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Eritadenine 함유 표고버섯균사체 고체배양 효소추출물(EA-LEMSCEE)의 spontaneous hypertension rat 혈압감소
문연규(Yeon-Kyu Moon),정재은(Jae Eun Jung),조복임(Bok-Im Cho),허정두(Jeong-Doo Heo),최정일(Jungil Choi),김정옥(Jeong Ok Kim),하영래(Yeong Lae Ha) 한국생명과학회 2018 생명과학회지 Vol.28 No.2
표고버섯으로부터 유래한 eritadenine (EA)은 혈중 low density lipoprotein (LDL), triglyceride (TG), phospholipid를 감소시키는 물질이다. 최근 저희 연구팀은 in vitro 연구에서 EA가 angiotensin converting enzyme (ACE)의 활성을 저해함을 밝혔다. 본 연구에서는 EA와 EA 함유한 표고버섯균사체 고체배양 효소추출물(EA-LEMCEE)이 본태성 고혈압 쥐 SHR의 혈압을 낮추었음을 보고한다. EA 및 EA-LEMSCEE는 인체 탯줄 혈관내피세포 EA.hy926 세포의 ACE 활성을 억제하였다. EA-LEMSCEE는 SHR의 수축기 및 이완기 혈압을 Control 처리구에 비해 유의성 있게 낮추어 처리 5주에는 Positive control인 captopril (CP) 처리와 비슷한 혈압감소 효과를 나타내었다. EA-LEMCE는 LEMSCEE에 비해 수축기 및 이완기 혈압을 감소시켰지만 유의성은 없었다. EA- LEMSCEE는 renin과 ACE 활성을 Control 처리에 비해 유의성 있게 억제하였고, angiotensin II (Ang II) 함량을 감소시켜, 처리 5주 후에 이러한 CP의 효과와 유사하였다. 또한 EA-LEMCEE는 LEMCEE에 비해 유의성 있게 renin 및 ACE 활성을 억제하였고 및 Ang II 함량을 감소시켰다. 이와 같은 결과는 EA 및 EA-LEMCEE는 본태성 고혈압 SHR의 renin과 ACE 활성을 억제하여 혈압을 낮추었고, EA 및 EA-LEMSCEE는 인체 고혈압을 낮출 수 있음을 의미한다. Eritadenine (EA), derived from Lentinus edodes (LE), reduced low-density lipoprotein (LDL), triglyceride (TG), and phospholipids in bloods, and fatty acid depositions in animals and humans. Previously, we reported that EA inhibited angiotensin-converting enzyme (ACE) activity in vitro. Now, we report that EA reduced blood pressures in spontaneous hypertension rats (SHR). EA-containing LE mycelial culture enzyme extract (EA-LEMSCEE) was prepared from LE mycelial solid cultures and the hot-water extract of LE fruit bodies. Both EA and EA-LEMSCEE inhibited ACE activity in immortalized human umbilical endothelial cells (EA.hy926). EA-LEMSCEE treatments (7.5 mg/kg, 22.5 mg/kg) significantly reduced systolic and diastolic blood pressure in SHR. At five weeks of treatment, EA-LEMSCEE treatment significantly reduced systolic and diastolic blood pressure, similar to the positive control (captopril, CP; 4 mg/kg) treatment. In addition, the LEMSCEE without EA decreased systolic and diastolic blood pressures compared to the control, but not significant. EA-LEMSCEE decreased renin and ACE activities, and angiotensin II (Ang II) contents in SHR compared to the control. After five weeks of treatment, the effect of EA-LEMCEE was similar to that of CP. These results indicate that EA and EA-LEMSCEE reduce blood pressure by inhibiting the renin and ACE activity of SHR. Furthermore, these results imply that EA or EA-LEMSCEE could be used as an antihypertension agent in humans.
