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Ferric iron reductase activity of LuxG from Photobacterium leiognathi
이의호,남기석,이선광,오동현,이찬용,Lee, Eui Ho,Nam, Ki Seok,Lee, Seon Kwang,Oh, Eugeney,Lee, Chan Yong The Microbiological Society of Korea 2016 미생물학회지 Vol.52 No.4
본 연구에서는 발광 세균에 존재하는 LuxG 단백질의 효소학적 성질을 알아내기 위하여 Photobacterium leiognathi ATCC 25521의 luxG 유전자를 중합효소연쇄반응으로 증폭시켜 T5 프로모터와 6X His-tag 시스템을 지닌 pQE 벡터에 삽입시킨 재조합플라스미드를 제조하여 대장균에 형질전환 후 과발현시켜 단백질을 분리, 정제 하였다. 정제된 단백질의 효소학적 실험 결과, 이 단백질은 FMN과 NADPH 기질에 대한 ferric iron reductase의 기능을 갖고 있음을 확인하였으며 이들 기질에 대한 효소 활성도 상수 $K_m$ 및 $V_{max}$ 값을 결정하였다. In order to identify the biochemical characteristics of LuxG, the luxG gene from bioluminescence bacteria of Photobacterium leiognathi ATCC 25521 was isolated by PCR-Amplification and inserted into pQE30 vector containing the T5 promoter and 6X His-tag system. The resulting recombinant plasmid was transformed into Escherichia coli to over-express the luxG gene and purify the gene product. The purified LuxG protein demonstrated ferric iron reductase activity and the kinetic parameters of $K_m$ and $V_{max}$ for FMN as well as the NADPH substrates of ferric iron reductase were determined, respectively.
이의호,로버트 포쿠,로이 트엔 응구엔,이찬용,Lee, Euiho,Pokoo, Robert,Nguyen, Loi Thuan,Lee, Chan Yong The Microbiological Society of Korea 2017 미생물학회지 Vol.53 No.4
루신-대응 조절 단백질(Lrp)은 18.8 kDa의 분자량을 갖는 글로벌 조절 단백질로서 대장균과 같은 장내세균과에서 많은 대사작용 오페론의 기능적 활성도를 조절한다. 단백질의 4차 구조를 규명하기 위한 목적으로 Lrp단백질 코드하는 유전자가 삽입된 재조합 플라스미드 pQE vector를 발현시킨 6 ${\times}$ His-tag Lrp 야생형과 $^3H$로 표지된 Lrp를 분리 정제한 후 cross linker들인 glutaraldehyde, 1,2,3,4-diepoxy-butane (DEB), ethylene glycol bis (succinimidyl succinate) (EGS)으로 cross link 실험을 수행하여 Lrp가 $0.3{\mu}M$ 이하의 낮은 농도에서나 $5{\mu}M$의 높은 농도에서 이량체, 사량체, 육량체, 팔량체로 존재할 수 있음을 확인하였다. Leucine-responsive regulatory protein (LRP) is a regulatory protein of molecular weight 18.8 kDa and is widely known to regulate many metabolic and functional activities of operons in Escherichia coli. The gene for Lrp from Escherichia coli in pQE system of 6 ${\times}$ His-tagging was expressed and $^3H$-labeled protein, as well as the wild type Lrp, was purified. The crosslink experiments were performed to analyze the quaternary structure of Lrp at high of $5{\mu}M$ and at low concentrations below $0.3{\mu}M$ with cross linkers, such as glutaraldehyde, 1, 2, 3, 4-diepoxy-butane (DEB), and ethylene glycol bis (succinimidyl succinate) (EGS). In the experiments, we found that the Lrp protein can be formed higher conformation states of tetramer, hexamer, octamer, as well as dimeric state when incubated with the above cross linkers.
카복시 말단 아미노산들이 제거된 돌연변이 루신 대응 조절 단백질 변이체를 코드 하는 유전자가 포함된 재조합 플라스미드의 제조
이의호 ( Eui-ho Lee ),김재성 ( Jae-seong Kim ),이슬기 ( Seul-gi Lee ),이찬용 ( Chan Yong Lee ) 충남대학교 기초과학연구원 2021 충남과학연구지 Vol.38 No.1
Leucine-responsive regulatory protein (Lrp) is a global regulator involved in modulating a variety of metabolic functions, including the catabolism and anabolism of amino acids as well as pili synthesis. In addition, there is growing evidences that Lrp may play an important role when cells make transition between rich and lean nutritional conditions. In this report, as a starting point of the study on the biochemical characteristics of Lrp which provide a good example that shows how bacteria adapt to nutrient limitation and environmental stress, we described the construction of recombinant plasmids with the truncated lrp genes deleted in C-terminal amino acids of Lrp.
이의호(Lee, Eui Ho) 한국디지털디자인협의회 2015 디지털디자인학연구 Vol.15 No.2
본 논문은 보다 효율적이고 차별화 된 광고제작을 위하여 이미지를 활용한 광고콘텐츠 제작 모델 구축을 시도하였다. 과잉으로 공급되는 콘텐츠 정보 속에서 광고콘텐츠제작 환경에 부합하는 합리적이고 효율적인 모델 연구를 위해 우선적으로 송신자에서 수신자로 정보가 전달되는 기본적인 커뮤니케이션 구조를 문헌연구 통해 고찰 하였고 그 과정에서 송신자와 수신자 사이에 소통장애를 유발하는 요소들을 찾아내었다. 그로인하여 여러 학자들의 고유한 연구를 종합한 미완의 커뮤니케이션 이론을 토대로 이미지를 활용하여 메시지를 전달하는 광고콘텐츠 제작 모델이 제시되었다. 그렇게 도출된 이미지를 활용한 광고콘텐츠 제작 모델방식의 활용 가능성을 위하여 현재 제작되어 활용되고 있는 현대 자동차 광고를 위주로 적용사례를 분석하고 선호도 조사를 통하여 본 논문이 제시한 모델의 필요성을 입증하였다. 본 논문에서 제시된 모델은 콘텐츠 제작 실무에서 활용할 수 있고 더불어 이 모델은 제작 후 검증과정에서 송신자가 수신자에게 전달하는 메시지가 충실히 전달되었는지 검증하는 툴로서도 사용할 수 있다. In this thesis, we try to build a more efficient and advertising content production model using the image for a differentiated commercial production . Discussion at the sender primarily to study the rational and efficient model that meets the advertising content authoring environment on the content information in the literature supplied in excess over the basic communication structure in which the information is transmitted to the receiver was in the process communication between sender and receiver found out the factors that caused the fault . Whereby the advertising content production model to deliver the message by utilizing the image on the basis of a comprehensive communication theory incomplete unique study of the various scholars have been proposed . Analysis of modern car ads are currently being made t o take advantage of the availability of ad content creation model approach utilizing image derived mainly applied in practice and that proved the need for a model of this thesis is presented through a preference . In addition to model presented in this thesis can be utilized in making a working model can be used as a tool that can be verified in the verification process after making sure that the sender of a message sent to the receiver faithfully delivered.