transcription in lung epithelial cells and to pilot the potential for the clinical application of triptolide in inflammatory lung diseases. Methods : A549 cells were used and triptolide was provided from Pharmagenesis Company (Palo Alto, CA). In order to examine NF-${\kappa}B$-dependent IL-8 transcriptional activity, we established stable A549 IL-8-NF-${\kappa}B$-luc. cells and performed luciferase assays. IL-8 gene expression was measured by RT-PCR and ELISA. A Western blot was done for the study of $I{\kappa}B{\alpha}$ degradation and an electromobility shift assay was done to analyze NF-${\kappa}B$ DNA binding. p65 specific transactivation was analyzed by a cotransfection study using a Gal4-p65 fusion protein expression system. To investigate the involvement of transcriptional coactivators, we perfomed a transfection study with CBP and SRC-1 expression vectors. Results : We observed that triptolide significantly suppresses NF-${\kappa}B$-dependent IL-8 transcriptional activity induced by IL-$1{\beta}$ and PMA. RT-PCR showed that triptolide represses both IL-$1{\beta}$ and PMA-induced IL-8 mRNA expression and ELISA confirmed this triptolide-mediated IL-8 suppression at the protein level. However, triptolide did not affect $I{\kappa}B{\alpha}$ degradation and NF-$_{\kappa}B$ DNA binding. In a p65-specific transactivation study, triptolide significantly suppressed Gal4-p65T Al and Gal4-p65T A2 activity suggesting that triptolide inhibits NF-${\kappa}B$ activation by inhibiting p65 transactivation. However, this triptolide-mediated inhibition of p65 transactivation was not rescued by the overexpression of CBP or SRC-1, thereby excluding the role of transcriptional coactivators. Conclusions : Triptolide is a new compound that inhibits NF-${\kappa}B$-dependent IL-8 transcriptional activation by inhibiting p65 transactivation, but not by an $I{\kappa}B{\alpha}$-dependent mechanism. This suggests that triptolide may have a therapeutic potential for inflammatory lung diseases.
-
-
최은경 ( Eun Kyung Choi ),김윤섭 ( Yun Seup Kim ),박재석 ( Jae Seuk Park ),지영구 ( Young Koo Jee ),이계영 ( Kye Young Lee ) 대한결핵 및 호흡기학회 2005 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.58 No.1
배경 : 폐기종에서 발생하는 폐포 파괴의 원인으로서 전통적으로 protease/anti-protease 불균형과 산화성 스트레스가 주요 가설로 여겨져 왔으나 최근 폐포세포의 아포프토시스가 폐포파괴 및 폐기종의 원인이 된다는 이론이 제기되고 있어서 A549 폐상피세포에서 흡연추출물에 의한 세포사의 특성을 규명하고자 본 연구를 시행하였다. 방법 : A549 폐상피세포주에서 여러 농도의 흡연추출물 및 억제제를 첨가한 후 MTT assay를 잉용하여 세포생존율 Emphysema is characterized by air space enlargement and alveolar destruction. The mechanism responsible for the development of emphysema was thought to be protease/antiprotease imbalance and oxidative stress. A very recent study shows that alveolar cell a
-
-
-
김윤섭 한국독어독문학회 1985 獨逸文學 Vol.35 No.1
