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- 저자 : 지희숙 ( Hee Sook Jee ) (검색결과 3 건)
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보리발효추출물로부터 분리한 다당의 대식세포 활성화 및 신호 전달
김한울(Han Wool Kim),지희숙(Hee Sook Jee),신광순(Kwang-Soon Shin) 한국식품과학회 2018 한국식품과학회지 Vol.50 No.5
보리는 높은 비율로 식이섬유를 함유하고 있어, 일반적으로 영양학적으로는 전곡 형태로의 섭취가 추천되고 있지만, 조직감과 소화율을 고려하여 발효물 형태의 소비가 바람직한 것으로 판단되고 있다. 본 연구는 효소당화 후, 효모 및 유산균 발효를 거쳐 조제한 보리발효물로부터 조다당 BF-CP를 분리하고, 대식세포에 대한 면역증강 효과 및 세포 내 신호전달을 규명하여 기능성 소재로의 이용방안을 모색하기 위해 계획되었다. BF-CP 획분의 일반화학적 특성을 분석한 결과 70.7% 글루코스 11.4% 자일로스 및 9.0% 아라비노스를 포함하여 91.1%의 중성당으로 이루어진 중성다당이었다. BF-CP는 RAW 264.7 대식세포주에서 농도의존적으로 IL-6, TNF-α와 같은 사이토카인 및 NO의 생산능을 유도하는 등 높은 대식세포 활성능을 나타냈다. 또한 qPCR 분석을 통해, BF-CP 획분을 대식세포주에 처리하였을 때, 처리 농도에 비례하여 IL-6, TNF-α 및 iNOS의 mRNA 유전자 발현을 증가시킴을 확인할 수 있었다. 한편 Western blot을 활용한 신호전달 단백질 추적실험에서 BF-CP 획분을 대식세포주에 처리하였을 때, JNK, ERK 및 p38과 같은 MAPK 경로와 NF-κB 경로의 관련 단백질을 인산화시킴이 확인되었으며 그 활성은 BF-CP 농도에 의존적이었다. 이상의 결과로부터 보리발효물 유래 다당 BF-CP는 MAPK와 NF-κB 경로를 통해 대식세포를 활성화시키며, 이를 통하여 NO, IL-6 및 TNF-α와 같은 면역활성화 관련 물질의 생산을 높은 비율로 유도시킨다는 것을 최종 확인할 수 있었다. Barley has nutritional benefits due to its high dietary fiber content; therefore, the intake of whole barley grains is recommended. However, barley is often consumed in the fermented form because of the improved texture and digestibility. The present study was designed to elucidate the intracellular signaling pathway for macrophage activation by the polysaccharide BF-CP from fermented barley. BF-CP is a neutral polysaccharide, composed of neutral sugars, including glucose (70.7%), xylose (11.4%), and arabinose (9.0%). BF-CP exhibited macrophage-stimulatory activity by inducing the production of interleukin (IL)-6, tumor necrosis factor (TNF)-α, and nitric oxide in RAW 264.7 macrophages. Further, BFCP treatment strongly increased the IL-6 and TNF-α gene expression in a concentration-dependent manner. Signal transduction experiments using immunoblotting showed that BF-CP phosphorylated mitogen-activated protein kinases (MAPKs), such as c-Jun N-terminal kinase, extracellular signal-regulated kinase, and p38, and nuclear factor (NF)-κB, in RAW 264.7 cells in a concentration-dependent manner. These results suggest that BF-CP activates the macrophages via MAPK and NF-κB pathways, and also induces an increase in the production of cytokines.
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Aspergillus usamii KCTC 6954에 의한 ginsenoside Rb1로 부터 의약용 소재인 compound K로의 생물학적 전환
조미나 ( Mi Na Jo ),정지은 ( Ji En Jung ),윤현주 ( Hyun Joo Yoon ),장경훈 ( Kyung Hoon Chang ),지희숙 ( Hee Sook Jee ),김기태 ( Kee Tae Kim ),백현동 ( Hyun Dong Paik ) 한국미생물생명공학회(구 한국산업미생물학회) 2014 한국미생물·생명공학회지 Vol.42 No.4
본 연구는 인삼의 주요성분인 ginsenoside Rb1으로부터 보다 높은 생리기능성을 갖는 것으로 알려져 있는 compound K를 생산하기 위하여 Aspergillus usamii KCTC 6954에서 유래된 β-glucosidase를 사용하여 생물전환을 실시하였다. 15일 동안의 배양 중, 효소활성 측정은 ρ-nitrophenyl-β-glucopyranoside를 기질로 하여 분해 생성되는 ρ-nitrophenol (ρNP)을 비색계로 측정함으로써 실시되었다. 그 결과로서, 균주의 성장 속도는 접종 후 6일 후 최대로 나타났으며 이때의 β-glucosidas 활성도는 175.93 μM ml-1 min-1로 나타났다. 또한 효소 반응의 최적 조건은 pH 6.0 이내에서는 60oC인 것으로 나타났다. 배양 중 ginsenosides 분석 결과, 배양 9일 후에는 Rb1는 Rd로 전환되고 15 days 후에는 compound K로 순차적으로 전환되는 것으로 나타났다. 효소반응에 있어서는 Rb1는 1시간 이내에 ginsenoside Rd로 전환되었고 8시간 이후에 최종산물인 compound K가 측정되었다. 본 연구결과로부터 Rb1으로부터 주요 생물학적 전환 경로는 Rb1→Rd→F2→compound K로 나타났으며 이는 차후 Rd나 compound K와 같이 강한 생리기능성을 갖지만 자연에 미량 존재하는 물질의 대량생산에 응용될 수 있을 것으로 기대된다. β-Glucosidase from Aspergillus usamii KCTC 6954 was used to convert ginsenoside Rb1 to compound K, which has a high bio-functional activity. The enzymatic activities during culturing for 15 days were determined using ρ-nitrophenyl-β-glucopyranoside. The growth rate of the strain and the enzymatic activity were maximized after 6 days (IU; 175.93 μM ml-1 min-1). The activities were maximized at 60oC in pH 6.0. During culturing, Rb1 was converted to Rd after 9 d and then finally converted to compound K at 15 d. In the enzymatic reaction, Rb1 was converted to the ginsenoside Rd within 1 h of reaction time and compound K could be detected after 8 h. As a result, this study demonstrates that Rb1→Rd→F2→compound K is the main metabolic pathway catalyzed by β-glucosidase and that β-glucosidase is a feasible option for the development of specific bioconversion processes to obtain minor ginsenosides such as Rd and compound K.
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Streptobacillus sp.가 생산하는 pullulanase에 관한 연구
오두환,지희숙,최형택,신원철,유주현 연세대학교 산업기술연구소 1986 논문집 Vol.18 No.2
A bacterium with the highest pullulanase activity was isolated from the soil and identified as Streptobacillus sp. Y-716. The optimum culture condition of Streptobacillus sp. for the production of pullulanase was as follows; 1.2%(w/v)soluble starch, 0.7%(w/v) CH₃COONH₄, 0.05%(w/v) MgSO₄7 H₂O, 0.01%(w/v)FeSO₄7H₂O, at 30℃, for 48 hrs. The pullulanase from the culture broth of Streptobacillus sp. Y-716 was purified about 46 fold by ammonium sulfate precipitation, dialysis. DEAE-cellulose and Sephadex G-200 column chromatography. The purified enzyme was stable between pH 5.0 and pH 7.5. It was inactivated rapidly above 35℃. The Km value and Vmax of the purified enzyme were 0.0137mg/m/ and 0.666μm/min. on pullulan, respectively.
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