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신명곤,장판식,민봉기,곽해수,Shin, Myung Gon,Chang, Pahn Shick,Min, Bong Kee,Kwak, Hae Soo 한국분석과학회 1992 분석과학 Vol.5 No.4
유당분해효소를 유지방으로 미세캡슐화시켰으며, 이때의 미세캡슐화 수율을 정량적으로 분석하는 방법을 제시하였다. 본 연구에서 적용한 미세캡슐화 공정과정에 의한 유당분해효소의 불활성화 정도는 초기 효소활성도의 5.2%였으며 이러한 불활성화 정도를 고려하여 유당분해효소의 미세캡슐화 수율을 여러 가지 방법에 의하여 계산하였을 때 각각 92.6% (간접적인 측정방법), 88.6% (열처리에 의한 방법) 및 94.1% (효소처리에 의한 방법)였다. We have developed the methodology for the quantitative analysis of microencapsulation yield and optimized the conditions for the microencapsulation of ${\beta}$-galactosidase by butter oil. The degree of ${\beta}$-galactosidase deactivation by the microencapsulation process was the value of 5.2% of initial activity. And the yield for the microencapsulation of ${\beta}$-galactosidase by the indirect, heat treatment, and enzymatic methodology were 92.6%, 88.6%, and 94.1%, respectively.
고속액체크로마토그래피를 이용한 유당분해효소의 활성도 측정
신명곤,장판식,민봉기,김선창,Shin, Myung Gon,Chang, Pahn Shick,Min, Bong Kee,Kim, Sun Chang 한국분석과학회 1992 분석과학 Vol.5 No.4
유당분해효소의 활성도를 정량하기 위하여 고속액체크로마토그래피(HPLC)를 사용하는 방법을 확립하였다. Aminex HPX-87C 컬럼 및 RI 검출기를 사용하여 유당, 글루코스 및 갈락토스를 12분 이내에 정량적으로 분석할 수 있었다. 컬럼 온도는 $85^{\circ}C$로 고정하였으며 이동상으로는 탈이온화된 증류수를 사용하였다. ONPG(ortho-nitrophenol-${\beta}$-D-galactopyranoside)를 이용하는 발색법의 결과와 비교하여, 고속액체크로마토그래피에 의한 유당분해효소 활성도 측정법의 타당성을 고찰하였으며, 그 결과 ONPG 방법과 고속액체크로마토그래피 방법에 의한 효소활성도 측정의 실험결과에는 큰 차이가 없었으며, 고속액체크로마토그래피를 사용하는 경우에는 420 nm에 대한 방해 작용이 있는 기질에서도 유당분해효소의 활성도를 측정할 수 있는 장점을 가짐을 확인하였다. An analytical procedure is presented for the quantitative determination of lactose, glucose, and galactose in the hydrolyzate of lactose by ${\beta}$-galactosidase with high-performance liquid chromatography. An Aminex HPX-87C column at $85^{\circ}C$ and refractive index detector were used to resolve lactose, glucose, and galactose in only 12 minutes with distilled and deionized water as a mobile phase. The validity of high-performance liquid chromatography as a method for the assay of ${\beta}$-galactosidase was supported by recovery experiments and comparision of results with those by ONPG method, a spectrophotometric assay. The procedure was appropriate for determination of sugars in the enzyme reaction mixture and could by applied to analysis of ${\beta}$-galactosidase activity.