Alloxan 당뇨쥐(제1형 당뇨병 모델)와 OLETF 쥐(제2형 당뇨병 모델)에서 녹차 추출물의 고혈당 억제 효과

이병래,고기오,박평심,Lee, Byoung-Rai,Koh, Ki-Oh,Park, Pyoung-Sim 한국식품영양과학회 2007 한국식품영양과학회지 Vol.36 No.6

녹차 추출물이 당뇨병의 고혈당에 미치는 영향을 알아보기 위하여 1형 당뇨병 모델인 alloxan 당뇨쥐와 2형 당뇨병모델인 OLETF 쥐에 녹차 추출물을 4주간 투여하면서 혈당을 측정하여 관찰하였다. 녹차 추출물 투여 후 1주, 2주, 3주 및 4주째에 꼬리 정맥에서 혈당을 측정한 결과 alloxan 당뇨쥐는 대조군에 비하여 각각 혈당이 161, 176, 177 및 181 mg/dL가 감소되었고, OLETF 쥐는 녹차 추출물 투여군이 대조군에 비하여 각각 28, 33, 38 및 28 mg/dL가 감소되어, 녹차 추출물 투여로 1형 당뇨병인 alloxan 당뇨쥐와 2형 당뇨병인 OLETF 쥐에서 모두 투여 1주일째부터 혈당의 증가 둔화가 나타나서 4주째까지 지속되었다. 녹차 추출물이 당뇨쥐의 식이섭취량 및 체중에 미치는 영향을 알아보기 위하여 실험동물에 녹차 추출물을 투여한 후 1주일 간격으로 식이소모량과 체중을 4주까지 측정한 결과, 식이소모량은 alloxan당뇨쥐와 OLETF 쥐에서 모두 대조군과 녹차 추출물 투여군 사이에 변화가 없었다. 녹차 추출물 투여 당뇨쥐에서혈청 중성지질량의 변화를 관찰한 결과 alloxan 당뇨쥐와 OLETF 쥐에서 모두 녹차 추출물 투여로 중성지질량의 변화가 없었다. 녹차 추출물 투여로 인한 조직세포 손상정도를 측정하기 위하여 alloxan 당뇨쥐와 OLETF 쥐를 대조군과 녹차 추출물 투여군으로 나누어 4주간 사육한 후 혈청 AST 활성도를 측정한 결과 녹차 추출물 투여로 혈청 AST 활성도 변화는 관찰되지 않았다. 이상의 실험 결과로 녹차 추출물을 당뇨병 쥐에 경구투여하면 혈당증가 억제효과가 나타나는데, 녹차 추출물의 혈당증가 억제효과는 1형이나 2형당뇨병 등 당뇨병의 형태와 상관없이 작용할 수 있는 것으로생각된다. 따라서 녹차 추출물은 당뇨병 치료를 위한 우수한 식사요법 보조제로 개발될 수 있을 것으로 기대된다. 또한 녹차 추출물에 함유된 혈당강하작용 물질의 검색과 작용 기전, 특성에 대한 연구가 계속된다면 우수한 혈당강하작용을 가진 물질이 개발될 수 있을 것으로 추측된다. This study was performed to investigate the antihyperglycemic effect of green tea extracts (GTE) in diabetic rats. Experimental animals used were alloxan-induced diabetic Sprague-Dawley (SD) rats; as a model of type 1 diabetes mellitus and Otsuka Long Evans Tokushima fatty (OLETF) rats, and as a model of type 2 diabetes mellitus. Animals were randomly assigned either to continue the ad libitum diet or begin a green tea extracts (GTE) contained diet. GTE extracted from green tea was supplemented in the diet (2%). Body weight, food intake, and blood glucose concentration were recorded for 4 weeks. Animals were killed and glucose, triglyceride, and asparate aminotransferase (AST) were analysed in blood. Food intake was not affected by GTE in both alloxan.induced diabetic and OLETF rats but body weight was slightly decreased by GTE in OLETF rats. The blood glucose concentration was markedly decreased by GTE supplementation in both alloxan-induced diabetic and OLETF rats; however, triglyceride and AST levels in serum of GTE treated animals were not changed. This study shows that GTE beneficially modulate blood glucose concentration in diabetic animals. Dietary supplementation with GTE could potentially contribute to nutritional strategies for the treatment of diabetes mellitus.

