Antimicrobial Efficacy of Fermented Dark Vinegar from Unpolished Rice

최학준,곽경자,최다빈,박재영,정현숙,Choi, Hakjoon,Gwak, Gyeongja,Choi, Dabin,Park, Jaeyoung,Cheong, Hyeonsook The Korean Society for Microbiology and Biotechnol 2015 한국미생물·생명공학회지 Vol.43 No.2

식초는 세계적으로 사용되는 조미료로 밀, 과일, 곡물 등을 원료로하여 다양한 방법으로 제조된다. 지금까지 식초에 대한 대부분의 연구들은 항산화활성에 한정된 연구였다. 본 연구에서는 현미를 이용하여 만든 현미 발효 식초의 이화학적 특성과 항균활성에 대해 시험하였으며, 현미발효식초의 항균활성은 paper disc-agar diffusion 방법을 이용하여 조사하였 때, 병원성 박테리아와 효모에 대해 강한 항균활성을 나타내었다. 특히 Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Listeria monocytogenes, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhimurium, Yersinia enterocolitica, and Lodderomyces elongisporus의 균주에 대해서는 상용되는 항생제인 카베니실린과 테트라사이클린보다 더 높은 항균활성을 보였다. 항산화활성은 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) 라디칼 소거능을 이용하여 측정하였고, 대표되는 항산화제인 아스코르빅 산과 비슷한 활성을 나타내었다. 현미발효흑초의 발효중에 나타나는 균주를 동정하기 위해 TSB 고체배지와 YPD 고체배지에 현미발효흑초를 도포하였을 때, 분리된 콜로니를 16S rDNA sequence 분석을 통하여, FDVS-1, 2, 3 세가지 균주를 분리하였으며, phylogenic tree 분석법을 이용하여 조사하였을 때, 각각 Acetobacter papayae, Acetobacter pasteuranus, Acetobacter peroxidans와 유사하였다. Vinegar is a widely used acidic seasoning and can be manufactured using various methods and bases, including cereals, wheat, and fruits. Most studies on vinegar have been conducted to evaluate its antioxidant activity. In the present study, fermented dark vinegar (FDV) produced from unpolished rice was examined for its antimicrobial activity, biochemical content, including the amounts of sugar, total soluble sugar, organic acid, and free amino acids, and pH and physiological activity. The antimicrobial efficiency of FDV was assessed using the paper disc-agar diffusion method. FDV exhibited strong antimicrobial activity against the pathogenic bacteria and yeast strains that were tested. In fact, the activity of FDV was shown to be higher than that of the commercial antibiotics carbenicillin (50 µg/ml) and tetracycline (50 µg/ml) against Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Listeria monocytogenes, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhimurium, Yersinia enterocolitica, and Lodderomyces elongisporus. The antioxidant activity of FDV and ascorbic acid was evaluated. Using the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging method, we found that FDV has the highest activity of the antioxidants. After spreading FDV onto tryptic soy broth and yeast extract-peptone-dextrose agar media, the microbial strains were isolated and characterized through physiological and biochemical analysis. Based on 16S ribosomal DNA sequence analysis, the isolated microorganisms exhibited a close similarity to Acetobacter papayae, Acetobacter pasteurianus, and Acetobacter peroxidans.

현미 발효 슬러리의 항균활성

최학준 ( Hakjoon Choi ),곽경자 ( Gyeongja Gwak ),최다빈 ( Dabin Choi ),박재영 ( Jaeyoung Park ),정현숙 ( Hyeonsook Cheong ) 한국미생물생명공학회(구 한국산업미생물학회) 2015 한국미생물·생명공학회지 Vol.43 No.4

