방사선조사에 의해 발생되는 세포고사에 대한 Cysteamine의 효과

최영민,박창교,조흥래,이형식,허원주,Choi, Young-Min,Park, Chang-Gyo,Cho, Heung-Lae,Lee, Hyung-Sik,Hur, Won-Joo 대한방사선종양학회 2000 Radiation Oncology Journal Vol.18 No.3

목적 : 방사선에 의한 세포고사의 경로와 방사선보호제의 일종인 cysteamine (${\beta}$-mercaptoethylamine)이 방사선에 의한 세포고사에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 대상 및 방법 : HL-60 세포주를 대상으로 대조군, 방사선조사군, cysteamine 전처치군(1 mM, 10 mM) 으로 나누어서 실험을 하였다. 방사선은 6 MV로 10 Gy 일회 조사하였고, cysteamine은 방사선조사 1시간 전에 처치하였다. 세포고사의 경로를 알아보기 위하여 대조군과 방사선조사군에서 Caspase딕의 활성도를 측정하였고, 세포고사에 대한 cysteamine의 영향을 알아보기 위하여 방사선조사 후 1.5, 3, 6, 24시간에서 각 실험군의 생존 세포 수, caspase-3 의 발현과 활성도, poly (ADP-rlbose) polymerase (PAHP)의 발현 등을 측정하여 비교하였다. 결과 : 세포사망수용체에 의한 세포고사의 발생과 관련이 있는 Caspase겨의 귿성도는 방사선조사에 영향을 받지 않았다(p>0.05). 생존 세포 수는 방사선조사 6시간 후부터 감소되었는데(p>0.05), 1 mM cysteamine 전처치군에서는 감소되지 않고 대조군과 비슷하게 유지되었다. 세포고사의 실행 단계라고 알려진 Caspase-3의 발현은 각 실험군들 사이에 차이가 없었으나, 활성도는 방사선조사 후에 증가되었고(P>0.05) 1 mM cysteamlne 전처치에 의해 증가가 감소되는 경향이었다. Caspase-3의 활성에 의해 발생되는 PARP 분해산물(24 kD)의 발현이 방사선조사 후에 관찰 되었는데, 1 mM cysteamine 전처치군에서는 발현의 감소가 관찰되었다. 결론 : 방사선에 의한 세포고사는 세포사망수용체에 의한 세포고사와는 다른 경로를 거치고, 1 mM cysteamine 전 처치는 방사선조사에 의한 세포고사의 발생을 억제하는 경향이 있는 것으로 생각된다. Purpose : To Investigate the pathways of radiation induced apoptosls and the effect of cysteamine (${\beta}$-mercaptoethyiamine), as a radioprotector, on it. Materials and Methods : HL-50 ceils were assigned to control, irradiated, and cysteamlne (1 mM, 10mM) pretreated groups. Irradiation was given In a single fraction of 10 Gy (6 MV x-ray) and cysteamine was administered 1 hour before irradiation. The activities of caspase-8 were measured in control and irradiated group to evaluate its relation to the radiation Induced apoptosis. To evaluate the role of cysteamine In radiation Induced apoptosis, the number of viable cells, the expression and activity of caspase-3, and the expression of poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) were measured and compared after irradiating the HL-60 celis with cysteamine pretreatment or not. Results : The intraceliular caspase-8 activity, known to be related to the death receptor induced apoptosis, was not affected by irradiation(p>0.05). The number of viable cells began to decrease from 6 hours after irradiation (p>0.05), but the number of viable cells In 1 mM cysteamine pretreated group was not decreased after irradiation and was similar to those in the control group. In caspase-3 analyses, known as apoptosis executioner, its expression was not different but its activity was Increased by irradiation(p>0.05). However, this Increase of activity was suppressed by the pretreatment of 1 mM cysteamine. The cleavage of PARP, thought to be resulted from caspase-3 activation, occurred after irradiation which was attenuated by the pretreatment of 1 mM cysteamine. Conclusion : These results show that radiation induced apoptotic process is somewhat different from death receptor induced one and the pretreatment of 1 mM cysteamine has a tendency to decrease the radiation-induced apoptosis in HL-60 cells.

