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        카드뮴 함유 배지에서 배양된 Hansenula anomala B-7의 Malate Dehydrogenase 활성에 미치는 금속 이온의 영향

        유대식,Yu, Tae Shick 한국미생물학회 1998 미생물학회지 Vol.34 No.4

        카드뮴 1 mM를 함유한 배지에서 배양된 고도 카드뮴 내성 효모 Hansenula anomala B-7으로부터 분리한 malate dehydrogenase(카드뮴 적응 MDH)와 카드뮴을 함유하지 않은 배지에서 배양된 사용균주의 malate dehydrogenase(카드뮴 비적응 MDH)활성에 미치는 금속 이온의 영향을 비교 검토했다. 카드뮴 적응 MDH와 비적응 MDH 활성은 1 mM $Cd^{2+}$에 의하여 대조구에 비하여 450%와 150%가 각각 증가되었으며, 카드뮴 적응 MDH 활성은 1 mM $Zn^{2+}$, $Mn^{2+}$과 $Cu^{2+}$에 의하여 각각 147%, 150%와 135% 증가되었다. 더욱이, 카드뮴 적응 MDH 활성은 2 mM $Cd^{2+}$와 2.5 mM $Zn^{2+}$에 의하여 각각 925%와 250% 증가되었다. 카드뮴에 의한 카드뮴 적응 MDH의 활성 촉진은 효소반응 4분으로 최대값에 도달했으나, 카드뮴 비적응 MDH의 활성 촉진은 효소 반응 초기인 1분으로 최대값에 도달했다. 카드뮴 적응 MDH와 비적응 MDH의 Km값은 두 효소 모두 6.9 mM L-malate였다. 그러나, 카드뮴 비적응 MDH 활성은 카드뮴에 의하여 Km값이 변화되지 않았고 Vmax만 증가되었으나 카드뮴 적응 MDH 활성은 카드뮴에 의하여 Km값과 Vmax값 모두 변화되었다. This study was carried out to investigate the effect of cadmium ion on activities of cadmium-adapted malate dehydrogenase (adapted-MDH), which is defined to be an enzyme obtained from an extreme cadmium-tolerant yeast Hansenula anomaul B-7 grown in medium containing 1 mM cadmium ion. Cadmium-nonadapted malate dehydrogenase (nonadapted-MDH), which is defined to be enzyme expressed in the cells grown in $Cd^{2+}$ -free medium was also characterized by the same manner. Activities of the adapted-MDH and the nonadapted-MDH were strongly induced to 450% and to 150% in comparision with the control examined with 1 mM $Cd^{2+}$, respectively. The adapted-MDH activity was stimulated to 147%, 150%, and 135% compared with the control analyzed with 1 mM $Zn^{2+}$, 1 mM $Mn^{2+}$, and 1 mM $Ca^{2+}$, respectively and to 925%, and 250% compared with the control analyzed in the presence of 2 mM $Cd^{2+}$, and 2.5 mM $Zn^{2+}$, respectively. Km values of the adapted-MDH and the nonadapted-MDH were calculated to be the same 6.9 mM for L-malate, respectively. The Km value of the nonadapted-MDH was not changed by $Cd^{2+}$ while Vmax of the nonadapted-MDH was increased by $Cd^{2+}$. In contrast, both the Km and the Vmax values of the adapted-MDH were changed by $Cd^{2+}$.

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        누룩 미생물의 문헌적 고찰 (1945년 이전을 중심으로)

        유대식(Tae-Shick Yu),김현수(Hyun-Soo Kim),홍진(Jin Hong),하현팔(Hyun-Pal Ha),김태영(Tae-Young Kim),윤인화(In-Wha Yoon) 한국식품영양과학회 1996 한국식품영양과학회지 Vol.25 No.1