흰쥐 인슐린종세포에서 고농도 포도당의 Alloxan 독성 증강 효과

이병래(Byoung-Rai Lee),차종희(Jong-Hee Cha),박재윤(Jae-Yoon Park),고춘남(Choon-Nam Koh),박평심(Pyoung-Sim Park) 한국식품영양과학회 2000 한국식품영양과학회지 Vol.29 No.5

고농도 포도당은 산화적 세포손상을 유발할 수 있는데 본 실험에서는 RINm5F 세포에서 고농도 포도당의 노출시간에 따른 SOD 동종효소 활성도를 측정한 결과 고농도 포도당에 3일간 배양한 세포에서 total SOD 활성도는 대조군과 차이를 나타내지 않았으나, CuZn-SOD 활성도가 25%가 감소되었고, Mn-SOD 활성도는 56%가 증가되었고, 21일간 배양한 RINm5F 세포에서는 total SOD 활성도는 34%, CuZn-SOD는 26%, Mn-SOD는 49%의 효소 활성도가 각각 증가되었다. 비변성 폴리아크릴아마이드겔 전기영동을 시행하여 효소활성도을 염색한 결과도 고농도의 당에서 3일간 배양한 세포의 CuZn-SOD 활성은 대조군에 비하여 저하되었으나, Mn-SOD의 활성은 증가되었고, 21일간 배양한 세포의 CuZn-SOD와 Mn-SOD 활성은 모두 증가되었다. RT-PCR을 시행한 결과 고농도 포도당에서 3일간 배양한 세포의 CuZn-SOD mRNA 량은 대조군과 차이가 없었고, Mn-SOD mRNA량은 증가되었으며, 21일간 배양한 세포에서는 CuZn-SOD와 Mn-SOD mRNA 모두 대조군보다 증가되었다. 고농도 포도당에서 3일간 배양한 RINm5F 세포는 alloxan에 대한 감수성이 더 증가되고, CuZn-SOD 억제제인 DDC도 alloxan의 독성을 증가시키는 것으로 나타났다. 따라서 고농도 포도당에 RINm5F 세포를 단기간 배양하면 CuZn-SOD 활성이 감소되는데, 이는 세포의 산화적 손상에 대한 감수성이 더 증가되는 요인이 될 것이며, 장기간 배양하면 항산화효소의 생성량이 증가되어 효소 활성도가 증가되는 것으로 추정된다. Reactive oxygen species are produced under diabetic conditions and possibly cause various forms of tissue damage in patients with diabetes mellitus. The aim of this study was to examine the effects of high glucose on the alloxan-induced beta cell injury. The insulinoma (RINm5F) cells were cultured either with high glucose (22.2 mM) or normoglucose (5.6 mM) in RPMI 1640 media for 3 days. The SOD activities were determined by spectrophotometric assay and nitroblue tetrazolium (NBT) stain. The effects of high glucose on the cytotoxicity of alloxan were also investigated in RINm5F cells and the cells viability were determined by 3-(4,5-dimethylthiazolyl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) methods. Results showed that the CuZn-SOD activity was decreased but Mn-SOD activity was increased significantly in RINm5F cells cultured with high glucose (22.2 mM) media. The cytotoxicity of alloxan was increased by high glucose compared with normoglucose in RINm5F cells. Diethyl-dithiocar- barmate (DDC), as inhibitor of CuZn-SOD, also potentiate the alloxan-induced cytotoxocity in RINm5F cells. These results suggest that, in RINm5F cells, short term culture with high glucose media decreases CuZn-SOD activity and the decreased activity of CuZn-SOD may be one of the causative factors of beta-cell injury induced by high glucose.