Effects of Neuroleptics on the Opioid Receptor Binding in the Mouse Striatum

김수경,이성룡,박창교,Kim, Soo-Kyung,Lee, Seong-Ryong,Park, Chang-Gyo The Korean Society of Pharmacology 1994 대한약리학잡지 Vol.30 No.3

Our purpose was to gain insight into a possible modulatory role for ${\mu},\;{\delta},\;and\;{\kappa}$ opioid receptors by neuroleptics (chlorpromazine, thioridazine, haloperidol, sulpiride, and pimozide) in chronic morphine 5 mg/kg and 20 mg/kg treated mouse striatum. We attempted quantitative receptor assays using highly specific radioligands, $[^3H]\;DAGO\;([D-Ala^2,\;N-Mephe^4,\;Glycol^5]\;enkephalin)$, $[^3H]DPDPE\;([D-Pen^2,\;D-Pen^5]\;enkephalin)$ and $[^3H]\;DPN(diprenorphine)$ to measure the binding affinity in the experimental groups. The decrease of $[^3H]DAGO$ binding was potentiated by sulpiride and pimozide in the chronic morphine treatment (5 mg/kg and 20 mg/kg). The decrease of $[^3H]DPDPE$ binding was inhibited by chlorpromazine, thioridazine, haloperidol, sulpiride, and pimozide in chronic morphine treatment (5 mg/kg and 20 mg/kg). The decrease of $[^3H]\;DPN$ binding was significantly inhibited by chlorpromazine, thioridazine, sulpiride, and pimozide in chronic morphine 20 mg/kg treatment. $[^3H]\;DPN$ binding on the neuroleptics was antagonized by naloxone pretreatment in chronic morphine 20 mg/kg treatment. These findings suggest that neuroleptics influence opposing tonically active on the ${\delta},\;and\;{\kappa}$ opioid receptor compared with ${\mu}$ opioid receptor in the chronic morphine treated mouse striatum. 이 연구에서는 선조체에서 opioid 신경계와 dopamine 신경계의 상호 관계를 알아보기 위해서 morphine을 5m/kg, 20 mg/kg로 10일간 복강내 투여한 후 chlorpromazine, thioridazine, haloperidol, sulpiride, pimozide를 투여하였다. Opioid ${\mu},\;{\delta},\;{\kappa}$ 수용체의 binding의 변화를 관찰하고자 $[^3H]\;DAGO$, $[^3H]\;DPDPE$, 및 $[^3H]\;DPN$ binding assay를 하였으며, 그 결과 morphine (20 mg/kg) 장기 투여된 실험군에서 $[^3H]\;DAGO$, $[^3H]\;DPDPE$, 및 $[^3H]\;DPN$ 결합이 감소되었다. Morphine 20 mg/kg 장기 투여군에 chlorpromazine, thioridazine 주사시에는 morphine 5mg/kg 투여군에 비하여 $[^3H]\;DAGO$ 결합의 감소와, $[^3H]\;DPDPE$, 및 $[^3H]\;DPN$ 결합의 증가를 나타내었고, haloperidol 주사군은 $[^3H]\;DAGO$, $[^3H]\;DPN$ 결합의 감소, 및 $[^3H]\;DPDPE$ 결합의 증가를 나타내었다. Sulpiride, pimozide 주사군은 morphine 5 m/kg 투여군에 비하여 20m/kg 투여군에서 $[^3H]\;DAGO$, $[^3H]\;DPDPE$, 및 $[^3H]\;DPN$ 결합의 증가를 나타내었다. 이상의 결과로 보아 각 약물간의 opioid 결합에 대한 차이점은 있었으나, morphine 5mg/kg 투여군보다 20m/kg 투여군에서 $[^3H]\;DPDPE$ 및 $[^3H]\;DPN$의 결합이 증가의 경향을 보임으로써, 다량의 morphine을 투여했을 때 ${\mu}\;opioid$ 수용체에 비하여 ${\delta}와 ${\kappa}\;opioid$ 수용체가 더 활성화되는 것을 알 수 있었다.

1)방사선조사에 의해 발생되는 세포고사에 대한 Cysteamine의 효과

최영민(Young Min Choi),박창교(Chang Gyo Park),조흥래(Heung Lae Cho),이형식(Hyung Sik Lee),허원주(Won Joo Hur) 대한방사선종양학회 2000 Radiation Oncology Journal Vol.18 No.3