        누룩은 생소맥을 조분쇄하여 물로 혼합시켜 자연적으로 공지중의 여러 종류의 미생물을 배양시켜 만들었다. 그러므로 누룩에는 많은 종류의 사상균, 효모와 세균이 증식하였다. 누룩의 당화력은 원료 생소맥의 당화력과 대부분의 사상균의 당화력과 일부의 세균성 당화력에 기인하며, 발효력은 누룩효모와 극소수의 사상균에 의하여 이루어지고 있다. 1945년 이전까지 누룩으로부터 12속 59종의 사상균이, 8속 29종의 효모와 4속 16종의 세균이 분리되었다. 누룩사상균은 Aspergillus 속이 주종을 이루었고 Rhizopus속, Absidia속, Mucor속의 순으로 분포하고 있었고, Aspergillus속과 Rhizopus속은 중요한 누룩 당화균으로 작용하였다. 누룩의 대표적 효모는 Saccharomyces cerevisiae이며, 이 균이 알코올 발효에 가장 큰 역할을 담당하며 Saccharomyces coreanus도 전통 민속주인 탁주와 약주의 발효력에 깊이 관여한다고 사료된다. 누룩 중에 증식하는 세균은 양조학상 특별한 역할을 담당하지 않지만 Bacillus속과 젖산세균이 많이 분리되었으며, 젖산세균은 담금 초기에 pH의 안정화에 기여할 수 있다고 추측할 수 있다. Microorganisms are used beneficially in the food industry. Many different microorganisms also involved in traditional Korean Nuruk production. Until 1945, 59 fungal species from 12 different genus, and 29 yeast species from 8 different genus, and 16 bacterial species from 4 different genus were isolated and identified from Nuruk. Traditional Korean Nuruk consists of unboiled raw barley and various grains. They are grounded to paste and moistened and naturally inoculated by airborne microorganisms. Therefore, many kinds of microorganism such as fungi, yeast, and bacteria grow in Nuruk. Most fungi and raw grain in Nuruk produce amylases which represent saccharifying activity of Nuruk ; alcohol fermentability is mainly due to yeast and some species of fungi. Dominant species of Nuruk fungi were Aspergillus, Rhizopus and Absidia, and Mucor was found in less frequency. Aspergillus and Rhizopus were known to play import roles in the saccharification of Nuruk. Saccharomyces cerevisiae contributing to alcoholic fermentation grew on the surface of Nuruk. It seems that Saccharomyces coreanus is closely correlated with the alcoholic fermentation of traditional Korean Takju and Yakju brewing. Nuruk's bacteria were probably not considered as important microorganisms in traditional Korean liquor fermentation, even though Bacillus and lactic acid bacteria were continually isolated from Nuruk. The lactic acid bacteria seemed to play an important role in pH adjustment in the early brewing stage.

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        흰쥐에 있어서 홍국 첨가 식이가 혈청 지질성분 및 간조직의 유해산소 대사효소활성에 미치는 영향

        유대식(Tae-Shick Yu),김현희(Hyun-Hee Kim),윤종국(Chong-Guk Yoon) 한국식품영양과학회 2003 한국식품영양과학회지 Vol.32 No.2