대장암(CT 26) 생쥐에서 녹차추출물 음용에 의한 시스플라틴 항암작용 증강효과

이병래(Byoung-Rai Lee),박평심(Pyoung-Sim Park) 한국식품영양과학회 2012 한국식품영양과학회지 Vol.41 No.8

Green tea intake is known to have preventive effects against cancer. In this study, we evaluated the tumor suppressive effects of dietary green tea extracts (GTE) as a modulator on cisplatin in an established colon cancer mouse model. The cisplatin-induced cytotoxicity was determined with cell viability of the mouse colon cancer cell line (CT26) in vitro. The influence of GTE on the anti-tumor activity of cisplatin was evaluated by measuring tumor size with digital calipers in mice bearing CT26 colon carcinomas. The CT26 cell viability decreased to 93% at a 20 μg/mL concentration of cisplatin. However, cell viability decreased to 15% with a combination of 20 μg/mL cisplatin and GTE (75 μg/mL). There were no apparent changes in cisplatin-induced cytotoxicity with GTE and epigallocathechin gallate (EGCG) treatments. Tumor size decreased in dietary GTE combining intra-peritoneal cisplatin-injected tumors bearing mice compared with cisplatin or GTE alone administered to tumor-bearing mice. These experiments showed that dietary GTE has a potentiating effect on the cisplatin anti-tumor activity of an established mice colon cancer model. Therefore, the GTE may be a candidate for modulators in anticancer treatments with cisplatin.

식이 제한 급여가 OLETF 흰쥐의 혈청 지질량에 미치는 영향

이병래(Byoung-Rai Lee),차종희(Jong-Hee Cha),박재윤(Jae-Yoon Park),배학연(Hack-Yeon Bae),고춘남(Choon-Nam Koh),박평심(Pyoung-Sim Park) 한국식품영양과학회 2001 한국식품영양과학회지 Vol.30 No.6

본 실험은 식이 제한 급여에 따른 비만형 당뇨병 환자의 체중 및 혈중 지질량의 변화에 대한 연구의 일환으로 사람의 비만형 당뇨병과 유사한 병리소견을 나타내는 OLETF 흰쥐를 이용하여 자유급식군, 식이 급여량 20% 제한군과 식이 급여량 40% 제한군으로 나누어 12주간 사육한 후 체중과 혈당, 혈청 콜레스테롤 및 중성지질량을 측정하여 식이 제한 급여에 따른 혈청 지질량의 변화를 관찰하였다. LETO 흰쥐에서 자유급식군은 12주 후 체중이 41% 증가되었으나 식이 급여량 20% 제한군은 22%, 식이 급여량 40% 제한군은 10%의 체중 증가를 나타냈고, OLETF 흰쥐에서 자유급식군은 24%, 식이 급여량 20% 제한군은 10%, 식이 급여량 40% 제한군은 -2%의 체중 증가를 나타냈다. 혈당량은 LETO 흰쥐에서 식이 급여량 20% 제한군은 혈당량이 감소되지 않았으나, 식이 급여량 40% 제한군은 12% 감소되고, OLETF 흰쥐 혈당량은 식이 급여량 20% 제한군은 15%, 식이 급여량 40% 제한군은 20%가 감소되었다. 