현미는 도정한 백미보다 이로운 영양분을 더 많이 함유하고 있다. 본 연구에서는 현미를 이용하여 만든 현미 발효 슬러리의 이화학적 특성과 항균활성에 대해 시험하였으며, 현미발효슬러리의 항균활성은 paper disc-agar diffusion 방법을 이용하여 6가지 병원성 균주 (Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Listeria monocytogenes, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhimurium and Yersinia enterocolitica)와 2가지 발효균주(Gluconacetobacter intermedius and Lodderomyces elongisporus)에 대해 항균성을 조사하였다. 특히, Staphylococcus aureus, E. coli, Listeria monocytogenes, P. aeruginosa, Salmonella typhimurium, Y. enterocolitica 그리고 Lodderomyces elongisporus에 대해서는 시판 항생제인 카베니실린과 테트라사이클린보다 더 높은 항균활성을 보였다. 항산화활성은 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) 라디칼 소거능을 이용하여 측정하였을 때, 대표되는 항산화제인 아스코르빅 산과 비슷한 활성을 나타내었다. 현미발효슬러리의 발효중에 나타나는 균주를 동정하기 위해 TSB 고체배지와 YPD 고체배지에 현미발효슬러리를 도포하였을 때, 분리된 콜로니를 16S rDNA sequence 분석을 통하여, 네가지 균주를 분리하였으며, phylogenic tree 분석법을 이용하여 조사하였을 때, 각각 G. intermedius, Lactobacillus casei, Lactobacillus plantarum 그리고 Acetobacter peroxydans와 유사하였다. Unpolished rice (UR) is considered to be a healthy alternative to white rice when coping with chronic diseases. In the present study, the fermented slurry of unpolished rice (FSUR) was evaluated with respect to its antimicrobial activities and biochemical characteristics, including the quantities of sugar, total soluble sugar, organic acids, free amino acids, pH, and physiological activity. The antimicrobial efficiency of FSUR was assessed using the paper disc-agar diffusion method. FSUR exhibited strong antimicrobial activity against six pathogenic bacterial strains (Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Listeria monocytogenes, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhimurium, and Yersinia enterocolitica) and two fermentation strains (Gluconacetobacter intermedius and Lodderomyces elongisporus). The antimicrobial activity of FSUR was higher than the commercial antibiotics, carbenicillin (50 μg/ml) and tetracycline (50 μg/ml) against S. aureus, E. coli, L. monocytogenes, P. aeruginosa, S. typhimurium, Y. enterocolitica, and L. elongisporus. Also FSUR had a high antioxidant activity. The microorganisms were isolated from FSUR using tryptic soy broth and yeast extract-peptone-dextrose agar media. The isolated microorganisms were characterized using physiological and biochemical analyses as well as by 16S rRNA gene sequencing and phylogenic analysis. 16S rRNA gene sequence analysis showed that the isolated microorganisms had a high similarity to G. intermedius, Lactobacillus casei, Lactobacillus plantarum, and Acetobacter peroxydans.

솔잎추출물의 피부건강 개선효과

최지은 ( Jieun Choi ),김웅 ( Woong Kim ),박재영 ( Jaeyoung Park ),정현숙 ( Hyeonsook Cheong ) 한국미생물생명공학회(구 한국산업미생물학회) 2016 한국미생물·생명공학회지 Vol.44 No.2

