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Aspergillus의 UvsC group에 속한 돌연변이원 감수성 변이주 musN이 uvsC 돌연변이주와 다른 성질
채순기,Chae, Suhn-Kee 배재대학교 자연과학연구소 1996 自然科學論文集 Vol.8 No.2
돌연변이원 감수성 hyper-rec type musN 돌연변이주를 recombination 과 mutation에 관여하는 유전자들이 포함된 UvsC group에 포함시켰다. 하지만, rec- 및 UV에 의한 돌연변이가 일어나지 않는 uvsC 돌연변이주와는 달리 musN은 매우 다른 성질을 나타냈다. musN은 uvsC와는 달리 mutator가 아니었다. 또한, UV 조사에 따른 selenate resistant mutation도 야생주와 비슷한 수준으로 유발되었다. 분열하는 musN 세포에서의 UV 감수성 또한 uvsC와는 달리 정상이었다. 이같은 결과는 UcsC group이 branched pathways를 갖고 있음을 나타낸다. Mutangen sensitive hyper-rec type musN mutants were assigned into the UvsC group which contains genes involved in recombination and mutation. however, phenotypic properties of musN mutants were very different from those found in uvsC mutant strains which are rec- and lack UV-induced mutation. musN was not a mutator like uvsC. In addition, selenate resistant mutations in musN were induced sililar to those in wild types by UV irradiation. Wild type levels of UV-sensitivity in dividing cells of musN also differ from the uvsC phenotypes. These indicate that the UvsC group has branched pathways.
Aspergillus nidulans의 자외선 감수성, uvs 돌연변이주들의 epistatic 연관성 및 성질에 대하여
채순기,Chae, Suhn-Kee 배재대학교 자연과학연구소 1999 自然科學論文集 Vol.11 No.1
4-NQO에 대한 감수성을 이용한 A.nidulans uvs 유전자들의 epistatic grouping은 자외선 및 MMS의 감수성을 이용한 grouping과 동일한 결과를 보였다. 한편, MMS에 대한 감수성을 기준으로 분류한 epistasis group에서 uvsA는 UvsF group 유전자인 uvsF 및 uvsH와 synergistic interaction을 보였으며, uvsA;uvsB 및 uvsA;uvsC 이배체는 uvsB, uvsC의 반수체와 동일한 감수성을 나타내었다. Germination한 뒤 4시간 후의 자외선 감수성을 기준으로 한 uvsI의 epistatic grouping은 conidia 상태에서 자외선을 쬐어 조사한 grouping과 유사하여, uvsH, uvsC, uvsB와 synergistic interaction을 보였다. 하지만, quiescent conidia 상태에서의 additive effect를 보인 uvsI와 uvsF 돌연변이체는 4h germination 후에는 epistatic interaction을 나타내었다. uvsI 돌연변이체의 Intergenic-intragenic recombination frequency는 야생주와 유사하였다. In epistatic grouping of uvs genes in A. nidulans based on the sensitivities to 4-NQO, the same epistatic grouping was obtained as those for UV and MMS-sensitivities. Based on the MMS-sensitivities, uvsA demonstrated synergistic interactions to uvsF and uvsH, the UvsF group genes, but exhibited epistatic interactions to uvsB and uvsC. The same epistatic grouping was also seen for uvsI when UV was irradiated after 4h germination of conidia, showing synergistic interactions to uvsH, uvsC, and uvsB. However, epistatic interactions were observed with uvsF, which were different from those obtained in quiescent conidia by UV. Intergenic and intragenic recombination frequencies were normal in uvsI compared with wild type.
채순기,Chae, Suhn-Kee 배재대학교 자연과학연구소 1997 自然科學論文集 Vol.9 No.1
저농도의 MNNG가 Aspergillus nidulans의 생존도 및 돌연변이 유발에 끼치는 영향을 조사하였다. Nontoxic하고 submutagenic한 농도의 MNNG 선 처리는 높은 농도로 처리 시의 치사율 및 돌연변이 유발을 낮추지 못했다. 이러한 결과는 Aspergillus nidulans에는 MNNG 에 의한 adaptive response가 일어나지 않는다는 것을 시사하고 있다. 발아 과정의 첫 번째 체세포 분열에서, 시간별로 MNNG에 대한 치사율을 조사하고 UV에 의한 생존도와 비교하였다. UV나 MNNG 처리 시 치사율은 S 세포 시기 직전까지 증가하였다가, DNA 복제 시에는 감소함을 나타내었다. MNNG 처리 시는 UV와 달리 G2세포시기에 치사율이 가장 높았다. We have examined the effects of low concentrations of MNNG, alkylating agent, in survival and mutagenesis in Aspergillus nidulans. Pretreatments of cells with nontoxic and submutagenic doses of MNNG did not reduce the cytotoxic and mutagenic effects of exposure to a high concentration of drug. The results imply that adaptive responses on survival and mutagenesis for MNNG treatments do not occur in Aspergillus nidulans. In the first mitotic cell cycle during germination, the sensitivity to MNNG has been investigated at hourly time interval, and compared with that for UV irradiation. In both UV and MNNG treatments, the sensitivity increased till S cell stage, and decreased while DNA replication continued. Different from that show for UV irradiation, lethality to MNNG reached to the maximum at G2 cell stage.