혈청 중성지질량은 LETO 흰쥐에서 식이 급여량 20% 제한군은 24%, 식이 급여량 40% 제한군은 27%가 감소되었고, OLETF 흰쥐에서는 식이 급여량 20% 제한군은 32%, 식이 급여량 40% 제한군은 37% 정도가 각각 감소되었다. 혈청 총 콜레스테롤량은 LETO 흰쥐에서는 자유급식군, 식이 급여량 20% 제한군과 식이 급여량 40% 제한군에서 모두 차이를 나타내지 않았고, OLETF 흰쥐에서는 식이 급여량 20% 제한군은 15%, 식이 급여량 40% 제한군은 23% 정도가 감소되었다. HDL-콜레스테롤량은 LETO 흰쥐에서 식이 급여량 20% 제한군은 34%, 식이 급여량 40% 제한군은 43%가 증가되었다. 이상의 실험결과로서 식이 제한 급여에 의한 체중, 혈당, 혈청 지질량의 변화가 OLETF 흰쥐에서 LETO 흰쥐에서 보다 더 유의한 것으로 나타나서, 식이제한 급여에 의한 혈청 중성지질량과 혈청 총콜레스테롤 및 HDL-콜레스테롤량의 변화는 당뇨병에서 더 큰 변화가 유발되는 것으로 추측된다. To determine the effects of dietary restriction on obese type 2 diabetes we measured body weight, blood glucose and serum lipid level in dietary restricted Otsuka Long Evans Tokushima Fatty (OLETF) rats. OLETF rats (obese diabetic rats) and LETO rats (control rats) were grouped into 3 groups; control (free feed) group, 20% dietary restricted (20% DR) group and 40% dietary restricted (40% DR) group. Body weight of rats was measured every weeks and the level of glucose, triglyceride (TG), total cholesterol (TC) and HDL-cholesterol in blood of rats were also determined at 12 weeks after dietary restriction. Body weight of control, 20% DR and 40% DR groups were increased by 41%, 20% and 10%, respectively in LETO rats and by 24%, 10% and -2%, respectively in OLETF rats. Blood glucose level of LETO rats were decreased by 12% on 40% DR compared to control group but the differences between control group and 20% DR group was not observed. The blood glucose level of OLETF rats were decreased by 20% in 40% DR group and by 15% in 20% DR group. The levels of blood triglyceride in 20% DR and 40% DR group were decreased by 20%, 15% in LETO rats and by 37%, 32% in OLETF rats, respectively. Total cholesterol level was not changed by dietary restriction in LETO rats, but significant changes were observed in OLETF rats by both 20% and 40% dietary restriction. HDL-cholesterol levels were also increased by dietary restriction in both LETO and OLETF rats. These results suggested that body weight and blood glucose, serum triglyceride and total cholesterol levels were decreased by dietary restriction and these changes are more susceptive in diabetic rats than non-diabetic animals.