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TM-3 cell에서 eritadenine 함유 신령버섯균사체 액체배양물의 testosterone 생성 촉진효과
김영숙(Young Suk Kim),정재은(Jae Eun Jung),문연규(Yeon Kyu Moon),정희정(Hui Jeong Jeong),김정옥(Jeong Ok Kim),하영래(Yeong Lae Ha) 한국생명과학회 2018 생명과학회지 Vol.28 No.6
신령버섯 액체배양추출물(Agaricus blazei mycelial liquid culture extract: ABMLCE)과 eritadenine (EA)의 mouse 정소 Leydig TM3 세포에서 testosterone (TS) 생성에 관한 연구를 정상 조건과 산화스트레스 조건에서 수행하였다. 정상 조건에서는 TM3 세포를 DMEM 배지에 배양하면서 EA (0~100 ppm)와 EA (0~50 ppm) + ABMLCE (10 ppm)를 24 hr처리하였다. 산화스트레스 조건에서는 TM3 세포를 H₂O₂ (50 μM)를 4 hr 처리하고 정상 조건과 동일하게 처리하였다. DMEM 배양물에 함유된 TS 함량, HSD3B2 효소 활성, 5α-R2 효소 활성과 NO함량을 assay kit를 사용하여 측정하였다. EA는 정상 조건이나 산화스트레스 조건에서 TS 함량을 유의성 있게 증가시켰고, ABMLCE와 ABMLCE + EA도 TS의 함량을 증가시켰다. TS 전구체 생성에 관여하는 HSD3B2 효소활성은 두 조건에서 모두 EA, ABMLCE, ABMLCE + EA에 의해서 증가되었다. 또한 TS를 DTH로 전환시켜 TS함량을 감소시키는 역할을 하는 5α-R2 효소활성은 정상 조건 및 산화스트레스 조건에서 ABMLCE에 의해서만 감소되었다. Free radical로 작용하는 NO의 함량은 두 조건 모두 EA, ABMLCE, ABMLCE + EA에 의해 감소되었다. 이 결과는 EA, ABMLCE, ABMLCE + EA 처리가 TM3 세포의 HSD3B2 효소 활성을 증가시키고, NO 생성을 억제하여 TS 함량을 증가시켰음을 의미하며 EA + ABMLCE 혼합물이 남성 성기능개선 물질로 사용될 수 있음을 의미한다. Enhancement mechanistic actions of testosterone (TS) productions in mouse Leydig TM3 cells by the eritadenine (EA) and/or the Agaricus blazei mycelial liquid culture extract (ABMLCE). Productions of TS in TM3 cells were investigated in normal and oxidative-stressed culture conditions. In the normal culture condition, TM3 cells grown in a Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM) were treated with EA (0~100 ppm) and ABMLCE (10 ppm) + EA (0~50 ppm) for 24 hr, and in the oxidative-stressed culture condition, the cells grown in DMEM containing 50 μM H₂O₂ to induce oxidative stress for 4 h were treated with the same as those in the normal culture condition. TS content, 3β -hydroxysteroid dehydrogenase 2 (HSD3B2) enzyme activity, 5α-reductase 2 (5α-R2) enzyme activity, and free-radical nitric oxide (NO) content in the culture media were measured using their corresponding assay kits. EA, ABMLCE, and ABMLCE + EA significantly, p<0.05, enhanced TS productions in both cultural conditions, relative to control treatment. The activity of the HSD3B2 enzyme, which is involved in the production of precursors for TS production, was elevated by EA, ABMLCE, and ABMLCE + EA treatments in both culture conditions. The activity of the 5α-R2 enzyme, which converts TS to dihydroxytestosterone (DHT), was not significantly affected in either culture condition by EA, ABMLCE, or ABMLCE + EA treatments. The treatments included reduced NO content. These results indicate that EA, ABMLCE, and EA + ABMLCE treatments elevated TS in TM3 cells via the enhancements of HSD3B2 activity and the reduction of NO production, and also imply that EA and ABMLCE or EA + ABMLCE could be useful materials for the production of TS in humans.
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