Leuconostoc mesenteroides와 Lactobacillus bulgaricus를 이용한 고점도 발효유의 제조

배동훈,권경렬 단국대학교 신소재기술연구소 1992 신소재 Vol.2 No.-

Leuconstoc mesenteroides와 Lactobacillus bulgaricus를 이용한 고점도의 발효유 제조에 관한 조건을 검토하였다. 발효유 제조의 최적 조건은 Skim milk 10%, yeast extract 0.2%, sucrose 10% 및 pH 6.8이였으며 배양온도는 30℃가 가장 좋았다. 접종비율에 의한 점도는 Leuconostoc mesenteroides와 Lactobacillus bulgaricus의 접종비가 1 : 1일 때 가장 높은 점도를 보였다. 수소이온농도는 혼합배양이 각각의 단독배양에 비하여 낮게 나타났으며 배양 12시간부터 높은 산도를 유지하였다. 24시간 배양한 혼합발효유의 총생균수는 8.7×10^9으로 단독배양의 경우보다 높게 나타났으며 이때의 점도는 2750 cps이었다. The conditions for the production of viscosity fermented milk by mixed culture method using Leuconostoc mesenteroides and Lactobacillus bulgaricus has been studied. The media composition and culture condition for optimum production of viscosity fermented milk were as follows: 10% f skim milk, 0.2% of yeast extract, 10% of sucrose, pH 6.8 and 30℃. Highest viscosity of culture broth was obtained with the same inoculation ratio of each microorganism. The final pH or mixed culture fermentation broth was ower than that of single culture broth of each microorganism. The total number of lactic acid bacteria and viscosity in final mixed culture broth after 24 hours of inoculation was 8.7×10^9 cells/m/ and 2750 cps. respectively.

Streptomyces sp. YJB-599가 생산하는 Genistein의 분리 및 정제

함병권,배동훈,유주현 한국미생물생명공학회 ( 구 한국산업미생물학회 ) 1996 한국미생물·생명공학회지 Vol.24 No.3

토양으로부터 세포독성물질을 생산하는 strain No. 5-99 균주를 분리하였다. 본 균주의 세포벽 성분의 diaminopimelic acid(DAP)와 아미노산을 분석하여 본 결과, LL-DAP만을 함유하고 있었고, glycine이 검출된 것으로 보아 glycine으로 연결된 peptide를 가지는 peptidoglycan type A3이고 cell wall chemotype Ⅰ의 방선균인 Streptomyces sp.로 확인되었다. 따라서 본 균주를 Streptomyces sp. YJB-599라 명명하였다. 본 균주가 생산하는 활성물질은 용매추출 및 silica gel column chromatography를 이용하여 정제되었으며, 최종적으로 침상의 백색결정으로 분리하였다. 기기분석과 database로 구조분석을 행한 결과, 본 물질은 genistein으로 밝혀졌다. A cytotoxic material was produced by strain No. 5-99 which was isolated from soil. Analyzing the cell wall components, LL-diaminopimelic acid was identified. From the existance of glycine in the cell wall, this strain was identified to Streptomyces sp. which has cell wall chemotype I and peptidoglycan type A3 connected by glycine. So, we named this strain to Streptomyces sp. YJB-599. The Active material was purified through solvent extraction, silica gel column chromatography and crystallized to needle-shaped white crystal. Analyzing the structure of this crytal by instrumental analysis and database, it was determined to genistein.

Dicyma sp. YCH-37이 생산하는 효모세포벽 용해효소 : 1. 생산균주의 분리 및 효소의 정제 l. Isolation of the Strain and Purification of the Enzyme

정희철,함병권,배동훈,하세가와토루,유주현 한국미생물생명공학회 ( 구 한국산업미생물학회 ) 1996 한국미생물·생명공학회지 Vol.24 No.4

효모세포벽 용해효소를 생산하는 균주를 토양으로부터 분리하였다. 본 균주에 대한 현미경 관찰 및 형태학적, 배양상의 특징을 검토한 결과 Dicyma sp.로 동정되어, 본 균주를 Dicyma sp YCH-37로 명명하였다. 세포에 아무런 처리도 가하지 않은 생균상태의 세균, 효모, 곰팡이에 대한 용균 spectrum을 측정한 결과, 세균 중에서는 Salmonella typhimurium을, 효모 중에서는 Torulopsis, Hansenula, Zygosaccharomyces rouxii 등을 잘 용해시켰으며, 가압증기살균 처리된 효모는 모두 용해시킬 수 있었다. 배양상등액을 yeast glucan을 이용한 affinity adsorption 및 DEAE-cellulose column chromatography로 정제한 결과, 13%의 수율과 204배의 정제도로 정제되었다. SDS-PAGE, gel filtration을 통해 분자량은 약 25,000 daltons임을 확인하였으며, 용균활성의 최적 pH와 온도는 각각 8.0과 50℃이고, pH 4.0~pH 10.0, 40℃까지 안정하였다. The strain YCH-37, which produces yeast cell wall lytic enzyme, was isolated from soil. From the microscopic observation, morphological and cultural characteristics, this strain was identified to fungus, Dicyma sp. So, we named this strain as Dicyma sp. YCH-37. The lytic enzyme effectvely lysed Salmonella typhimurium among intact living bacteria and Torulopsis, Hansenula, Zygosaccharomyces among intact living yeast, as well as autoclaved yeast strains. The yeast cell wall lytic enzyme was succesively purified to 204 folds with 13% yields through yeast glucan affinity adsorption and DEAE-cellulose column chromatography. The enzyme was identified to monomeric protein with molecular weight of 25,000 daltons from the results of SDS-PAGE and gel filtration. The optimum pH and temperature for the yeast lytic activity were 8.0 and 50℃, respectively. The enzyme was stale up to 40℃, and between pH 4.0~pH 10.0.