카테킨과 퀘르세틴 병합 투여가 당뇨병 흰쥐의 간 당질 대사에 미치는 영향

이병래(Byoung Rai Lee),박평심(Pyoung Sim Park) 한국식품영양과학회 2022 한국식품영양과학회지 Vol.51 No.1

사람 폐암 세포주에서 시스플라틴이나 독소루비신의 세포독성에 미치는 녹차 추출물의 영향

이병래(Byoung-Rai Lee),박재윤(Jae-Yoon Park),박평심(Pyoung-Sim Park) 한국식품영양과학회 2011 한국식품영양과학회지 Vol.40 No.5

항암 화학요법제의 항암작용을 증가시키거나, 부작용을 감소시켜 항암 치료를 효과적으로 할 수 있는 항암치료 보조제(modulator)에 대한 개발의 일환으로 녹차 추출물의 이용 가능성을 추정하기 위하여 사람 폐암 세포주인 A549 세포를 배양하여 시스플라틴과 독소루비신의 항암성에 미치는 녹차 추출물과 EGCG의 영향을 비교 관찰하였다. A549 세포에 독성을 나타나는 농도는 녹차 추출물 400 ㎍/mL, EGCG 300 ㎍/mL, 시스플라틴 10 ㎍/mL 및 독소루비신 8 ㎍/mL로, 녹차 추출물이 세포독성을 나타내는 농도는 시스플라틴이나 독소루비신에 비하면 낮았다. A549 세포에서 시스플라틴 10 ㎍/mL 이상의 농도에서 세포활성이 감소되었고, EGCG나 녹차 추출물 100 ㎍/mL를 첨가하면 시스플라틴 6 ㎍/mL 이상의 농도에서 세포활성이 감소되어 EGCG나 녹차 추출물 첨가로 시스플라틴의 세포독성이 증가되었다. A549 세포에서 독소루비신 8 ㎍/mL 이상의 농도에서 세포활성이 감소되었고, EGCG나 녹차 추출물 100 ㎍/mL를 첨가하면 독소루비신 4 ㎍/mL 이상의 농도에서 세포활성이 감소되어 EGCG나 녹차 추출물 첨가로 독소루비신의 세포독성이 증가되었다. A549 세포에서 녹차추출물 투여 후 p53 및 caspase-3에 대한 Western blot을 시행한 결과 p53및 caspase-3의 유전자 발현이 증가되었다. 이상의 실험결과 녹차추출물은 광범위 항암제 시스플라틴이나 독소루비신의 세포독성을 증강시키는 효과가 있고, 녹차추출물에 의한 p53이나 caspase-3 등과 같은 세포자살유도 단백질의 발현 증가는 녹차추출물에 의한 세포독성 증강효과와 연관이 있을 것으로 추측된다. 녹차추출물의 시스플라틴이나 독소루비신 세포독성 증강효과는 항암화학요법제의 용량을 늘리지 않고 항암력을 증대시킬 수 있기 때문에 항암화학요법 보조제로서 이용될 수 있는 가능성이 높은 것으로 생각되며, 이러한 효과를 규명하기 위한 연구가 필요할 것으로 사료된다. Tea extract (TE) has been shown to have anti-tumor properties in a wide variety of experimental systems. We evaluated green tea extract (GTE) as a biochemical modulator for the antitumor activity of cisplatin and doxorubicin in the treatment of human lung cancer A549 cells. Cells were grown in RPMI-1640 medium supplemented with 10% (v/v) heat-inactivated fetal bovine serum and two antibiotics (100 units/mL penicillin and 100 ㎍/mL streptomycin). Two types of TE, epigallocatechin galate (EGCG) and GTE, were used in this experiment. The cells were seeded at 1×10⁴ cells/well in the RPMI-1640 media with or without TE (100 ㎍/mL) and then treated with different concentrations of doxorubicin (0~14 ㎍/mL) or cisplatin (0~35 ㎍/mL). After incubation in 5% CO₂ at 37℃ for 24 hr, cell viability was determined with a MTT assay. We used a Western blot to detect the influence of EGCG and GTE on the expression of p53 and caspase-3 genes in the A549 cells. A549 cell viability decreased to 15% with a 10 ㎍/mL concentration of cisplatin, and to 21% with a 8 ㎍/mL concentration of doxorubicin, as measured with the MTT assay. However, pre-treatment of the cells with EGCG (100 ㎍/mL) or GTE (100 ㎍/mL) resulted in decreased cell viability with 6 ㎍/mL of cisplatin and 4 ㎍/mL of doxorubicin. There was no apparent change in cell viability between EGCG or GTE administration in cisplatin- or doxorubicin-induced cytotoxicity in A549 cells. The levels of p53 and caspase-3 in the A549 cells increased with both EGCG and GTE treatment. We found that GTE could potentially affect cisplatin- or doxorubicin-induced cytotoxicity of A549 cells, which may be useful in the chemotreatment of cancer.

