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EGF와 IGF-I의 첨가배양이 돼지 미성숙 난포란의 체외성숙과 배발달에 미치는 영향
백준종(Jun-Jong Baek),한만희(Man-Hye Han),박병권(Byung-Kwon Park),서길웅(Kil-Woog Seo),이규승(Kyu-Seung Lee) 충남대학교 농업과학연구소 2007 농업과학연구 Vol.34 No.1
본 연구는 돼지 난포란의 체외배양액과 배발달 배양액에 성장인자인 EGF와 IGF-Ⅰ을 각각 0, 1, 5 및 10 ng/㎖ 첨가배양함으로서 돼지 난포란의 체외성숙과 체외배발달에 미치는 영향을 구명하고자 실시하였다. 본 연구에서 얻어진 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 돼지 난포란을 체외성숙배양액인 NCSU-23 배양액에 EGF와 IGF-Ⅰ을 각각 0, 1, 5 및 10 ng/㎖ 첨가배양하여 성숙을 유기한 다음, 체외수정을 실시한 결과, 모든 처리구에서 핵성숙률, 정자침투율, 웅성전핵형성률, 다정자 침입률 및 평균침입정자수에서 유의적인 차이가 인정되지 않았다. 2. 체외수정을 실시한 후 , 배발달배양액인 NCSU-23에 7일간 배양한 결과, 배반포형성률은 EGF첨가군이 각각 11.2±1.5%, 15.0±0.8%, 16.8±2.8% 및 21.4±2.0%로서 10 ng/㎖의 첨가군이 유의적(P<0.05)으로 높은 결과를 나타냈으며, IGF-Ⅰ첨가군도 10.7±1.4%, 12.8±2.0%, 16.0±2.5% 및 21.9±2.4%로서 10 ng/㎖의 첨가군이 유의적으로 높은 결과를 나타냈다. 또한, 총세포수에 있어서도 EGF첨가군이 22.8±3.7개, 25.7±5.5개, 26.0±4.2개 및 35.1±4.7개, IGF-Ⅰ첨가군은 21.5±3.7개, 25.2±2.8개, 26.2±2.9개 및 33.2±3.6개로서 각각 10 ng/㎖ 첨가군이 유의적(P<0.05)으로 높은 결과를 나타냈다. 3. 돼지 난포란을 체외성숙 기본배양액인 함유된 NCSU-23 배양액에 44시간동안 체외성숙을 유기한 다음, 체외 수정용배양액인 mTBM에 정자와 같이 6시간동안 공배양함으로서 체외수정을 유기한 후, 배발달배양액인 NCSU-23에 EGF와 IGF-Ⅰ을 각각 0, 1, 5 및 10 ng/㎖ 첨가하여 7일간 배양한 결과, 배반포기 도달률은 EGF첨가군에서 각각 14.0±1.7개, 16.2±1.4개, 16.9±1.2개, 23.1±1.6개로서 10 ng/㎖ 첨가군이 유의적으로 높은결과를 나타냈고, IGF-Ⅰ첨가군도 각각 13.6±1.7개, 15.7±4.5개, 16.0±0.2개 및 25.0±0.8개로 10ng/㎖군이 유의적(P<0.05)으로 높은 결과를 나타냈으며, 총세포수에 있어서는 EGF첨가군이 각각 21.8±2.9개, 25.2±2.8개, 39.7±2.7개 및 46.2±3.6개로 10 ng/㎖첨가군이 유의적으로 높은 결과를 나타냈고, IGF-Ⅰ첨가군도 20.7±2.9개, 26.2±2.9개, 24.6±2.4개 및 46.1±3.5개로 10 ng/㎖ 첨가군이 유의적(P<0.05)으로 높은 결과를 나타냈다. 이상의 결과를 종합해 볼 때, EGF와 IGF-Ⅰ은 돼지 난포란의 체외성숙과 배발달과정에 영향을 미치며 특히, 10 ng/㎖의 농도에서 효과적인 것으로 조사되었다. The present study was carried out to examine the effect of EGF and IGF-Ⅰ in vitro maturation (IVM) of porcine oocytes and development of porcine IVM/IVF embryos. The results were summarized as follows : 1. The rates of nuclear maturation, penetrated oocytes, pronuclear formation, polyspermic oocytes and mean numbers of the penetrated sperm were not different in NCSU-23 maturation medium with 0, 1, 5 and 10 ng/㎖ EGF and IGF-Ⅰ (P>0.05). 2. The rates of blastocyst formation at day 7 after in vitro fertilization in 0, 1, 5 and 10 ng/㎖ EGF groups were 11.2±1.5%, 15.0±8.3%, 16.8±2.8% and 21.4±2.0%, also 0, 1, 5 and 10 ng/㎖ IGF-Ⅰ groups were 11.2±1.5%, 15.0±8.3%, 16.8±2.8% and 21.4±2.0%, respectively. In the total cells case, EGF groups were 22.8±3.7, 25.7±5.5, 26.0±4.2 and 35.1±4.7, also IGF-Ⅰ groups were 21.5±3.7, 25.2±2.8, 26.2±2.9 and 33.2±3.6, respectively. Both 10 ng/㎖ EGF group and 10 ng/㎖ IGF-Ⅰ group were significantly higher than those of other treatment groups (P<0.05). 3. The rates of blastocyst formation at day 7 in the NCSU23 culture medium of porcine IVF-produced embryos with 0, 1, 5, and 10 ng/㎖ EGF groups were 14.0±1.7%, 16.2±1.4%, 16.9±1.2% and 23.1±1.6%, also 0, 1, 5, 10 ng/㎖ IGF-Ⅰ groups were 13.6±1.7, 15.7±4.5, 16.0±0.2 and 25.0±0.8, respectively. And in the total cells case, EGF grups were 21.8±2.9, 25.2±2.8, 39.7±2.7 and 46.2±3.6, also IGF-Ⅰ groups were 20.7±2.9, 26.2±2.9, 24.6±2.4 and 46.1±3.5, respectively. Both 10 ng/㎖ EGF group and 10 ng/㎖ IGF-Ⅰ group were significantly higher than those of any other treatment groups (P<0.05). In conclusion, these results suggested that the addition of 10 ng/㎖ EGF and IGF-Ⅰ were effective on the blastocyst formation and total cells of blastocysts.
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김상우,서길웅,상병찬,이규승 충남대학교 농업과학연구소 2007 농업과학연구 Vol.34 No.1
This study was conducted to investigate the antler induction rate and production by artificial induction of antlerogenesis using CaCl_(2) injection on both periosteum around area of horn development for the frontal bone of a female elk deer which do not have an antler. The results obtained from eleven deers for verifying effect of the female's antler induction on reproduction are as follows: The antler development induction by CaC1_(2) injection is higher on the treatments of 30 and 50 % of CaCl_(2) injection than those on the treatments of 15 %. The antler production is higher on the 30 % CaCl_(2) injection than those of 15 and 50 % CaCl_(2) injection. For 30 % CaCl_(2) injection, the antler production is higher in 1.5 and 2.0 ml of % CaCl_(2) injection than the other injection level. After the induction of antler development, the birth rate is not changed as of 75-100 %, while the regeneration rate of the antler which was not constant in approximately 45 % for five among eleven female deer. With these results, we assume that the injection concentration and amount of CaCl_(2) injection are around 30 % and 1.5 and 2.0 ml level which can be not only most effective conditions for the antler induction rate and production, but also these conditions do not influence the reproduction during the period of the female elk's antler development induction.
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