Acetyl CoA carboxylase의 활성 조절에 있어서 Covalent phosphorylation과 Deploymerization간의 상관관계에 관한 연구

권경렬,김은영,배동훈 단국대학교 신소재기술연구소 1995 신소재 Vol.5 No.-

지방산 합성계의 지배 효소인 Acetyl CoA carboxylase의 활성조절에는 hormone에 의한 covalent modification과 세포내 대사물질에 의한 조절이 관여하는 것으로 알려져 왔다. Allosteric regulation과 covalent modification 두 경우 모두 중합체와 이량체로서 상호전환 되며 효소활성이 변환된다. BSA를 효소의 인산화과정에 함께 사용하였을 경우는 특이하게도 효소의 인산화는 일어나나 이량체로서의 분해는 일어나지 않는다. 이러한 사실로부터 효소 활성조절은 직접적으로 polymerization-depolymerization 변환에 의해 나타내며 인산화-탈인산화는 효소의 4차 구조를 변환시키기 위한 도구로서 사용되며 인산화-탈인산화에 의하여 활성이 직접적으로 변화하지는 않는다. Acetyl CoA carboxylase, the rate-limiting enzyme in long chain fatty acid synthesis, exhibits complex regulatory properties. Hormonal regulation of the carboxylase activity and thus fatty acid sythesis is mediated by the covalent modification of the enzyme, and cellular metabolites regulate the carboxylase activity through polymerization-depolymerization of the enzyme. In this paper, we show the evidences that the covalent modification of Acetyl CoA carboxylase is a means of changing the quaternary structure of the carboxylase and not the activity per se.

가축분뇨를 이용한 SCP 생산 균주의 분리 및 균체 단백질 생산

한석균,고유석,안태영,배동훈 한국미생물생명공학회 ( 구 한국산업미생물학회 ) 1996 한국미생물·생명공학회지 Vol.24 No.6

질소원으로서 계분을 이용하는 균주를 선별하고 계분배지에서 균체의 생육속도가 다른 균주에 비하여 우수한 균주를 분리하였다. 형태·생리학적 특성을 기초로 하여 yeast의 분류 기준과 비교하여 본 균주를 Candida sp.로 동정하였으며 본 균주를 Candida sp. D116으로 명명하였다. Poultry feces extract medium에서 4% 농도의 glucose 첨가가 균체 생육에 효과적이었다. D116 균주를 액체 발효하여 균체생산능, 요산 그리고 가용성 단백질의 변화를 조사하였다. 그 결과 약 60시간이 경과하면 액체 발효 배지내의 거의 모든 가용성 단백질 및 요산의 감소를 보였으며 균체생육은 약 36시간 배양하였을 때 최고조에 도달하였고 그 후에는 점차 감소하는 경향을 보였다. SCP의 대량생산의 결과 50%의 계분혼합 배지와 30℃의 배양 온도에서 36시간 배양하여 균주의 생육수준이 3.8×10^9 CFU/ml 농도의 균체를 생산하였고 200 L의 배양액중 약 870 g-dw의 균체를 얻었으며 생산된 군체의 조단백질 함량은 67%이었다. Production of Single Cell Protein from Poultry Feces. Suk-kyun Han, You-Suk Go, Tae-Young Ahn and Dong-Hoon Bal^1*. Deparment of Microbioligy, College of Natural Sciences, Dankook Univerity, Cheonan 330-714 and Research Center for Molecular Microbiology, Seoul Nationa University, Seoul 151-742, Korea, ^1Department of Food Engineering. College of Engineering, Dankook University, Cheonan 330-714 and Bioproducts Research Center of Yonsei University, Seoul 120-749, Korea - From the soil collected form provincial area of South Korea, a microorganisms which have been shown good growth in the minimal poultry feces extract medium was isolated. Supplement of glucose to the poultry feces extract medium helped the complete degraded during the microbial growth. Maximum cell growth (3.8×10^9 CFU/ml) obtained at 36 hours of incubation after inoculation. Uric acid was degraded faster in minimal medium that in the glucose complement medium. VFA (volatile fatty acid), which are known as major compounds of poultry feces odor, were almost removed from the minimal poultry feces extract medium. Glucose supplement to the minimal medium enhanced the growth of microbial cells. Addition of 4% of glucose and 4% of neopeptone to the minimal poultry feces extract medium helped the maximal growth of cells.