솔잎은 동의보감과 향약생약대사전에 간, 위, 심, 피부 등 질환 치료에 효과가 있다고 하여 예로부터 솔잎을 노화방지와 피부질환치료에 활용하여 왔다. Malassezia furfur (M. furfur)는 친유성 곰팡이로 인간 피부에 존재하는 흔한 균이다. 이 균은 대게 피부의 각질층에서 주로 발견되며, 어우러기, 지루성 피부염, 비듬, 모낭염, 건성 등의 각종 피부질환의 주요요인이다. 본 연구는 사람의 대부분의 염증실험에서 사용되는 Raw 264.7 세포를 이용하여 솔잎의 항염증 활성을 확인하였다. 솔잎을 에탄올, 물, 메탄올로 추출하여 항산화 효과를 확인한 결과, 메탄올 추출물에서 항산화능이 높게 나타났으며, 이에 따라 헥산, 에틸아세테이트, 부탄올, 물 층으로 나누었다. 이 4층을 이용하여 노화의 원인이 되는 자유라디칼의 소거능을 확인한 결과, 부탄올과 에틸아세테이트층에서 강한 항산화 활성이 나타났으며, M. furfur에 대한 항균활성을 확인한 결과 부탄올, 에틸아세테이트층과 헥산층에서 항균활성이 나타났다. 또한 티로시나아제 저해에 따른 미백활성은 4층 모두 대조군인 비타민C와 유사하게 나타났다. 세포실험을 위해 먼저 대식세포인 Raw 264.7에 솔잎 분획물을 처리하여 세포독성을 확인 한 결과 Hexane층에서 농도별로 높은 독성이 나타났으며 나머지 층에서는 독성이 나타나지 않음을 확인하였다. 이후 Malassezia furfur로 염증반응이 유도된 Raw 264.7에 에틸아세테이트, 부탄올, 물층을 처리하여 염증에 관련된 유전자들의 발현량을 Real-Time PCR을 통하여 확인하였다. 이때 사용된유전자는 IL-1β, TNF-α로 에틸아세테이트층이 염증과 깊은 연관이 있는 IL-1β와 TNF-α의 발현량을 낮추는 것으로 확인되었다. 모든 실험결과들을 종합해 보았을 때, 솔잎은 천연자원으로써 피부 건강과 관련된 건강식품, 건강보조제, 화장품 등 폭 넓은 범위로 사용될 수 있을 것으로 사료된다. Pinus densiflora Sieb. et Zucc. (P. densiflora) contains several phenolic compounds that exhibit biological activities, such as antimicrobial, antioxidant, and antihypertensive effects. However, the anti-inflammatory effect of P. densiflora on skin has rarely been reported. Malassezia furfur (M. furfur) is a commensal microbe that induces skin inflammation and is associated with several chronic disorders, such as dandruff, seborrheic dermatitis, papillomatosis, and sepsis. The aim of our study was to identify the anti-inflammatory effects of P. densiflora needle extracts on skin health subjected to M. furfur-induced inflammation. The methanolic extract of the pine needles was partitioned into n-hexane, EtOAc, n-BuOH, and water layers. We measured the anti-inflammatory effects (in macrophages) as well as the antioxidant, antifungal, and tyrosinase inhibitory activity of each of these layers. The antioxidant activity of the individual layers was in the order EtOAc layer > n-BuOH layer > water layer. Only the n-BuOH, EtOAc, and n-hexane layers showed antifungal activity. Additionally, all the layers possessed tyrosinase inhibition activity similar to that of ascorbic acid, which is used as a commercial control. The EtOAc layer was not cytotoxic toward the RAW 264.7 cell line. Interleukin 1 beta and tumor necrosis factor (TNF)-α expression levels in M. furfurstimulated RAW 264.7 cells treated with the EtOAc layer were decreased markedly compared to those in cells treated with the other layers. Taken together, we believe that the needle extracts of P. densiflora have potential application as alternative anti-inflammatory agents or cosmetic material for skin health improvement.

솔잎분말과 생즙을 첨가한 쌀 마들렌의 항산화성과 품질 특성

김원지(Won-Ji Kim),김지명(Ji-Myoung Kim),정현숙(Hyeonsook Cheong),허영란(Young Ran Huh),신말식(Malshick Shin) 한국식품영양과학회 2014 한국식품영양과학회지 Vol.43 No.3

솔잎의 기능성을 부여한 쌀가루 가공 제품을 개발하기 위하여 동결건조 한 솔잎분말과 압착에 의한 솔잎생즙을 각각 첨가하여 쌀 마들렌을 제조하였고 이화학적, 텍스쳐 및 관능평가를 실시하였으며 제품의 항산화 활성을 비교하였다. 솔잎을 첨가한 제품의 항산화 활성이 대조군에 비해 높음을 확인하였고, 같은 소재의 솔잎도 첨가되는 물질의 상태가 달라 제품의 품질에 유의적인 영향을 주었다. 마들렌의 비체적은 솔잎분말을 첨가하였을 때를 제외하고 모두 증가하였으며 텍스쳐도 유의적인 차이를 보였다. 본 연구를 통해 쌀 마들렌의 선호도는 솔잎분말 첨가 제품이 더 좋게 평가되었다. 위의 결과 솔잎의 향과 맛을 가지고 항산화 활성이 있는 솔잎 쌀 마들렌을 제조하려면 솔잎분말을 쌀가루에 대해 0.6~1.8%, 솔잎생즙 0.6% 첨가한 것이 전체적인 선호도가 높았으며 그중 솔잎향과 전체적인 맛이 높은 쌀 마들렌은 솔잎분말을 쌀가루에 대해 1.2% 첨가하는 것임을 알 수 있었다. To develop health functional gluten-free rice madeleines added with pine needle, rice flours were prepared by adding different contents (0.6, 1.2, and 1.8% on rice flour basis) of freeze-dried pine needle powder (PP) and extract (PE, by pressing pine needles). The preparation, textural and sensory properties, and antioxidative activities of rice madeleines were investigated. The antioxidative activities of rice madeleines added with PP and PE were higher than those of the control and were significantly different from each other. The specific volume of rice madeleines added with PE was higher than that added with PP. Lightness and yellowness decreased with increasing PP or PE content, whereas redness showed the reverse trend. Textural properties were also significantly different according to pine needle type and content. Hardness values of rice madeleines added with 1.2 and 1.8% PP or 1.2% PE were reduced compared to that of control. Hardness values increased while other textural properties decreased during storage. In the sensory test, color, flavor, and taste scores increased with increasing PP or PE contents, whereas flavor and overall quality scores were highest in rice madeleine added with 1.2% PP. Based on these results, pine needle powder addition improved antioxidative activities and overall quality.