당뇨병 흰쥐에서 식이 제한 급여가 장기의 항산화효소 활성도 및 체중에 미치는 영향

이병래(Byoung-Rai Lee),차종희(Jong-Hee Cha),박재윤(Jae-Yoon Park),박영진(Young-Jin Park),박평심(Pyoung-Sim Park) 한국식품영양과학회 2001 한국식품영양과학회지 Vol.30 No.3

본 실험에서는 인슐린 의존형 당뇨병 모델로서 alloxan 당뇨 흰쥐를, 인슐린 비 의존형 당뇨병 모델로 알려진 OLETF종 당뇨 흰쥐를 각각 이용하여 식이 제한 급여 당뇨 흰쥐의 체중과 간, 폐 및 적혈구의 항산화효소 활성도를 측정하여 식이 제한 급여가 당뇨병에 미치는 영향을 관찰하였다. SD종 정상군, alloxan 당뇨군 및 OLETF 종 당뇨군의 체중은 정상 식이량 급여군은 4개월 후 각각 22%증가, 11%감소 및 20%증가를 나타냈고, 식이 급여량을 40% 제한시킨 각군은 4개월 후 체중이 각각 1%증가, 12%감소 및 6%감소되어 SD종 정상군과 OLETF 종 당뇨군에서는 식이 제한 급여군의 체중이 현저히 낮았으나, alloxan 당뇨군은 식이 제한 급여가 체중에 미치는 영향이 적었다. 식이 급여량을 40% 제한시켜 4개월간 사육한 흰쥐의 간 SOD 활성도는 SD 종 정상군은 14%, alloxan 당뇨군은 31%, OLETF 종 당뇨군은 13%가 각각 증가되었고, catalase 활성도는 SD 종 정상군, alloxan 당뇨군, OLETF 종 당뇨군에서 각각 26%, 27% 및 23%씩 증가되었고, GSHPx 활성도는 SD 종 정상군과 alloxan 당뇨군 및 OLETF 종 당뇨군에서 모두 식이 제한에 의한 효소활성도의 차이가 없었다. 폐 SOD, catalase 및 GSHPx 활성도는 SD종 정상군과 alloxan 당뇨군 및 OLETF 종 당뇨군에서 모두 차이를 나타내지 않았다. 식이 급여량을 40% 제한시킨 흰쥐의 적혈구 SOD와 catalase 활성도는 SD종 정상군과 alloxan 당뇨군 및 OLETF 종 당뇨군에서 모두 정상 식이량 급여군과 차이를 나타내지 않았고, GSHPx 활성도는 SD 종 정상군에서 25.2%가 증가되었으나, alloxan 당뇨군에서는 식이 제한 급여에 의한 효소 활성도 변화가 없었고, OLETF종 당뇨군에서는 식이 제한 급여로 적혈구 GSHPx 활성도는 17.2%가 증가되었으나, 간과 폐에서는 변화가 없었다. 식이 급여량을 40% 제한시킨 흰쥐의 간 TBARS량은 SD종 정상군에서 30%, OLETF종 당뇨군에서 26%가 각각 감소되었으나, alloxan 당뇨군에서는 변화가 없었고, 폐 TBARS량은 SD종 정상군과 alloxan 당뇨군 및 OLETF종 당뇨군에서 모두 정상 식이량 급여군과 차이를 나타내지 않았다. 적혈구 TBARS 량은 SD 종 정상군과 alloxan 당뇨군 및 OLETF 종 당뇨군에서 모두 정상식이량 급여군과 차이를 나타내지 않았다. 이러한 실험결과로 당뇨쥐에서 식이 제한 급여에 의한 체중의 변화는 인슐린의존형 당뇨병보다 인슐린 비 의존형 당뇨병에서 더 큰 것으로 나타났다. 당뇨쥐에서 식이 제한 급여에 의한 항산화효소의 활성도 변화는 장기의 종류나 효소의 종류에 따라서 차이가 있음을 알 수 있는데, 항산화효소 활성도 변화가 간에서 가장 크게 나타났고, TBARS량의 감소도 간에서 나타나므로, 식이 제한 급여는 간의 항산화계에 영향이 큰 것으로 생각되고, 식이 제한 급여에 의한 항산화계의 변화는 당뇨병의 형태와는 관련이 적은 것으로 추측된다. The effects of dietary restriction (DR) on antioxidant enzymes were studied in liver, lung and erythrocytes of diabetic rats. Experimental animals used Sprague-Dawley (SD; body weight 350±20 g) male rats and Otsuka Long Evans Tokushima fatty (OLETF; body weight 500±30 g) male rats, as a model of type 2 diabetes mellitus. Type Ⅰ diabetes was induced in SD rats by intramuscular injection of alloxan (80 mg/kg BW). Animals were randomly assigned either to continue the ad libitum diet or 40% DR (60% intake of ad libitum diet) groups. The body weight was measured at every 2 weeks to 4 months following DR. The activities of antioxidant enzymes (superoxide dismutase (SOD), catalase, glutathione peroxidase (GSHPx)) were measured in liver, lung and erythrocytes and the concentration of TBARS as a marker of reactive oxygen species-induced tissue injury was also measured in rats after 4 months 40% DR. The body weight 4 months after 40% DR of control SD, alloxan-diabetic SD and OLETF rats were 80%, 98% and 75% of each control groups, respectively. The activities of SOD, catalase and GSHPx in lung and erythrocytes of rats were not change by 40% DR but in 4 month 40% DR rat liver, the activities of SOD and catalase were increased in control SD, alloxan-diabetic SD, and OLETF groups. The concentration of TBARS in lung and erythrocytes was also not changed by 40% DR, while liver TBARS concentration was decreased in OLETF and control SD rats compared to each non-DR control rats. These results suggested that the body weight changes in diabetic rats by DR was more prominent in type 2 diabetes and changes of antioxidant enzymes is most prominent in liver by DR either type 1 and type 2 diabetic rats.

