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HPLC 및 ELISA법에 의한 오염된 귤로부터 아플라톡신 B₁의 정량분석에 관한 연구
백광균,김진목,장향동 서울産業大學校 1997 논문집 Vol.45 No.1
아플라톡신 B1은 발암성 물질로서 Aflatoxin 화합물 중 독성이 가장 강한 것으로 알려져 있다. 아플라톡신 B₁의 온도와 상대습도 변화에 따른 생성량을 조사하기 위하여 귤에 Aspergillus flavus KCCM 35078 균을 접종하여 각각 상대습도 50%, 60%, 70%에서 25℃, 30℃, 35℃, 배양 시간은 72, 96, 120, 144, 168시간 동안 정치 배양하였다. 이때 Aflatoxin B₁의 생성량을 high performance liquid chromatography(HPLC) 및 direct competitive enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)법으로 측정하였다. 측정 결과는 25℃에서 상대습도가 70 %, 배양 시간은 168(7일)시간에서 최대 생성량을 보였다. 결과적으로 HPLC를 이용한 정량분석은 27.32ppm이었으며, ELISA법을 이용한 정량분석은 25.26ppm 이었으므로 감도의 차이를 보였다. 그리고 HPLC 이용에 의하면 가장 적게 생성된 것은 35℃, 상대습도 50%, 배양시간은 72(3일)시간에서 0.5ppm이 나타났다. 따라서 온도와 수분함량은 Aflatoxin B₁의 생성량에 큰 영향을 미쳤다. Aflatoxin B₁의 구조는 각각 MS, ¹H-NMR 그리고 I.R.의 기기분석 방법을 이용하여 확인 하였다. It was known that Aflatoxin B₁ had the strongest poisonous character out of aflatoxin compounds as a carcinogenic substance. To search production, according to change of temperature and relative humidity of aflatoxin B₁, inoculated with Aspergillus flavus KCCM 35078 strain, orange was incubated at 25℃ 30 ℃and 35℃ in relative humidity 50%, 60% and 70% respectively and suspensive incubated for 72, 96, 120, 144 and 168 hours. At this time, production of Aflatoxin B1 was measured by high performance liquid chromatography(HPLC) and direct competitive enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) methods. Measuring result shows that the highest production appeared at 25℃ and its relative humidity 70%, and incubation time, 168(7 days) hours. The result that was quantitatively analyzed by using HPLC was 27.32ppm and by using ELISA was 28.26ppm and shows difference of sensitivity. By using HPLC, the lowest production that appeared at 35℃, relative humidity 50% and incubation time 72(3 day)hours, was 0.5ppm, and so temperature and moisture content influenced much production of aflatoxin B₁. The structure of aflatoixn B₁ was identification by using instrumental analysis methods of MS, ¹H-NMR, I.R. respectively.