Kafkas erste Erwahnung von Kierkegaard beginnt in seinem Tagebuch mit dem 21. August 1813 (caber ,Buch der Richters`) and sein erste dokumentarische Beschreibung des Werkes 1: urcht and Zittern` Kierkegaards wird im Briefe zwischen Oktober and November 1917 gezeigt. Hingegen berichtet Kafka in seinem Tegebuch vom 23. September 1912, daB er seine Erzahlung ,Das Urteil` in der Nacht vom 22. bis 23. von 10 Uhr abend bis 6 Uhr friih in einem Zug geschrieben hat. Aufgrund dieses schriftlichen Zeugnisses ist auch die Behauptung zu rechtfertigen, daB Kierkega~ids EinfluB auf Kafkas Erzahlung ,Das Urteil` sich gar nicht finden ktSnnte, aber meiner Meinung nach wird es vermutet, daB Kafka wegen seiner Verwandtschaft mit der existenziellen Idee Kierkegaards viel fruher als diese Zeitphase das Werk ,Frucht and Zittern` bekommen hatte. InfolgendermaBen, die Nachweisung, daB sich Kafkas existenzeille Idee im Vergleich zum Werk ,Furcht and Zittern` von Kierkegaard sehr eng der religibsen Anschauung nahert, ist das wichtigste Indiz als die erste ineinander korrelative Bedingung beider. Es zeigt sich klar, daB Kafka die existenzielle Idee Kierkegaards durch ,Die Heilige Schrift` des Christentums and durch ,Talmud`, des Satzungsbuches der Juden bereits anerkannt hatte. In diesem Sinne ware es mbglich, Kafkas Erzahlung ,Das Urteil` sei von Kierkegaard auf der Basis von der Heiligen Schrift des Judentums oder des Christentums beeinHuBt worden. Kierkegaards existenzielle Weltanschauung besteht in drei Stufen: 1) die asthetische Existenz, 2) die moralische Existenz, 3) die religise Existenz, Die Hauptfigur ;Georg Bendemann` im Werk ,Das Urteil` ist ein irdischer sinnlicher Mensch, der nach Kierkegaard als ,die asthetische Existent' gilt. Georgs Freund-Figur in Petersburg des russischen Landes wird ,als ))eine symbolische Projektion von Georgs besserem Ich, seiner Verwandtschaft mit Kafka((` nachgewiesen, Georgs monstrbser Vater-Imago, welcher ,in dieser Erzahlung dem Sohn als Schuld anlastet, dessen grenzlose Egozentrik, das Bestehen auf der eigenen Subjektivitat` verwift, bedeutet eine allmachtige Gottheit als ,eine innere Komponente Georgs, dle sich als Gegenuber postuliert` im Vergleich Abrahams Gott ,Yehovah`. Und Der Vater vertritt ,absolutes Selbst`, die Persbnlichkeit ,des Freundes als des Gemeinsamen durch Kafka`, and verteidigt ,den Freund in RuBland als den fernen kindlichen Teil des Ichs von Georg Bendemann`, In dieser Sinne Bind die Figuren, ,Georg` and ,der Freund` keine einzelnen selbstandigen Gegenuber, sondern gelten ,als zwei Komponente einer Seele. Der wesentliche Grund des Urteils, warum Georg von seinem Vater zum Ertrinken verurteilt wird, ist abhangig von der Unwissenheit seiner schuldhaften Tfitigkeit; seine Schuld, d, h, Georgs Verbrechen bestand in seiner Egozentrik. Was bedeutet die Verurteilung zum Ertrinken? Nach Harmut Binder bedeutet dies such die Wiedergeburt and die Verbesserung desjenigen, der nicht moralisch, sondern nur sinnlich (=asthetisch) wie Don Juan nach seiner eigenen Lebenslust begierig ist, weil die Verurteilung zum Ertrinken andeutungsvoll durch das religibse rituelle Bad nach dem Judentum and dem Christentum als Reinigung der Schuld zu verstehen ist. Wahrend Abraham von seinem Hielsvater, Gott, Yehovah, durch seinen unbedingen Glauben, seine nachgiebige Gefolgsamkeit, seine willige Entschliel3ung zur Opfer seines einzigen Sohnes Isaak als ,Auserwiihlter and Erbe der VerheiBung` gesegnet and gegnadet worden war, ist Georg ,von seinem leiblichen Vater verflucht, der Freund hingegen ist gesegnet von seinem geistlichen Vater.`
KISS연관 검색어 추천
이 검색어로 많이 본 자료
활용도 높은 자료