유방암 세포(EMT6) 이식 마우스에서 녹차폴리페놀 음용이 시스플라틴의 암 조직 성장 억제에 미치는 영향

이병래(Byoung-Rai Lee),조정일(Jung-Il Cho),박평심(Pyoung-Sim Park) 한국식품영양과학회 2014 한국식품영양과학회지 Vol.43 No.1

본 연구는 녹차폴리페놀이 시스플라틴의 항암작용과 신장독성에 미치는 영향을 유방암 세포(EMT6)와 암세포 이식 마우스를 이용하여 in vitro와 in vivo 실험으로 관찰하였다. 배양한 EMT6 세포에서 녹차폴리페놀은 시스플라틴에 의한 세포 독성을 증가시켰다. 마우스에 EMT6 세포를 주사하여 유발된 종양의 크기가 시스플라틴군(CP)보다 시스플라틴+녹차폴리페놀군(CP+GTP)에서 유의하게 작았고, 종양조직 p53와 caspase-3 활성화가 시스플라틴군(CP)보다 시스플라틴+녹차폴리페놀군(CP+GTP)에서 유의하게 높았으며, 신장 GGT와 AP 활성은 시스플라틴군(CP)보다 시스플라틴+녹차폴리페놀군(CP+GTP)에서 유의하게 높았고, 신장 조직학적 소견에서 신세뇨관 확장과 괴사가 시스플라틴군(CP)보다 시스플라틴+녹차폴리페놀군(CP+GTP)에서 유의하게 낮았다. 이상의 결과 녹차폴리페놀은 EMT6 유방암 세포를 이용한 in vitro 및 in vivo 실험에서 시스플라틴의 항암작용을 증강시키면서 신장에 대한 독성 부작용은 감소시키는 효과가 있는 것으로 추측된다. 녹차폴리페놀의 시스플라틴 항암작용 증강과 신장 독성 억제 및 감소 효과는 시스플라틴에 의한 암 치료 시 화학요법제의 보조제로서 이용가치가 있는 것으로 생각되며, 항암화학요법제에 대한 보조제로의 개발을 위해서는 대규모 동물실험을 통한 효과 입증 및 부작용에 대한 실험과 임상연구가 뒷받침되어야 할 것으로 사료된다. The aim of this study is to evaluate the effects of green tea polyphenol (GTP) on anticancer treatment with cisplatin (CP), using both an in vitro cell culture model and an in vivo mouse model of established breast tumor. Mouse breast cancer cells (EMT6) were treated with or without GTP and CP followed by determination of the cell viability using an MTT assay. The relative cell viability of CP treated EMT6 cells was 96% at a 20 μg/mL concentration of cisplatin; however, in combination with GTP (50 μg/mL), the cell viability decreased to 20% at the same concentration of CP (20 μg/mL). For the in vivo study, EMT6 cells were inoculated into Balb/c mice for the establishment of a tumor-bearing mice model. The tumor-bearing mice were treated with CP (5 mg/kg. i.p.) with or without dietary GTP (0.2% drinking water). Tumor growth was monitored by a measurement of tumor size using a digital caliper, and nephrotoxicity was determined by enzymatic and histological examinations. The levels of p53 and caspase-3 in tumor tissues were examined by a Western blot. In tumor-bearing mice treated with GTP plus CP, the increment of tumor volume showed a significant reduction, compared with CP or GTP alone. The levels of p53 and cleaved caspase-3 (caspase-3/p17) in tumor tissues of tumor-bearing mice were increased by CP and GTP compared to CP alone. In CP treated tumor-bearing mice, γ-glutamyltranspeptidase (GGT) and alkaline phosphatase (AP) activities were decreased, and marked tubular necrosis and dilatation were observed in the kidney. CP-induced enzymatic and histopathological changes in the kidney of tumor-bearing mice were reduced by combinations of GTP with CP. The results of these experiments demonstrated that dietary GTP has a potentiating effect on CP anti-tumor activity and a protective effect against CP-induced renal dysfunction. Therefore, GTP may be used as a modulator in anticancer treatment with CP.

고지방식이와 저용량 스트렙토조토신으로 유도된 2형 당뇨병 흰쥐에서 녹차 폴리페놀과 비타민 C 병합 투여 효과

이병래(Byoung-Rai Lee),양훈(Hoon Yang),박평심(Pyoung-Sim Park) 한국식품영양과학회 2016 한국식품영양과학회지 Vol.45 No.2