목 적 : 방사선에 의한 세포고사의 경로와 방사선보호제의 일종인 cysteamine (β-mecraptoethylamine)이 방사선에 의한 세포고사에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 대상 및 방법 : HL -60 세포주를 대상으로 대조군, 방사선조사군, cysteamine 전처치군(1 mM, 10mM)으로 나누어서 실험을 하였다. 방사선은 6 MV로 10 Gy 일회 조사하였고, cysteamine은 방사선조사 1시간 전에 처치하였다. 세포고사의 경로를 알아보기 위하여 대조군과 방사선조사군에서 caspase-8의 활성도를 측정하였고, 세포고사에 대한 cysteamine의 영향을 알아보기 위하여 방사선조사 후 1.5,3,6,24시간에서 각 실험군의 생존 세포 수, caspase-3의 발현과 활성도, poly(ADP -ribose) polymerase(PARP)의 발현 등을 측정하여 비교하였다. 결 과 : 세포사망수용체에 의한 세포고사의 발생과 관련이 있는 caspase-8의 활성도는 방사선조사에 영향을 받지 않았다(P>0.05). 생존 세포 수 는 방사선조사 6시간 후부터 감소되었는데(p>0.05), 1mM cysteamine 전처치군에서는 감소되지 않고 대조군과 비슷하게 유지되었다. 세포고사의 실행 단계라고 알려진 caspase-3의 발현은 각 실험군들 사이에 차이가 없었으나, 활성도는 방사선조사 후에 증가되었고(p>0.05) 1mM cysteamine 전처치에 의해 증가가 감소되는 경향이었다. Caspase-3의 활성에 의해 발생되는 PARP 분해산물(24 kD)의 발현이 방사선조사 후에 관찰되었는데, 1mM cysteamine 전처치군에서는 발현의 감소가 관찰되었다. 결 론 : 방사선에 의한 세포고사는 세포사망수용체 의한 세포고사와는 다른 경로를 거치고, 1 mM cysteamine 전처치는 방사선조사에 의한 세포고사의 발생을 억제하는 경향이 있는 것으로 생각된다. Purpose : To investigate the pathways of radiation induced apoptosis and the effect of cysteamine (β-mercaptoethylamine), as a radioprotector, on it. Materials and Methods : HL-60 cells were assigned to control, irradiated, and cysteamine (1 mM, 10mM) pretreated groups, Irradiation was given in a single fraction of 10 Gy (6 MV x-ray) and cysteamine was administered 1 hour before irradiation. The activities of caspase-8 were measured in control and irradiated group to evaluate its relation to the radiation induced apoptosis. To evaluate the role of cysteamine in radiation induced apoptosis, the number of viable cells, the expression and activity of caspase-3, and the expression of poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) were measured and compared after irradiation the HL-60 cells with cysteamine pretreatment or not. Result : The intracellular caspase-8 activity, known to be related to the death receptor induced apoptosis, was not affected by irradiation(p>0.05). The number of viable cells began to decrease from 6 hours after irradiation (p>0.05), but the number of viable cells in 1 mM cysteamine pretreated group was not decreased afger irradiation and was similar to those in the control group. In caspase-3 analyses, known as apoptosis executioner, its expression was not different but its activity was increased by irradiation(p>0.05). However, this increase of activity was suppressed by the pretreatment of 1mM crysteamine. The cleavage of PARP, thought to be resulted from caspase-3 activation, occurred after irradiation, which was attenuated by the pretreatment of 1mM cysteamine. Conclusion : these results show that radiation induced apoptotic process is somewhat different from death receptor induced one and the pretreatment of 1 mM cysteamine has a tendency to decrease the radiation-induced apoptosis in HL-60 cells.

마우스 선조체에서 Opioid 수용체 결합에 대한 Neuroleptics의 영향

김수경(Soo-Kyung Kim),이성룡(Seong-Ryong Lee),박창교(Chang-Gyo Park) 대한약리학회 1994 대한약리학잡지 Vol.30 No.3

