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- 저자 : Jin-Hee Eum(엄진희) (검색결과 4 건)
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생쥐 배아의 유리화 동결에 동결액의 조성과 냉각속도의 영향
박재균,고영은,엄진희,원형재,이우식,윤태기,이동률,Park, Jae-Kyun,Go, Young-Eun,Eum, Jin-Hee,Won, Hyung-Jae,Lee, Woo-Sik,Yoon, Tae-Ki,Lee, Dong-Ryul 대한생식의학회 2010 Clinical and Experimental Reproductive Medicine Vol.37 No.4
목적: 유리화 동결액의 조성조절과 냉각속도 증진을 통한 동결보호제의 농도를 낮추는 전략을 통해 세포에 미치는 독성을 감소시켜 유리화 동결 및 융해 후 생쥐 배아의 생존율 및 발생률을 증진시키고, 궁극적으로 배아의 유리화 동결법을 개선하고자 하였다. 연구방법: 생쥐 배아와 포배기를 그리드를 이용한 유리화 동결법을 이용하여 동결/융해하였다. 동결액 내 ethylene glycol와 dimethylsulphoxide (DMSO)의 농도와 당의 농도를 조절하여 생쥐 배아의 융해 후 생존율과 발생률을 관찰하였고, 냉각속도의 증가와 동결억제제의 농도와의 상관관계를 포배기의 융해 후 생존율과 발생률에 따라 비교하였다. 또한 융해 후 배아를 대리모에 이식하여 산자를 생산함으로 냉각속도의 효율성을 알아보았다. 결과: EG를 단독으로 사용한 동결보존액 보다는 DMSO와 혼합된 동결보존액의 사용이 보다 유리하다는 결과를 얻을 수 있었다. 슬러시 질소에 의한 냉각속도의 증가가 동결보존의 대상의 상해를 줄여 유리화 동결의 효율성을 증진시키는 것으로 생각된다. 결론: 혼합된 동결보호제를 사용하였을 때 생쥐 배아의 유리화 동결 후 생존과 발생률이 증진되었다. 슬러시 질소를 이용한 유리화 동결의 도입은 냉각속도의 증가를 통해 기존 유리화 동결방법의 효율을 증진시켜 생존율과 융해후 발생률, 임신율 증진에 기여하였다. 또한 냉각속도의 증진은 유리화 동결의 필수요건인 고농도의 동결억제제에 대한 노출을 감소시킬 수 있었다. 이러한 노력은 생식력의 보전을 위한 유리화 동결법의 효율 향상에 기여할 것이다. Objective: Vitrification requires a high concentration of cyroprotectant (CPA) and an elevated cooling speed to avoid ice crystal formation. We have evaluated the effect of different combinations of cooling rate and CPA on embryonic integrity (developmental competence) in order to increase the efficiency of vitrification without impairing embryo viabilit. We hypothesized that the combination of CPA or the increase of cooling rates can reduce the concentration of toxic CPA for vitrification. As consequently, we performed experiments to evaluate the effect of various composition of CPA or slush nitrogen ($SN_2$) on the mouse embryonic development following vitrification using low CPA concentration. Methods: Vitrification of mouse embryos was performed with EM grid using liquid nitrogen ($LN_2$) or $SN_2$ and different composition of CPAs, ethylene glycol (EG) and dimethylsulfoxide (DMSO). After vitrification-warming process, their survival and blastocyst formation rates were examined. For analyzing long-term effect, these blastocysts were transferred into the uterus of foster mothers. Results: Survival and blastocyst formation rates of vitrified embryos were higher in EG+DMSO group than those in EG only. Furthermor, the group using $SN_2$ with a lower CPA concentration showed a higher survival of embryos and developmental rates than group using $LN_2$. Conclusion: The combination of EG and DMSO as CPAs may enhance the survival of mouse embryos and further embryonic development after vitrification. $SN_2$ can generate high survival and developmental rate of vitrified/warmed mouse embryos when a lower concentration of CPA was applied. Therefore, these systems may contribute in the improvement of cryopreservation for fertility preservation.