        홍국 첨가식이로 성장시킨 흰쥐에 있어서 간조직의 유해산소 기구와 혈청 지질 성분의 변동에 어떠한 영향을 미치는지를 검토할 목적으로 Monascus로 제조된 홍국을 사료에 2%, 4% 첨가시켜 1개월간 사육한 후, 처치하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 300 g 내외의 흰쥐를 홍국 첨가식이로 1개월간 성장시키는 동안 2% 홍국 첨가 식이군의 체중증가율은 대조군 및 4% 홍국 첨가식이군보다 다소 낮게 나타나는 경향을 보였으며, 이러한 조건 하에서 간 기능은 2%, 4% 홍국첨가 식이군 모두 별다른 변화를 나타내지 않았다. 유해산소 생성에 관여하는 cytochrome P450 dependent aniline hydroxylase 활성은 2% 및 4% 홍국 첨가식이군이 대조군에 비해서 각각 32%, 37%의 유의한(p<0.05) 감소를 보였으며 홍국 첨가식이 농도를 달리한 실험군 간에 유의한 차이가 나타나지 않았다. 그러나 xanthine oxidase 활성은 2% 및 4% 홍국첨가 식이군이 대조군에 비해서 각각 29%, 36% 증가되었으며 2군간에는 의의 있는 차이는 없었다. 유해산소 해독에 관여하는 glutathione-S-transferase와 glutathion peroxidase 활성은 2% 및 4% 홍국 첨가 식이군 모두 대조군에 비해서 각각 19%, 23%의 유사한 증가를 보였으며, 특히 Catalase의 활성은 2% 및 4% 홍국 첨가 식이군이 대조군에 비해서 각각 41%, 25%의 유의한(p<0.05) 증가를 보였다. 그리고 superoxide dismutase의 활성과 간조직 glutathione의 함량은 2% 및 4% 홍국 첨가 식이군이 대조군에 비해서 높게 나타나는 경향을 보였으며, 2% 홍국 첨가식이군이 4% 홍국 첨가 식이군보다 약간 높게 나타났다. 한편 혈청 중 HDL-cholesterol은 2% 및 4% 홍국 첨가식이군이 대조군에 비해서 16% 및 8% 높게 나타나는 반면, LDLcholesterol은 대조군에 비해서 다같이 약 26% 정도 감소되는 경향을 보였고, triglyceride의 함량 역시 2% 및 4% 홍국 첨가 식이군이 대조군에 비해서 모두 약 26% 정도 감소되는 경향을보였다. 이때 동맥경화지수는 2% 및 4% 홍국 첨가식이군이 대조군에 비해서 각각 39%, 29%의 유의한(p<0.05) 감소를 보였으며, 2% 홍국 첨가식이군 4% 홍국 첨가식이군보다 감소의 정도가 크게 나타나는 경향을 보였다. 이상 실험결과를 종합해 볼 때 홍국 성분은 oxygen free radical의 일종인 H₂O₂를 제거하는 효소인 catalase의 활성을 증가시킴으로서 유해산소에 의한 동맥경화증의 발생을 예방시켜 줄 수 있을 것으로 사료되나 이점에 대해서는 추후 계속적인 연구 검토가 행해져야할 것으로 생각된다. To investigate the hepatic oxygen free radical metabolizing system and changes of serum cholesterol levels in rats fed a diet supplemented with Monascus pigment (MP), Sprague-Dawley rats weighing about 300 g have been fed a diet supplemented with 2% or 4% MP for a month. The rats fed 2% MP supplemented diet gained less body weight than the control rats and those fed 4% MP supplemented diet. Those fed 2% or 4% MP supplemented diet had no remarkable changes in liver function on basis of liver weight/body weight, serum levels of xanthine oxidase, alanine amino transferase activity. In rats fed 2% and 4% MP supplemented diet, hepatic cytochrome P450 dependent aniline hydroxylase activity significantly (p<0.05) declined about 32%, 37% respectively and showed no significant differences between rats fed 2% and 4% MP supplemented diet whereas those fed 2% MP supplemented diet showed about 29% increased hepatic xanthine oxidase activity. And hepatic glutathione S-transferase and glutathione peroxidase activites in rats fed 2% MP supplemented were more increased by about 17%, 28% respectively than the control rats. There were no significant differences both in between those fed 2% and 4% MP supplemented diet. Especially rats fed 2% or 4% MP supplemented diet showed a significant (p<0.05) increase in hepatic catalase activity by 41%, 25% compared with control rats and those fed 4% MP supplemented diet showed more decrease in tendency of catalase activity than those 2% MP supplemented diet. But hepatic superoxide dismutase activity and glutathione content were appeared to be similar value among three groups. On the other hand, rats fed 2% MP supplement diet showed 17% increased levels of serum HDL-choresterol and 26% decreased value of LDL-cholesterol and serum level of triglyceride. But no different value were appeared between those fed 2% and 4% MP supplemented diet. Especially in those fed 2% and 4% MP supplemented diet, artherogenic index were significantly (p<0.05) declined by 37%, 29% respectively compared with control. In conclusion, it is likely that rats fed a diet supplemented with a proper quantity of MP may have the potential of oxygen free radical detoxication and lowering of artherogenic index.