Our purpose was to gain insight into a possible modulatory role for μ, δ, and κ opioid receptors by neuroleptics (chlorpromazine, thioridazine, haloperidol, sulpiride, and pimozide) in chronic morphine 5 mg/kg and 20 mg/kg treated mouse striatum. We attempted quantitative receptor assays using highly specific radioligands, [³H] DAGO ([D-Ala², N-Mephe⁴, Glycol⁵] enkephalin), [³H]DPDPE ([D-Pen², D-Pen⁵] enkephalin) and [³H] DPN(diprenorphine) to measure the binding affinity in the experimental groups. The decrease of [³H]DAGO binding was potentiated by sulpiride and pimozide in the chronic morphine treatment (5 mg/kg and 20 mg/kg). The decrease of [³H]DPDPE binding was inhibited by chlorpromazine, thioridazine, haloperidol, sulpiride, and pimozide in chronic morphine treatment (5 mg/kg and 20 mg/kg). The decrease of [³H] DPN binding was significantly inhibited by chlorpromazine, thioridazine, sulpiride, and pimozide in chronic morphine 20 mg/kg treatment. [³H] DPN binding on the neuroleptics was antagonized by naloxone pretreatment in chronic morphine 20 mg/kg treatment. These findings suggest that neuroleptics influence opposing tonically active on the δ, and κ opioid receptor compared with μ opioid receptor in the chronic morphine treated mouse striatum. 이 연구에서는 선조체에서 opioid 신경계와 dopamine 신경계의 상호 관계를 알아보기 위해서 morphine을 5m/kg, 20 mg/kg로 10일간 복강내 투여한 후 chlorpromazine, thioridazine, haloperidol, sulpiride, pimozide를 투여하였다. Opioid μ, δ, κ 수용체의 binding의 변화를 관찰하고자 [³H] DAGO, [³H] DPDPE, 및 [³H] DPN binding assay를 하였으며, 그 결과 morphine (20 mg/kg) 장기 투여된 실험군에서 [³H] DAGO, [³H] DPDPE, 및 [³H] DPN 결합이 감소되었다. Morphine 20 mg/kg 장기 투여군에 chlorpromazine, thioridazine 주사시에는 morphine 5mg/kg 투여군에 비하여 [³H] DAGO 결합의 감소와, [³H] DPDPE, 및 [³H] DPN 결합의 증가를 나타내었고, haloperidol 주사군은 [³H] DAGO, [³H] DPN 결합의 감소, 및 [³H] DPDPE 결합의 증가를 나타내었다. Sulpiride, pimozide 주사군은 morphine 5 m/kg 투여군에 비하여 20m/kg 투여군에서 [³H] DAGO, [³H] DPDPE, 및 [³H] DPN 결합의 증가를 나타내었다. 이상의 결과로 보아 각 약물간의 opioid 결합에 대한 차이점은 있었으나, morphine 5mg/kg 투여군보다 20m/kg 투여군에서 [³H] DPDPE 및 [³H] DPN의 결합이 증가의 경향을 보임으로써, 다량의 morphine을 투여했을 때 μ opioid 수용체에 비하여 δ와 κ opioid 수용체가 더 활성화되는 것을 알 수 있었다.

낫토균으로 발효한 발효울금의 투여가 마우스의 간 기능 및 혈중 지질 함량에 미치는 영향

강재구(Jae Ku Kang),강효진(Hyo Jin Kang),서지혜(Ji Hye Seo),김선옥(Sun Ok Kim),최정효(Jung Hyo Choi),조도연(Do Yeun Cho),박창교(Chang Gyo Park),이회영(Hoi Young Lee) 한국식품영양과학회 2009 한국식품영양과학회지 Vol.38 No.4