솔잎착즙액의 발효에 따른 기능성 효과

박가영(Gayoung Park),리홍선(Hongxian Li),황인덕(Indeok Hwang),정현숙(Hyeonsook Cheong) 한국생물공학회 2006 KSBB Journal Vol.21 No.5

발효과정이 솔잎 착즙액의 항산화, alpha-Glucosidase 및 Angiotensin Converting Enzyme 저해 활성에 미치는 영향

김소윤(So-Yun Kim),이현정(Hyun-Jung Lee),박재희(Jae-Hee Park),김래영(Rae-Young Kim),정현숙(Hyeonsook Cheong),박은주(Eunju Park) 한국식품영양과학회 2013 한국식품영양과학회지 Vol.42 No.3

솔잎착즙액과 솔잎발효액의 항산화활성을 분석하기 위하여 총 페놀함량, DPPH 라디칼 소거능, 총 항산화능,ORACROO? 활성, CAC 활성을 분석하였고, 항유전독성을 분석하기 위하여 DNA 손상 억제능을 분석하였으며, 항당뇨효과와 항고혈압 효과를 분석하기 위하여 각각 α-glucosidase 및 ACE 저해활성을 분석하였다. 총 페놀 함량은 솔잎착즙액(17.3 mg GAE/g)이 솔잎발효액(4.6 mg GAE/g)보다 유의적으로 3.7배 높았으며, 이는 발효가 진행됨에 따라 페놀 성분이 침전된 결과로 보인다. DPPH 라디칼 소거능, 총항산화능 및 ORACROO? 활성은 솔잎착즙액이 솔잎발효액보다 유의적으로 높았다. 즉 1 mg/mL 수준에서 솔잎착즙액과 솔잎발효액의 DPPH 라디칼 소거능은 각각 33.3%, 21.4%로 나타났고, 60~530 μg/mL 농도에서 솔잎착즙액이 솔잎 발효액보다 유의적으로 높은 총 항산화능을 나타내었으며, 2~100 μg/mL 농도에서 솔잎착즙액이 솔잎발효액보다 유의적으로 높은 ORACROO? 활성을 나타내었다. 솔잎착즙액과 솔잎발효액의 CAC 활성은 AAPH 처리군보다 솔잎착즙액 및 솔잎발효액 처리군의 CAC 활성이 농도 의존적으로 증가하였으며, 50 μg/mL 농도를 제외하고 두 그룹 간의 유의적인 차이는 나타나지 않았다. 솔잎착즙액과 솔잎발효액의 항산화활성의 상관관계는 총 항산화능과 DPPH 라디칼 소거능(r=0.836, p=0.000) 및 ORAC assay(r=0.918, p=0.000)간의 높은 양의 상관관계가 나타났을 뿐만 아니라 DPPH라디칼 소거능과 ORAC assay(r=0.909, p=0.000) 간에도 높은 양의 상관관계가 나타나 솔잎착즙액과 솔잎발효액의 높은 항산화활성을 추측할 수 있었다. H2O2로 유도된 산화적 스트레스에 대한 DNA 손상 억제능은 솔잎착즙액과 솔잎발효액에서 농도의존적으로 증가하였으며, 50 μg/mL 농도에서 솔잎발효액이 솔잎착즙액보다 더 높은 경향을 나타내었다. 솔잎착즙액과 솔잎발효액의 항당뇨 효과를 알아보기 위하여 α-glucosidase 억제능을 실험한 결과 희석배율이 증가할수록 솔잎발효액의 α-glucosidase 억제능은 급격히 감소하는 반면, 솔잎착즙액은 솔잎발효액보다 높은 활성을 유지하는 것으로 나타났다. 항고혈압 효과 분석을 위한 ACE 저해활성은 2배 희석 시 솔잎착즙액 87.1%, 솔잎발효액 60.0%로 솔잎착즙액의 ACE 저해활성이 높은 경향을 나타내었다. 본 연구를 통해 솔잎착즙액의 다양한 생리활성을 평가하고자 하였으며, 발효가 이러한 생리활성에 미치는 영향을 분석하고자 하였다. 본 연구에서 2년간 발효한 솔잎발효액만을 분석하였고, 발효기간에 따른 활성의 변화를 평가하지 못한 제한점이 있으나 본 연구의 결과는 지금까지 연구가 미흡했던 솔잎착즙액의 생리활성을 보고함으로써 솔잎을 활용한 기능성 소개개발에 유용한 자료로 제안될 수 있을 것이다. 또한 향후 연구에서 솔잎착즙액의 기능성을 증대시킬 수 있는 발효과정에 대한 연구가 수행되어야 할 것이다. The objective of this study was to compare the content and metabolic activities between fresh pine needle juice (PNJ) and fermented pine needle juice (FPNJ). A variety of factors were measured, including total phenolic content (TPC), antioxidant activity [DPPH radical scavenging activity (RSA), total radical-trapping antioxidant potential (TRAP), oxygen radical absorbance capacity (ORAC), cellular antioxidant capacity (CAC)], anti-genotoxic activity, α-glucosidase inhibitory activity, and angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitory activity. The TPC was 17.3±0.2 and 4.6±0.0 mg GAE/g in PNJ and FPNJ, respectively. The DPPH RSA, TRAP, and ORAC values increased in a dose-dependent manner for both PNJ and FPNJ, with significantly higher activities in PNJ than FPNJ. The CAC