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HPLC-ELSD와 LC/MS를 활용한 건강기능식품 중 글루콘산철 최적 분석법 확립 및 검증
박영주(Yeongju Park),정소연(Soyeon Jeong),서현지(Hyunji Seo),이지현(Jihyun Lee),이찬(Chan Lee),서희재(Hee-Jae Suh) 한국식품영양과학회 2021 한국식품영양과학회지 Vol.50 No.8
본 연구는 국내에서 식품첨가물로 사용되는 산도조절제 글루콘산철(ferrous gluconate)의 고성능 액체 크로마토그래피(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)를 이용한 분석법 개발 및 이에 대한 타당성을 검증하기 위해 진행되었다. 글루콘산철의 정량을 위해 증기화 광산란 검출기(Evaporative Light Scattering Detector, ELSD), 역상분배형 컬럼(HyperClone<SUP>TM</SUP> ODS column)을 사용하였으며, 이동상은 1.3% 트리플루오로아세트산과 아세토니트릴을 이용하였다. 개발된 분석법의 직선성은 결정계수(R²)가 0.999로 우수하였고, 검출한계는 12.8 μg/mL, 정량한계는 38.9 μg/mL로 나타났다. 정확도는 일내분석에서 95.6~101.5%와 일간분석에서 98.6~103.1%로 나타났으며, 정밀도는 일내분석과 일간분석에서 각각 1.5~2.6%와 0.7~2.9%로 나타났다. 또한, 건강기능식품을 시료로 분석한 측정불확도는 954.7 μg/mL 농도에 대해 확장불확도가 27.73μg/mL로 산출되어 약 3%의 측정불확도 값이 산출되었다. 이 분석법 검증 결과는 유럽연합 집행위원회(European Commission, EC) 및 국제표준화기구(International Organization for Standardization, ISO)의 기준을 모두 충족시키는 결과였다. Ferrous gluconate has been used in Korea, the United States, Japan, and the European Union to control the acidity in foods. We optimized an analytical method to determine the levels of ferrous gluconate in foods by a high-performance liquid chromatography-evaporative light scattering detector (HPLC-ELSD) and an ultra-performance liquid chromatography-mass spectrometry (UPLC-MS). The linearity of the developed analysis method using HPLC was excellent with a coefficient of determination (R²) of 0.999 obtained from calibration curve, and limits of detection and quantitation were 12.8 μg/mL and 38.9 μg/mL, respectively. In intra-day and inter-day analysis, the accuracy was 95.6∼101.5% and 98.6∼103.1%, respectively, and the precision was 1.5∼2.6% and 0.7∼2.9%, respectively. The measurement uncertainty of analyzing the health functional food samples was within 3%, and the verification results of all analytical methods met the standards of the European Commission (EC). UPLC-MS was also used to confirm ferrous gluconate. As a result, the field applicability of the ferrous gluconate analytical method developed in this study was confirmed.