비소세포폐암주에서 산소 농도에 따른 미세 배양 환경과 세포 증식능

신종욱 ( Jong Wook Shin ),전은주 ( Eun Ju Jeon ),곽희원 ( Hee Won Kwak ),송주한 ( Ju Han Song ),이영우 ( Young Woo Lee ),정재우 ( Jae Woo Jeong ),최재철 ( Jae Cheol Choi ),김재열 ( Jae Yeol Kim ),박인원 ( In Won Park ),최병휘 ( By 대한결핵 및 호흡기학회 2007 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.63 No.3

배경 및 목적: 암세포는 빠른 증식 속도로 인하여 상대적인 저산소증에 노출되면서 비정상적인 종양 혈관을 형성하여 치명적인 병인을 형성한다. 저산소증에서의 암세포 내의 유전자 표현을 연구하는 것은 병인의 규명과 나아가 치료에 결정적인 단초를 제공할 수 있다. 이에 본 연구에서는 체외 배양한 비소세포폐암의 증식과 저산소증 상태에 대한 연구를 시행하였다. 재료 및 방법: 비소세포폐암주인 A549를 RPMI 배지에서 계대 배양하였다. 저산소 유사 상태는 Modular Incubator Chamber(MIC-101)을 이용하였고 5% 이산화탄소와 95% 질소 혼합 가스를 5분간 공급하여 저산소 상태를 만들었으며 세포 배양액을 채취하여 혈액가스분석기(Blood Gas Analyzer ABL 725)로 세포 배양 상태를 측정하였다. 대조군으로 5% CO2와 멸균한 대기 공기 95%가 혼합된 가스를 사용하였다. 세포의 증식 상태는 MTT 방법을 실시하였다. 결과: 1. MIC-101을 이용하였을 때, 무산소혼합가스를 투여 후 30분에 50%의 산소 분압저하를 확인하였으며, 대기 가스에 의해 산소농도를 회복하는 것을 볼 수 있었다. 2. 무산소 혼합가스로 정화(purging)를 하면 산소의 분압을 더 낮출 수 있었다. 3. 저산소 상태에서 세포 배양액 내에는 pH 감소, 젖산 증가, 포도당의 감소 와 같은 미세환경이 변하였다. 4. 세포배양액에 따라 저산소에 의해 유도되는 포도당 저하에 차이가 있었다. 5. 비소세포폐암주는 저산소에 의해 증식능이 억제되었다. 결론: 저산소 상태는 세포 배양액 내 포도당 농도의 감소, 젖산의 증가, pH의 감소 등 세포 배양 미세 환경을 변화시키며, 비소세포폐암세포는 증식이 억제된다. 저산소는 미세 환경 변화와 함께 직접적으로 그리고 간접적으로 비소세포의 증식능에 영향을 미친다. Background: Abnormal angiogenesis can induce hypoxia within a highly proliferating tumor mass, and these hypoxic conditions can in turn create clinical problems, such as resistance to chemotherapy. However, the mechanism by which hypoxia induces these changes has not yet been determined. Therefore, this study was conducted to determine how hypoxia induces changes in cell viability and extracellular microenvironments in an in vitro culture system using non-small cell lung cancer cells. Methods: The non-small cell lung cancer cell line, A549 was cultured in DMEM or RPMI-1640 media that contained fetal bovine serum. A decrease in the oxygen tension of the media that contained the culture was then induced in a hypoxia microchamber using a CO2-N2 gas mixture. A gas analysis and an MTT assay were then conducted. Results: (1) The decrease in oxygen tension was checked the anaerobic gas mixture for 30 min and then reoxygenation was induced by adding a 5% CO2-room air gas mixture to the chamber. (2) Purging with the anaerobic gas mixture was found to decrease the further oxygen tension of cell culture media. (3) The low oxygen tension resulted in a low pH, lactic acidosis and a decreased glucose concentration in the media. (4) The decrease in glucose concentration that was observed as a result of hypoxia was markedly different when different types of media were evaluated. (5) The decrease in oxygen tension inhibited proliferation of A549 cells. Conclusion: These data suggests that tumor hypoxia is associated with acidosis and hypoglycemia, which have been implicated in the development of resistance to chemotherapy and radiotherapy. (Tuberc Respir Dis 2007; 63: 242-250)

열중성자 조사가 발아하는 콩에 있어서의 Glyoxylate Cycle 에 미치는 영향

박인원,이근배 ( In Won Park,Keun Bai Lee ) 생화학분자생물학회 1974 BMB Reports Vol.7 No.1

The effects of thermal neutron-irradiation on the activities of the two key enzymes in glyoxylate pathway, i.e. malate synthetase and isocitritase in the germinating soybean seeds were studied. The activity of condensing enzyme has shown an increased activity after neutron-irradiation. Decreased tendency of incorporation of acetate-2-C^(14) into malate and glyoxylate after neutron-irradiation suggests the activities of both isocitritase and malate synthetase were inactivated by neutron-irradiation.