본 연구는 낫토균으로 울금을 발효함으로써 울금의 기호성 향상 및 낫토키나아제의 작용으로 울금의 체내이용율을 증가시켜 생리활성 기능이 증가하는지 알아보고자 연구하였다. 울금을 낫토균으로 발효시킨 결과, 칼슘과 아연의 경우 울금에 비하여 발효울금에서 각각 약 6배와 44배 증가를 보였고, 셀레늄의 경우에는 발효울금에서만 새롭게 검출되었다. 항산화 활성 비교실험 결과, 울금과 발효울금의 항산화 활성은 각각의 실험농도에서 비슷한 효과를 나타내었으나 발효울금이 울금보다 항산화 활성이 약간 높았다. 발효울금의 간 기능 개선효과에 미치는 영향을 사염화탄소로 간손상을 일으킨 마우스에서 실험한 결과, AST 및 ALT 효소활성의 유의적인 감소를 보였고(p<0.05) 특히 사염화탄소에 의해 야기된 간조직의 염증, 괴사 및 지방의 축적이 확연히 적어지는 등 정상군에 가깝게 간 손상이 회복되어 발효울금은 간 기능성 개선에서 울금보다 효과적이었다. 낫토균으로 발효한 발효울금의 혈중 지질 개선효과를 평가하기 위해 고지방(20% 지방) 식이로 유도된 마우스에서 발효울금 및 울금의 경구투여에 의한 혈중 지질 함량 변화를 평가한 결과, 고지방 식이에 의해 증가된 총 콜레스테롤과 LDL 농도를 유의적으로 감소시켰으며 HDL 콜레스테롤 농도는 유의하게 증가시켰다(p<0.05). 본 연구에서 울금 및 발효울금 모두 혈중지질을 효과적으로 개선하였으나, 발효울금의 경우 저농도 투여에 의해서도 혈중 지질 개선효과가 나타나 울금에 비해 상대적인 우수성을 나타내었다. 또한 낫토균에 의한 울금의 발효가 울금 특유의 이취에 의한 쓴맛 및 신맛을 유의하게 개선하는 것으로 평가되어 적절한 제품화 과정을 거친다면 기능뿐만 아니라 소비자의 기호를 향상시킬 수 있는 건강 기능성 식품개발에 기여할 것으로 생각된다. The effects of turmeric and fermented turmeric by Bacillus natto on antioxidant activities, liver function recovery of acute hepatotoxicity mice, and serum lipid parameters in high fat diet fed mice were investigated. In the results of antioxidant activity by DPPH method, fermented turmeric had higher antioxidative activity than turmeric. Acute hepatotoxicity was induced by 0.5 ㎖ of carbon tetrachloride (CCl₄) per kg of mice. Unlike turmeric, fermented turmeric significantly reduced the levels of aspartate aminotransferase (AST) and alanine aminotransferase (ALT) after 5 days compared to the controls with 0.5% methyl cellulose (p<0.05). In addition, higher recovery of liver damage by CCl₄ was observed in mice with fermented turmeric than with turmeric. High fat (20%) diet fed mice were divided into 4 groups to investigate the effects of turmeric and fermented turmeric on serum lipid parameters: C (vehicle), TuL (low dose (80 ㎎/㎏) with turmeric), TuH (high dose (160 ㎎/㎏) with turmeric), FTuL (low dose with fermented turmeric), and FTuH (high dose with fermented turmeric). The levels of LDL-cholesterol and HDL-cholesterol were significantly reduced and increased in FTuL, FTuH and TuH groups compared to the C group, respectively. However, there was no significant change in triglyceride levels by either turmeric or fermented turmeric compared to those by control. Collectively, these results strongly suggest that fermented turmeric by Bacillus natto could be used as a functional food for enhancement of health with better consumer acceptance.

심근 허혈-재관류 손상에 미치는 β 아드레날린성 수용체 봉쇄약물의 영향

김수경,이성룡,박창교 啓明大學校 醫科大學 1995 계명의대학술지 Vol.14 No.3

The effects of β adrenoceptor blockers(metoprolol, acebutolol, and atenolol) on the biochemical changes occurring following ischemia(60min) and reperfusion(20min) were examined in the isolated Langendorff perfused rat heart after chronic adriamycin(1㎎ /㎏ /day, i. p. for 4wks) treatment. The purpose of this study was to investigate whether the protections of βadrenergic blockers would be involved in ischemia-reperfusion injury of chronic adriamycin treated rat heart. The βadrenoceptor blockers showed the decrease of lactate dehydrogenase(LDH) activity and malondialdehyde(MDA) content and the no significance of superoxide dismutase(SOD) activity. Metoprolol and atenolol exhibited the increase of LDH activity in dose dependent. Our results indicate that the significant protection is not observed by increasing the doses of metoprolol. acebutolol, and atenolol and appear to be independence on the doses of β adrenoceptor blockers in chronic free radical injured rat heart. Acebutolol which has the membrane stabilizing activity shows relative protective effect on the cardiac damage comparing with metoprolol and atenolol.

간질 발작시에 나타나는 조기유전자 발현의 변화

박창교,김수경 啓明大學校 醫科大學 1996 계명의대학술지 Vol.15 No.3

Cellular immediate early gene expressions have been demonstrated to be modulated in response to a variety of seizure-inducing stimuli. In this study, two immediate early genes, c-fos and c-myc were investigated in response to the convulsants such as kainic acid(KA, 10mg/kg, ip). pentylenetetrazole(PTZ, 40mg/kg, ip), and N-methy1-D-aspartate(NMEA, 60mg/kg, ip) in three regions of rat brain : cerebral cortex, striatum, and brain stem. The KA and PTZ treatment slightly increased the transcription of c-fos in cerebral cortex, striatum, and brain stem. The MK-801 or baclofen pretreatment did not block the elevated expression of c-fos by KA and PTZ treatment. The NMDA treatment showed a reversal response of KA and PTZ treatment. The c-myc expression did not show a significant change in each of convulsant treatment groups and MK-801 or baclofen pretreatment did not exhibit considerable differenes. Therefore, c-fos could be one of the first seizure-related genes expressed in a cascade of events underlying different post-translational products, which result in diverse functional consequences depending on the brain sites.