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Bacillus subtilis LY - 353이 생산하는 Protease의 정제 및 특성
이병우(Byung-Woo Lee),유영선(Young-Sun You),임근형(Geun-Hyung Im),최춘언(Chun-Un Choi) 한국식품영양과학회 1991 한국식품영양과학회지 Vol.20 No.1
젓갈에서 protease 생성균주 Bacillus subtilis LY-353균주를 분리, 동정하였다. LY-353균주의 효소생산에 대한 최적 배양 조건은 온도 35℃, pH 7.5, salt 농도 1.0%였으며, 산업용 배지를 사용하여 50ℓ 발효조에서 7시간 배양하였을때 최고의 활성을 나타내었다. 정제과정으로 7.33배 정제되었으며 수율은 6.55%이었다. 정제된 효소액은 전기영동으로 단일 band를 확인할 수 있었으며, 효소활성에 필요한 온도와 pH는 각각 55℃와 7.5이었다. The Bacillus subtilis LY-353, which secretes the protease isolated from seafoods. The optimum culture condition for production of protease from B. subtilis LY-353 was as follows; temperature 35℃, pH 7.5, salt concentration 1.0%. The purification steps involved ammonium sulfate fractionation, DEAE-Sephadex A-50 column chromatography, and Sephadex G-100 gel filtration. A 7.33 fold purification and 6.55 yield of protease was obtained from culture broth. The optimum pH and temperature for the enzyme action were pH 7.5 and 55℃ respectively.
Streptococcus sp. 기원의 Protease를 이용한 Casein Phosphopeptides의 생산
임근형,이병우,박기문,손세형,유주현 한국산업미생물학회 1993 한국미생물·생명공학회지 Vol.21 No.5
칼슘의 불용성화를 저해하는 casein phosphopeptides(CPP)를 제조하기 위하여 sodium caseinate를 기질로 하여 기존의 trypsin과는 다른 Streptococcus sp.로부터 생성된 조효소를 사용하여 최적생성조건, 생산수율 및 그 특징을 검토하였다. 최적조건은 기질농도 10%에서 조효소 사용량 1.5%, 반응온도 50℃, pH 8.0 및 반응시간 4시간으로서, 이때의 CPP 생성율은 23%였다. 또한, CPP의 분자량은 3,000∼17,000으로 확인되었으며, in vitro에서 칼슘양에 대하여 1.5배의 사용으로 칼슘의 불용성화를 방지할 수 있었다. For the production of Casein Phosphopeptides(CPP) inhibiting the insolubility of calcium, 10% sodium caseinate was treated with 1.5% of protease from Streptococcus sp.. Optimal conditions and productivity for the CPP production, and properties of the CPP were compared with tryptic hydrolysates of sodium caseinate. Optimum conditions of pH, temperature and reaction time were 8.0, 50℃, 4 hrs, respectively. Under these conditions the productivity of CPP was 23% and Molecular weight of CPP was ranged from 3,000 to 17,000. The results also showed that the insolubility of calcium was completely inhibited by using 1.5 times of CPP for the amount of calcium.
표고버섯 균사체의 배양특성 및 Pilot Scale 생산
이병우,임근형,김동욱,박기문,손세형,손태화 한국산업미생물학회 1993 한국미생물·생명공학회지 Vol.21 No.6
Lentinus edodes 산련 1호의 최적배양 조건을 TGY 배지로 조사한 바 배양 최적온도 25℃, 초기 pH 4.0, 교반속도 300 rpm, 접종량 10.0%로 하고 산소 통기량을 1.0 v/v/m일 때 최적배양조건이었으며 산업용 배지로 대량생산하기 위한 액체배지에서 최적의 C/N ratio 13.1 : 1로 7일간 배양하였을 ?? 건조 균사체량은 18.8 g/ℓ을 얻었다. 또 수율 증가를 위하여 식물성장 호르몬인 2,4-D, BA를 첨가한 실험에서는 2,4-D 0.5 ppm을 첨가하여 배양하였을 때 대조구보다 1.1% 수율이 증가하였지만, BA를 첨가하였을 때 대조구에 비하여 수율이 감소하여 균사체 수율향상에 식물성장호르몬 BA는 효과가 없었다. The optimum conditions for the submerged mycelial culture of Lentinus edodes SR-1 were elucidated to be incubation temperature of 25℃, initial pH 4.0, agitation of 300 rpm, inoculation of 10.0%(v/v), and aeration of 1.0 v/v/m in TGY medium. The optimum C/N ratio and economic yield coefficient for the submerged mycelial culture were 13.1:1 and 0.45 respectively. As the plant growth hormones test, SCM medium containing 0.5ppm of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid increased mycelial yield in 1.1%, but 6-benzylaminopurine was not effcetive.