against AAPH-induced oxidative stress in HepG2 cells was protected by both PNJ and FPNJ. Pretreatment with PNJ and FPNJ in human leukocytes produced significant reductions in H2O2-induced DNA damage at a concentration of 50 μg/mL. α-Glucosidase inhibitory activity was significantly higher in FPNJ than PNJ. The ACE inhibitory activity was about 87.1% and 60.0% in 1:1 diluted PNJ and FPNJ, respectively. This study suggests that the fermentation of PNJ could enhance the regulation of blood glucose metabolism and both PNJ and FPNJ might be a new potential source of natural antioxidant, anti-diabetic, and anti-hypertensive agents applicable to food.

감자(Solanum tuverosum L.cv.Sumi)의 소괴경 형성에 따른 Peroxidase와 Esterase Isozyme 양상

송규상,정현숙,박민희 조선대학교 부설 유전생물공학연구소 1994 유전생물공학연구지 Vol.4 No.-

소괴경 형성 단계에 따른 생리학적 연구의 일환으로 peroxidese와 esterase의 효과 활성과 isozyme 양상을 비교 관찰한 결과 소괴경 형성 초기인 배양 7일째 단백질의 함량 및 peroxidase와 esterase의 활성이 가장 높았으며, 발생이 진행됨에 따라 점차 감소되었다. 그러나 단백질 함량과 esterase 활성은 성숙단계인 배양 60일째에서 증가하였다. 이는 괴경형성 초기에 새로운 단백질들이 합성되어 축적되고 이러한 과정에서 peroxidase와 esterase의 활성이 증가되는 것으로 사료된다. 전체 단백질 전기영동 양상은 서로 다르게 나타났으며, 소괴경에서 40 KD의 patatin이 main band로 나타났다. Peroxidase isozyme 양상을 비교 관찰한 결과 모든 단계에서 10개의 band가 나타났으며, pI 6.72의 band가 주 band로 나타났다. Esterase isozyme 양상은 pI 4.48의 band가 주 band로 나타났으며, 배양 15일에서부터 pI 5.78의 band가 나타났다. 그리고 배양 60일째에서는 pI 7.52의 새로운 band가 나타났다. 그러므로 이들 isozyme 양상의 변화는 감자의 분화와 발생에 중요한 작용을 하는 것으로 사료된다. In order to investigate physiological change depending on the developmental stage of microtuber, the microtubers formed in SH medium were examined the changes of peroxidase and esterase activity, and their isozyme patterns as well. Protein content, peroxidase and esterase activities were the highest at the 7 day-culture of the microtuber and then gradually decreased on the microtuberization, whereas protein content and esterase activity increased at the mature stage of the 60 day-culture. Therefore, these results indicate that a specific group of proteins was deposited at the early stage of tuberization and increased peroxidase and esterase activity. In addition, total protein patterns were different on the SDS-PAGE, and were appeared the patatin as main bands. Peroxidase isozyme patterns were appeared 10 bands in all stages, and were appeared bands of pI 6.72 as main. Also, Esterase isozyme were exhibited different pattern, and main bands of pI 4.48, new bands of pI 5.78, and pI 7.52 were appeared from the 7 day-, 15 day-, and 60 day-cultured microtuber, respectively. These results suggest that the changes of peroxidase and esterase activities and isozyme patterns are important factor in the differentiation and development of potato.