주변부 포도막염의 임상분석

박인원(In Won Park),정흠(Hum Chung) 대한안과학회 1989 대한안과학회지 Vol.30 No.4

시토신 메틸렌 비스유도체의 형성

박인원,이윤배,이강렬 ( In Won Park,Yun Bae Lee,Kan Gryul Lee ) 생화학분자생물학회 1973 BMB Reports Vol.6 No.1

Three reaction products were obtained by the reaction between cytosine and formaldehyde at pH 5.6. The products formed were separated by using Dowex AG 50W-X4 column, 2 ㎝ × 36 ㎝. The column was eluted with 2 N HCl at a flow rate of 1 ㎖/min.. From the nitrous acid treatment of the products, we conclude the structures to be as following; the monomethylol derivative is modified at 1-N position, and other two products are methylene bis-derivatives, one of which is bridged at 1-N positions of two cytosine residues and the second one is bridged at N⁴ positions of two cytosine residues. The ultraviolet absorption of the bis-derivatives behaves as it is additively contributed by the two cytosine residues. All three products are stable in 2 N HCl solution, and relatively unstable in alkaline solution.

원저 : 기관지내시경상 기관지점막 색소침착의 임상적 의의

박인원 ( In Won Park ),유철규 ( Chul Gyu Yoo ),권오정 ( O Jung Kwon ),김영환 ( Young Whan Kim ),한성구 ( Sung Koo Han ),심영수 ( Young Soo Shim ),김건열 ( Keun Youl Kim ),한용철 ( Yong Chol Han ) 대한결핵 및 호흡기학회 1991 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.38 No.3

조기발견과 관리가 중요한 당뇨망막병증

박인원,Park, In-Won 한국발명진흥회 2007 發明特許 Vol.32 No.12

전해질막이 없는 연료전지의 연료 이용률 향상을 위한 수치적 연구

박인원(In-won Park),윤준용(Joon-yong Yoon),변성준(Sung-joon Byun),신명섭(Myung-seob Shin) 한국유체기계학회 2009 유체기계 연구개발 발표회 논문집 Vol.2009 No.-

Formation of Methylene Bis-derivatives of Cytosine

박인원,이윤배,이강렬,Park, In-Won,Lee, Yun-Bae,Lee, Kang-Ryul 생화학분자생물학회 1973 한국생화학회지 Vol.6 No.1

pH 5.6에서 시토신과 포름알데히드 사이의 반응에 의하여 세 가지 생성물질을 얻었다. 형성된 생성물질을 $2\;cm{\times}36\;cm$ 크기의 Dowex AG 50 W - X4 대롱으로 분리하였다. 대롱은 1 ml/분의 유속으로 2N HCl로 용리하였다. 생성물질을 아질산으로 처리한 결과로부터 그들의 구조가 다음과 같음을 결론짓는다. 모노에틸올 유도체는 1-N 위치에서 변형된 것이다. 그밖의 두 생성물질은 메틸렌 비스유도체이고 그 중 하나는 두 시토신 잔기의 1-N 위치에서 다리결함을 이루고 있고 다른 하나는 시토신 잔기의 $N^4$ 위치에서 다리결합을 이루고 있다. 버스유도체들의 자외선스펙트럼은 두 개의 시토신 잔기에 위하여 가산적으로 기여되고 있는 것과 같은 성질을 나타낸다. 세 생성물질은 모두 2N HCl 용액에서는 안정하고 알칼리성 용액에서는 비교적 불안정하다. Three reaction products were obtained by the reaction between cytosine and formaldehyde at pH 5.6. The products formed were separated by using Dowex AG 50W - X4 column, $2\;cm{\times}36\;cm$. The column was eluted with 2N HCl at a flow rate of 1 ml/min. From the nitrous acid treatment of the products, we conclude the structures to be as following; the monomethylol derivative is modified at 1-N position, and other two products are methylene bis-derivatives, one of which is bridged at 1-N positions of two cytosine residues and the second one is bridged at $N^4$ positions of two cytosine residues. The ultraviolet absorption of the bis-derivatives behaves as it is additively contributed by the two cytosine residues. All three products are stable in 2N HCl solution, and relatively unstable in alkaline solution.