Metarizium anisopliae (Metschn.) Sorok이 생산하는 Lactobacillus plantarum 용균효소의 분리, 정제 및 특성

류기철,함병권,백운하,유주현,배동훈 한국미생물생명공학회 ( 구 한국산업미생물학회 ) 1996 한국미생물·생명공학회지 Vol.24 No.6

김치저장성을 향상시키기 위하여, Lactobacillus plantarum 용균효소 생산균주를 토양으로부터 분리한 후 그 효소를 정제하고 특성을 살펴보았다. 본 균주의 배양학적 및 형태학적 특성 등을 검토한 결과 Metarrisium anisopliae (Metschn). Sorok으로 동정되었으며, 본 효소는 affinity adsorption, CM-Sephadex C-50 column chromatography를 통하여 40%의 수율과 75배 정제도로 정제되었다. 효소활성의 최적 pH와 온도는 각각 4.0, 40℃였으며, pH 3.0~9.0, 60℃까지 효소의 안정성이 유지되었다. SDS-PAGE 및 gel filtration으로부터 본 효소의 분자량은 40,000 daltons인 monomeric protein임을 확인하였다. 본 효소는 Lactobacillus plantarum 세포벽 peptidoglycan의 peptide linkage를 절단 하는 endopeptidase였으며, 용균 spectrum으로부터 김치발효시 유용균인 Leuconostoc mesenteroides에 대해서는 활성을 거의 나타내지 않음을 확인할 수 있었다. 본 효소의 활성은 Ag^+, N-bromosuccinimide (NBS)에 의해서 완전히 저해되었으며, NBS에 의해서 활성이 저해된다는 사실로부터 본 효소는 활성에 tryptophan residue가 관여하는 것으로 확인되었다. 본 효소는 산성 아미노산의 함량이 염기성 아미노산의 함량에 비하여 높았으며, alanine, glycine, proline, tyrosine의 함량 또한 매우 높았다. To improve the preservation of Kimchi, we isolated Lactobacillus plantarum lytic enzyme-producing strain from soil, and the enzyme was purified and characterized. From the observation of cultural and morphological characteristics, the isolated strain was identified as Metarrisium anisopliae (Metschn). Sorok. The enzyme was purified to 75-folds with 40% yields through affinity adsorption and CM-Sephadex C-50 column chromatography. The optimum pH and temperature for lytic activity are 4.0 and 40℃, respectively, and the enzyme acitivity is stable between pH 3.0 and 9.0 and up to 50℃. The enzyme is a monomeric protein with molecular weight of 40,000 daltons by SDS-FAGE and gel filtration. The enzyme is endopeptidase which breaks the peptide linkage of Lactobacillus plantarum peptidoglycan. The lytic action spectra confirmed that Leuconostoc mesenteroides, a useful strain for the fermentation of Kimchi, is not lysed by the enzyme. The enzyme activity is inhibited by N-bromosuccinimide (NBS), which probably indicates the involvement of tryptophan residue in active site of the enzyme, and also inhibited by Ag^+. The amino acid composition analysis showed that the enzyme contains more acidic amino acids than basic ones, and composition of alanine, glycine, proline and tyrosines was very high.

Symposia ; Enzymes for Industrial Use : MOLECULAR STRUCTURE OF BACTERIOLYTIC ENZYME FROM ALAKALOPHILIC BACILLUS SP .

Dong Hoon Bai 한국생화학분자생물학회 (구 한국생화학회) 1994 추계학술대회집 Vol.- No.-

Leuconostoc mesenteroides 와 Lactobacillus bulgaricus 를 이용한 고점도 발효유의 제조

배동훈(Dong Hoon Bai),권경렬(Kyoung Yeol Kwon) 단국대학교 신소재기술연구소 1992 신소재 연구논집 Vol.2 No.-

Degradation of Limonene by Gamma Radiation for Improving Bioethanol Production

Bai, Hyoung-Woo,Hong, Sung Hyun,Park, Chul-Hong,Jang, Dong Min,Kim, Tae Hoon,Chung, Byung Yeoup The Korean Society for Applied Biological Chemistr 2014 Applied Biological Chemistry (Appl Biol Chem) Vol.57 No.1

Use of orange peel as a raw material for bioethanol production requires removal of its limonene content, which inhibits fermentation. Orange peel was pretreated using electron beam or gamma ray irradiation. Limonene content decreased in a dose-dependent manner, with approximately 60% reduction compared to the control after gamma irradiation at a dose of 800 kGy. However, electron beam irradiation did not demonstrate the same effectiveness. Therefore, gamma irradiation was deduced to be a promising pretreatment method for removing limonene from orange peel.

Generalized Higher- Order ε-unification and Higher-Order Logic Programming with Completion

배민오,최동훈 동덕여자대학교 1998 정보과학연구 Vol.2 No.-