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체외수정 및 배아이식술에서 레이저를 이용한 보조부화술의 효용성에 대한 연구
이정현,한지은,김유신,원형재,조정현,곽인평,엄진희,박은아,최윤정,이동률,윤태기,Lee, Jung-Hyun,Han, Ji-Eun,Kim, You-Shin,Won, Hyung-Jae,Cho, Chung-Hyun,Kwak, In-Pyung,Eum, Jin-Hee,Park, Eun-A,Choi, Yoon-Jung,Lee, Dong-Ryul,Yoon, Tae-Ki 대한생식의학회 2008 Clinical and Experimental Reproductive Medicine Vol.35 No.3
목 적: 보조부화술이 적용되는 좋지 않은 예후를 보여주는 선별된 환자군을 대상으로 산성 용액을 이용한 AHA 방법과 레이저를 이용한 AHL 방법의 효용성을 비교하여, 보다 효과적으로 임신율과 착상률을 높일 수 있는 보조부화술 방법을 찾고자 하였다. 연구방법: 2006년 2월부터 9월까지 체외수정 시술을 시행한 환자 중 보조부화술이 필요한 328주기를 대상으로 산성용액을 이용한 AHA 방법 (180주기)과 ZILOS-tk 레이저를 이용한 AHL 방법 (148주기)으로 나누어 시행하였다. 보조부화술을 시행한 환자군은 환자의 나이가 38세 이상이거나 투명대의 두께가 $18{\mu}m$ 이상, 기저 FSH 농도가 15 mIU/ml이상, 체외수정 시술을 3번 이상 실패한 환자, 이식하는 배아의 상태가 양호하지 않은 환자들로 이상에 적용요인이 있으면 시행하여 무작위로 보조부화술 방법간에 환자들의 임상적 특징과 임신율과 착상률을 분석하였다. 결 과: 전체 보조부화술을 시행한 환자군에 AHL 방법과 AHA 방법간에 임신율 (42.6%, 63/148 vs. 33.3%, 60/180)과 착상률 (17.4%, 82/470 vs. 16.0%, 89/556)에 유의적 차이는 나타나지 않았다. 그러나 나이가 많은 환자군인 Group 1은 임신율 (37.0%, 20/54 vs. 18.7%, 14/75)과 착상률 (14.4%, 23/160 vs. 7.1%, 15/210)이 AHL 방법이 AHA 방법보다 유의적 (p<0.05)으로 높게 나타났다. 전체 환자군이나 선별된 각 군내에 보조부화술 방법간에 환자의 임상적 특징은 유의적 차이가 나타나지 않았다. 3번 이상 체외시술에 실패한 환자군 [Group 2: 43.8% (21/48)과 31.6% (25/79)], 투명대의 두께가 $18{\mu}m$ 이상인 환자군 [Group 3: 43.8% (32/73)과 34.1% (28/82)], 이식한 배아의 질이 양호하지 않은 환자군[Group 4: 25.0% (7/28)과 14.6% (6/41)]에서는 AHL 방법이 임상결과는 좋았으나 유의적 차이는 없었다. 결 론: 레이저를 이용한 AHL 방법이 나이가 많은 환자군과 3번 이상 체외수정 시술에 실패한 환자군에서 AHA방법에 비해 높은 임신율과 착상률을 나타내었다. 결론적으로, AHL을 이용한 보조부화술이 임상적으로 보다 효과적이고 안전한 방법이라고 사료된다. Objective: To evaluate efficacy of assisted hatching by laser (AHL) and acidified Tyrode solution (AHA) in selected groups of IVF-ET patients who have a poor prognosis. Methods: From February 2006 to September 2006, total of 328 IVF-ET cycles with advanced female age (${\geq}38$ years), recurrent implantation failure (${\geq}3$ cycles), thick zona (${\geq}17{\mu}m$), and/or poor quality of embryo were randomly divided into assisted hatching by acidified Tyrode solution (AHA, n=180) and the assisted hatching using the ZILOS-tk laser (AHL, n=148) groups. Clinical outcomes were analyzed and compared between AHA and AHL group based on the patient characteristics. Results: In all AHL and AHA group, there were no significant differences in pregnancy (42.6%, 63/148 vs. 33.3%, 60/180) and implantation rates (17.4%, 82/470 vs. 16.0%, 89/556) However, in advanced female age group (Group 1), pregnancy (37.0%, 20/54 vs. 18.7%, 14/75) and implantation rates (14.4%, 23/160 vs. 7.1%, 15/210) in AHL group were significantly (p<0.05) higher than those of AHA, although there was no difference in patient parameters of both groups. And, the clinical outcome of groups with recurrent implantation failure (Group 2), thick zona pellucida (Group 3) and poor quality embryo (Group 4) were improved in AHL compared to those of AHA: 43.8% (21/48) and 31.6% (25/79) in Group 2, 43.8% (32/73) and 34.1% (28/82) in Group 3, 25.0% (7/28) and 14.6% (6/41) in Group 4, but no significance. Conclusion: The AHL improved the pregnancy and implantation rates in patients with advanced female age and recurrent implantation failure when compared to outcomes achieved from AHA. Therefore, this AHL technique may be a efficient and safe method for patients with poor prognosis.
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