불순한 국산 $^{32}P-H_3PO_4$의 정제와 [${\gamma}-^{32}P$]-ATP의 합성에의 응용

박인원,정태능,Park, In-Won,Johng, Tae-Neung 생화학분자생물학회 1984 한국생화학회지 Vol.17 No.1

이 연구의 목적은 한국 에너지 연구소에서 생산하는 불순한 $^{32}P-H_3PO_4$를 생화학적 용도에 알맞는 순도까지 정제하고, 그것을 [${\gamma}-^{32}P$]-ATP의 합성에 응용하고자 하는 데 있다. $^{32}P-H_3PO_4$의 조용액에 들어 있는 주되는 불순물들은 황산 이온과 나트륨 이온 들임을 알았다. 양이온 교환수지와 음이온 교환수지들의 두 층으로 된 배합 대롱을 사용하여 이 이온들을 불순한 $^{32}P-H_3PO_4$ 용액에서 제거하였다. 이러한 방법으로 불순한 $^{32}P-H_3PO_4$를 생화학적 순도까지 정제하였다. $^{32}P-H_3PO_4$의 회수율은 약 70%이었다. 정제된 $^{32}P-H_3PO_4$는 [${\gamma}-^{32}P$]-ATP의 합성에 이용가능할 정도로 충분히 순수하였다. 합성한 [${\gamma}-^{32}P$]-ATP는 RNA 조각들의 5' 말단의 히드록시기를 표지하는 데 효과적으로 이용되었다. The purpose of this research was, primarily, to develop the methods for the purification of the crude $^{32}P-H_3PO_4$ produced by the Korean Energy Research Institute to biochemical purity, and then, to apply the purified $^{32}P-H_3PO_4$ for the synthesis of [${\gamma}-^{32}P$]-ATP. The major impurities contained in the crude solution of $^{32}P-H_3PO_4$ were sulfate and sodium ions. These ions were eliminated from the crude $^{32}P-H_3PO_4$ solution by employing the combined column consisting of two layers of cation-and anion-exchangers. In this way, the crude $^{32}P-H_3PO_4$ was purified to biochemical purity. The recovery of $^{32}P-H_3PO_4$ was about 70%. The purified $^{32}P-H_3PO_4$ thus obtained was sufficiently pure for the synthesis of [${\gamma}-^{32}P$]-ATP, which was effectively used for the labeling of the 5'-OH termini of RNA fragments.

tRNA 의 화학적 변형에 관한 연구

박인원,이강렬,남정이,Park, In-Won,Lee, Kang-Ryul,Nam, Jeong-Ee 생화학분자생물학회 1974 한국생화학회지 Vol.7 No.1

At $37^{\circ}C$, phenylglyoxalation of yeast tRNA proceeds for two hours and no further reaction could be detected. Number of guanine residues modified after two hours' phenylglyoxalation is about six moles per tRNA molecule. Twenty-four hours' reaction produces at most seven residues of modified guanine. As the extent of tRNA modification increased, amino acid acceptor activity of phenylalanine tRNA decreased. Since the phenyl glyoxal modifies tRNA's no more than six residues of their guanine residues after two hours' reaction, phenylglyoxalation might be a recommendable means for the modification of exposed guanine residues on tRNA molecules. $37^{\circ}C$에서 효모 tRNA의 구아닌 잔기에 대한 페닐글리옥실화반응은 2시간이 지난 후에는 더 이상 진행되지 않았다. 변형된 구아닌 잔기의 수는 2시간 반응에서 tRNA 한 분자 당 6개이었다. 24시간 반응시켰을 때는 변형된 잔기의 수는 7개가 되었다. tRNA의 변형의 정도가 클 수록 tRNA의 페닐알라닌에 대한 수용능력이 감소된다. tRNA를 페닐글리옥살과 24시간 작용시켰을 때 구아닌 잔기가 6개 이상 변형되지 않으므로 페닐글리옥살은 tRNA에 있어서 노출된 구아닌 잔기들을 변형시키는 적당한 시약으로 생각한다.