녹차 폴리페놀과 비타민 C가 2형 당뇨병에 미치는 영향을 관찰하기 위해 고지방식이와 저용량 스트렙토조토신을 이용하여 당뇨병이 유도된 흰쥐에 polyphenon 60(P60)과 sodium ascorbate(SA)를 16주간 투여한 후 공복 혈당, 혈장 인슐린, 혈청 중성지질, BUN 및 creatinine과 신장 GGT와 AP 활성도를 측정하였다. 당뇨병 흰쥐에 P60이나 SA투여로 인한 식이섭취량과 체중의 변화는 없었다. 공복 혈당은 당뇨 대조군(DC 군)에서 대조군(NC 군)의 5배로 증가하였으며, 당뇨+녹차 폴리페놀(DM+P60) 군은 14%, 당뇨+녹차 폴리페놀+비타민 C(DM+P60+SA) 군은 28%가 DC군보다 감소하였고, 당뇨+비타민 C(DM+SA) 군은 DC 군과 유의한 차이가 없었다. 혈장 인슐린 양은 각 실험군 사이에 유의한 차이가 없으며, 인슐린 저항성 지수 HOMA-IR은 DC 군에서 증가하였고 DM+P60+SA 군은 DC 군보다 감소하였다. 혈청 creatinine 양은 DC 군에서 증가하였고 DM+P60 군은 DC 군보다 17% 감소하였으며, DM+P60+SA 군은 DC 군보다 43% 감소하였다. 혈청 BUN 양은 DC 군에서 증가하였고 DM+P60+SA 군은 DC 군보다 41% 감소하였다. 신장 GGT와 AP 활성도는 DC 군에서 감소하였고 DM+P60+SA 군은 DC 군보다 감소가 적었으며, DM+SA군은 DC 군과 유의한 차이가 없었다. 이상의 실험 결과 2형당뇨병에서 녹차 폴리페놀과 비타민 C 복합 투여가 혈당, 인슐린 저항성 및 혈청 중성지질량 개선 및 신장 손상 방지효과가 녹차 폴리페놀이나 비타민 C를 단독으로 투여하였을 때보다 더 증가함을 확인할 수 있었다. 녹차 폴리페놀과 비타민 C의 혈당 상승 억제와 신장 손상 방지 효과에 대한 계속된 연구가 필요하며, 녹차 폴리페놀과 비타민 C는 당뇨병 환자에게 혈당을 조절하고 신장 손상을 방지하는 기능성식품 제재로서 개발 가능성이 있는 것으로 생각한다. This study investigated the effects of green tea polyphenol and vitamin C on type 2 diabetes mellitus by administering polyphenon 60 (P60) and sodium ascorbate (SA) to diabetic rats induced by high fat diet/low-dose streptozotocin. The experimental group was divided into five different groups: non-diabetic control group (NC), diabetes control group (DC), diabetes+P60 group (DM+P60), diabetes+SA group (DM+SA), and diabetes+P60+SA group (DM+P60+SA). P60 and SA were dissolved in 0.1% drinking water. After P60 and SA were administered for 16 weeks, fasting blood glucose, plasma insulin, serum triglyceride, blood urea nitrogen (BUN), and creatinine levels as well as kidney alkaline phosphatase (AP) and γ-glutamyltranspeptidase (GGT) activities were measured. Fasting blood glucose level increased 5-fold in the DC group compared to the NC group. In the DM+P60 group, fasting blood glucose level decreased by 14%. In the DM+P60+SA group, fasting blood glucose level decreased by 28% compared to the DC group, whereas the DM+SA group did not show any significant difference. The homeostasis model assessment for insulin resistance index increased in the DC group and decreased in the DM+P60+SA group compared to the DC group. Serum creatinine level increased in the DC group, but decreased by 17% in the DM+P60 group and by 43% in the DM+P60+SA group compared to the DC group. The serum BUN level increased in the DC group, but decreased by 41% in the DM+P60+SA group compared to the DC group. Kidney GGT and AP activities decreased in the DC group compared to the NC group; however, they were reversed by DM+P60+SA group. These results show that combined administration of both green tea polyphenol and vitamin C had better effects on improving blood glucose level, insulin resistance, serum triglyceride level, and protecting kidneys than administration of either green tea polyphenol or vitamin C alone in the context of type 2 diabetes.

과산화 수소와 3-aminotriazol이 가토의 슬관절 손상에 미치는 영향

이병호(Byoung Ho Lee),하상호(Sang Ho Ha),유재원(Jae Won You),이상홍(Sang-Hong Lee),표영배(Young Bae Pyo),김광(Kwang Kim),이병래(Byoung Rai Lee) 대한정형외과학회 2000 대한정형외과학회지 Vol.35 No.4