In vitro Regeneration of potato (Solanum tuberosum cv. Jopung) transformants

Park, Yoonkyung,Cheong, Hyeonsook 조선대학교 생명과학연구소 1997 생명과학 연구 Vol.5 No.-

Efficient plant regeneration has been achieved in the potato plant (Solanum tuberosum cv. Jopung). We found that a modified medium was given shoot regeneration within 10 weeks after explants infected with A. tumefaciens were cultured. Callus appeared at the cut edges of tuber discs and of stem segments, mainly at the basal parts calli were observed. Some explants started to form shoots and roots after two to three weeks in stage Ⅲ medium. They were then transferred to MS medium containing 200 ㎎/L kanamycin. The transformed shoots formed roots at the cut edge of the plantlets. In contrast. untransformed shoots did not form roots and became yellowish after a month in the same medium. In conclusion, we improved in vitro regeneration and transformation of potato using agrobacteria harboring β-glucuronidase (GUS) and modified media.

Vector Construction for the Tissue Specific Expression and Production of IL-2 Gene in Potato : Solanum tuberosum cv. Superior

Park, Yoonkyung,Cheong, Hyeonsook 조선대학교 기초과학연구소 1997 自然科學硏究 Vol.20 No.1

We constucted two expression vetors, pSSK-1 and pSSK-6, carrying IL-2 gene for the purpose of estimating the amount of its products and the effects in the potato. The pSSK-6 is under the control of 35S CaMV promoter(pSSK-1) specifically expressed in potato tuber. Also, pSSK-1, a binary vector carrying interleukin-2 (IL-2) gene, was constructed to be examine the possibility of the production of IL-2 and its effects in potato, and transferred into A. tumefaciens for the sake of the transformation of potato (solanum tuberosum cv. Superior). In our recent work, we verified that IL-2 gene from pSSK-1 vector was expressed in all parts of the transformed potato plant. However the amount of IL-2 protein was estimated very little.

Complementation of PAT Gene in the Tryptophan Mutants of Arabidopsis thaliana

Lim, Seon-Hee,Cheong, Hyeonsook 조선대학교 기초과학연구소 1997 自然科學硏究 Vol.20 No.1

In Arabidopsis thaliana, mutants are currently being used as tools for studing plant development and for examining metabolic pathway. Phosphoribosylanthranilate transferase (PAT) catalyzes the second step of the tryptophan biosynthetic pathway and is encoded by a single-copy gene that complements all the visible phenotypes of the tryptophan mutant (trp1-100) of Arabidopsis. The trp1-100 is blue fluorescent under UV light because it accumulates anthranilate. To obtain a plant with reducing PAT activity, PAT1 genes with several internal deletions in different promoter regions were introduced into trp1-100 using Agrobacterium. Then, homozygous T_3 plants were isolated and examined for blue fluorescence. Introduction of the PAT1 gene fusants results in the reversion of fluorescence phenotype except in the case of pHS105. A plant line carrying pHS105 gene fusant dose not completely complement the blue fluorescence but, it accumulates less anthranilate than trp1-100. The activity of PAT was reduced in the transgenic mutant as well.