Kim, Eun Hee,Chae, Suhn Kee,Lee, Nam Shik 한국유전학회 1997 Genes & Genomics Vol.19 No.4
Nm23 is a multifunctional protein of which NDP kinase activity has been well established. In human, 4 isotypes of Nm23 (Nm23-H1, H2, DR, and H4) were found so far. Among them, Nm23-H1 acts as a tumor metastasis suppressor within some tumor cell types. In addition, Nm23-H1 also affects cell proliferation and differentiation. However, the mechanisms were hardly known. To understand the processes mediated by Nm23, therefore, we tried to isolate proteins interacting with Nm23-H1 by using the lexA based yeast two-hybrid system. A positive clone from a HeLa cDNA library interacted specifically with Nm23-H1. Sequence analysis of this clone revealed that the cDNA insert is the HP1Hs-gamma which is a non-histone chromosomal protein affecting on heterochromatin-mediated gene silencing. This protein also interacted with Nm23-H2, a c-myc transcription factor PuF. Domains interacting between the proteins will be presented.
Aspergillus niger에서 단백질분해효소 결합 돌연변이주의 제조 및 특성규명
정헌세,채순기,박희문,맹필재,김정윤 한국산업미생물학회 1997 한국미생물·생명공학회지 Vol.25 No.4
A niger를 숙주로 사용하여 이종유전자를 발현할 때 A. niger로부터 분비되는 단백질분해효소에 의해 생산된 단백질이 분해되는 문제점이 있기 때문에 단백질분해효소 결함 돌연변이주의 개발이 필요하다. 본 실험에서는 A. niger의 conidiospore를 자외선으로 처리한 후 skim milk plate에서 투명환 형성 능력을 측정함으로써 A. niger의 단백질분해효소 결함 돌연변이주들을 선별하고, 이들의 유전적 특성을 조사하였다. 선별된 돌연변이주들은 모균주에 비해 3-85% 정도의 단백질분해효소 활성을 가지고 있었으며, 특히 산성 조건하에서 단백질분해효소의 활성이 모균주의 3%와 49%를 가지고 있는 ANPD-129와 ANPD-153은 알칼리 조건하에서도 모균주의 27%와 13% 만을 가지고 있었다. 대부분의 단백질분해효소 결함 돌연변이주들과는 달리 ANPD-129와 ANPD-153은 모균주와 비슷한 생장속도를 보였다. 이 두 돌연변이주들 간에 형성된 이배체는 단백질 분해효소를 모균주와 비슷하게 분비하였는데 이것을 통하여 두 돌연변이가 서로 다른 유전자 좌위에서 일어났다는 것을 알 수 있었다. ANPD-129와 ANPD-153을 대상으로 chromosome mapping을 수행한 결과 ANPD-129는 linkage group Ⅵ에 그리고 ANPD-153은 linkage group Ⅲ에 돌연변이가 일어난 것을 확인할 수 있었다. Several protease-deficient mutants of Aspergillus niger have been isolated by halo-screening on skim milk plate after UV irradiation of condiospores. The extracellular proteolytic activities of the mutant strains grown in an optimized medium varied from 3% to 85% of that of the parental strain. Especially, two mutant strains named as ANPD-129 and ANPD-153, which had 3% and 49% of acid protease activity of the parental strain, respectively, were further characterized both physiologically and genetically. The growth rates of the mutants, ANPD-129 and ANPD-153, were similar to that of the parental strain, unlike other protease-deficient mutants. The dipolid formed between the two mutants restored protease acitivity to a similar level of that of the parental strain. This result revealed that ANPD-129 and ANPD-153 had mutations at different loci. Using master strains with marked chromosomes these loci were assigned to linkage groups. The mutation locus (prt129) in ANPD-129 was assigned to linkage group Ⅵ and the locus (prt153) in ANPD-153 to linkage group Ⅲ.