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Properties of Alkaline Protease Isolated from Nocardiopsis dassonvillei
김미정,정혜신,박순재,Kim, Mi-Jung,Chung, Hye-Shin,Park, Soon-Jae 생화학분자생물학회 1993 한국생화학회지 Vol.26 No.1
ATCC 21944인 노카디옵시스 다손빌레이 균주로부터 새로운 알칼리언 단백질분해효소를 분리하였다. 크로마토그래피 방법과 이온교환 HPLC를 사용하여 분리한 효소는 SDS-전기영동 젤상에서 순수한 것으로 나타났으며, 겉보기 분자량은 33,500 달톤인 것으로 나타났다. 이 효소의 pI는 6.3는 부근으로 나타났으며 효소의 활성은 PMSF 및 chymostatin과 같은 Serine 단백질 분해효소의 억제제들에 의해 영향을 받는 것으로 밝혀졌다. 온도에 따른 효소활성 실험결과 $55^{\circ}C$에서 활성이 가장 크며 $65^{\circ}C$까지는 최대 활성의 70%를 유지하며 또한 pH 11에서도 활성을 계속 유지하는 것으로 보여졌다. 분리된 단백질분해효소는 높은 온도에서 그리고 강한 알칼리성에서도 활성을 유지하므로 산업적으로 이용할 가치를 포함하고 있는 것으로 사료된다. We have purified a novel alkaline protease from actinomycete Nocardiopsis dassonvillei, ATCC 21944, using conventional chromatographic methods and an ion-exchange HPLC at the final stage. SDS-PAGE of purified enzyme showed that the enzyme is homogeneous, and the apparent molecular weight is 33,500 daltons. Isoelectricfocusing indicates its pI is around 6.3. The enzyme is inhibited by serine protease inhibitors such as phenylmethylsulfonyl fluoride and chymostatin. Temperature-dependent activity profile of the protease indicates that it is thermally stable and retains 70% of the activity at $65^{\circ}C$ compared to the maximum activity shown at $55^{\circ}C$. It also appears to be highly alkalophilic, maintaining almost full activity at pH 11.
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노카디옵시스 다손빌레이 ( Nocardiopsis dassonvillei ) 로 부터 분리한 알칼라인 단백질분해 효소의 성질
김미정,정혜신,박순재 ( Mi Jung Kim,Hye Shin Chung,Soon Jae Park ) 생화학분자생물학회 1993 BMB Reports Vol.26 No.1
We have purified a novel alkaline protease from actinomycete Nocardiopsis dassonvillei, ATCC 21944, using conventional chromatographic methods and an ion-exchange HPLC at the final stage. SDS-PAGE of purified enzyme showed that the enzyme is homogeneous, and the apparent molecular weight is 33,500 daltons. Isoelectricfocusing indicates its pI is around 6.3. The enzyme is inhibited by serine protease inhibitors such as phenylmethylsulfonyl fluoride and chymostatin. Temperature-dependent activity profile of the protease indicates that it is thermally stable and retains 70% of the activity at 65℃ compared to the maximum activity shown at 55℃. It also appears to be highly alkalophilic, maintaining almost full activity at pH 11.
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