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        흰쥐에 있어서 홍국 색소 추출물이 알코올대사에 미치는 영향

        유대식(Tae-Shick Yu),최혜정(Hye-Jung Choi),윤종국(Chong-Guk Yoon) 한국식품영양과학회 2003 한국식품영양과학회지 Vol.32 No.4

        홍국 추출물(MPE)이 알코올대사에 어떠한 영향을 미치는지를 알아보기 위하여 흰쥐에 10% ethanol에 홍국 추출물을 1%, 2.5%, 5% 함유시킨 것을 1개월간 음용시킨 뒤, 처치하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 홍국 추출물을 첨가시킨 실험군은 정상군에 비하여 체중 증가율이 다소 낮게 나타났으며 이들 실험군 간에는 별다른 차이를 볼 수 없었다. 알코올만 투여한 대조군 및 홍국 추출물 함유 알코올 섭취군 모두 간 기능에 별다른 이상이 나타나지 않았다. 간 조직 중 alcohol dehydrogenase(ADH) 활성은 알코올 투여군이 정상군보다 87% 의 유의한 증가를 보였으며 홍국 추출물 1, 2.5 및 5% 함유해서 알코올을 음용시킨 Monascus군은 알코올만 섭취한 대조군에 비해서 각각 34, 29 및 21% 증가하였다. Aldehyde dehydrogenase(ALDH) 활성에 있어서는 1% Monascus군은 대조군에 비해서 32%의 유의한 증가를 보였으며, 2.5% 및 5% Monascus군 역시 대조군에 비해 증가되는 경향을 보였다. 이들 효소를 반응속도적인 측면에서 관찰해 볼 때, 1, 2.5 및 5% Monascus군은 대조군에 비하여 ADH의 Km치가 각각 40, 30 및 19% 감소되었으며, Vmax치는 알코올 투여군인 대조군은 정상군(8.26 nmole/min/㎎ protein)보다 43% 높게 나타났으며, 홍국 추출물함유 알코올음용군과 알코올단 독음용군 간에 별다른 차이가 나타나지 않았다. 그리고 ALDH의 Vmax치는 대조군에 비해서 1, 2.5, 5% Monascus군은 대조군에 비해서 각각 88, 56, 22% 증가되었다. 한편 1% 및 5% 홍국 추출물 함유 알코올을 흰쥐에 투여한 다음 경시별로 채혈하여 혈액 중 알코올을 측정하여 알코올 농도 곡선하면적으로 환산한 결과, 1% Monascus군은 대조군에 비하여 약 18% 감소되었으며 5% Monascus군은 대조군에 비해서 약 10% 감소되는 경향을 보였다. 이상 실험결과는 알코올에 홍국 추출물을 첨가시킴으로서 알코올대사와 더불어 알코올의 체외 배설을 촉진시키는 것을 시사해 주고 있다. To investigate the alcohol metabolizing system in liver of rats drunken 10% ethanol with Monascus pigment extract (MPE), Sprague-Dawley male rats weighing about 250 g have been drunken 10% ethanol containing 1, 2.5 and 5% Monascus pigment extract for a month. Three groups of rats drunken 10% ethanol with MPE gained somewhat less body weight than normal group, but the changes of body weight was not significantly different among the former groups. All groups drunken MPE supplemented alcohol had no remarkable changes in liver function on the basis of liver weight/body weight, the serum levels of alanine aminotransferase and xanthine oxidase activity. 10% alcohol drunken animals (control group) showed significantly increased activity of hepatic alcohol dehydrogenase (ADH) by 87% compared with normal group and the animals drunken 1%, 2.5% and 5% MPE showed respectively 34%, 29% and 21% increased activity of hepatic ADH, whileas Km value of ADH in 1, 2.5 and 5% MPE group decreased by 40%, 30% and 19% respectively compared with the control, but Vmax showed no significant changes among MPE groups. In case of aldehyde dehydrogenase (ALDH), 1% MPE group showed significantly increased activity by 32% and 2.5% or 5% MPE group showed increasing tendency compared with control, and Km value in three experimental groups declined by 27% and no particular changes were found among those. Furthermore, Vmax value in 1, 2.5 and 5% MEP group increased by 88, 56 and 22% respectively with the control. In the aspect of the area under the curve of a ethanol concentration versus time (AUC) profile obtained after administration of 10% alcohol with 1 or 5% MPE, the decreasing rate of AUC to the control was 18% in 1% MPE treated rats whereas 10% in 5% MPE group.

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