Alteration of the Activated Responses in Platelet-Activating Factor-Stimulated Neutrophils by Protein Kinase Inhibitors

이강건,고지영,함동석,신용규,이정수,Lee, Kang-Kun,Ko, Ji-Young,Ham, Dong-Suk,Shin, Yong-Kyoo,Lee, Chung-Soo The Korean Society of Pharmacology 1996 대한약리학잡지 Vol.32 No.1

Platelet-activating factor (PAF)에 의하여 자극된 호중구 respiratory burst, 탈과립과 세포질 칼슘농도의 증가에 있어 protein kinase C와 protein tyrosine kinase의 역할을 관찰하였다. PAF에 의하여 자극된 호중구에서 superoxide 및 $H_2O_2$의 생성과 myeloperoxidase와 acid phosphatase의 유리는 protein kinase C 억제제인 staurosporine과 H-7 그리고 protein tyrosine kinase 억제제인 genistein과 tyrphostin에 의하여 억제되었다. PAF에 의한 호중구 세포내 칼슘농도의 증가는 staurosporine, genistein과 methyl-2,5-dihydroxycinnamate에 의하여 억제 되었다. Staurosporine은 PAF에 의하여 자극된 호중구에서 세포내 칼슘유리와 망간유입을 억제 하였다. Genistein과 methyl-2,5-dihydroxycinnamate는 PAF에 의한 망간유입을 억제하였으나, 세포내 칼슘유리에 대한 이들의 효과는 관찰되지 않았다. PMA에 의하여 활성화된 호중구에서 세포내 칼슘농도의 증가에 대한 PAF의 자극효과는 감소되었다. Protein kinase C와 protein tyrosine kinase는 PAF에 의하여 자극된 호중구에서의 respiratory burst, lysosomal enzyme유리와 칼슘동원에 관여할 것으로 제시된다. 세포내 칼슘농도의 증가는 protein kinase의 영향을 다르게 받는 세포내 칼슘유리와 세포외부로 부터의 칼슘유입에 의하여 이루어질 것으로 추정된다. Protein kinase C가 활성화되어 있는 상태에서 세포내 칼슘동원에 대한 PAF의 자극작용은 감소될 것으로 시사된다. Roles of protein kinase C and protein tyrosine kinase in the activation of neutrophil respiratory burst, degranulation and elevation of cytosolic $Ca^{2+}$ in platelet-activating factor (PAF)-stimulated neutrophils were investigated. Superoxide and $H_2O_2$ production and myeloperoxidase and acid phosphatase release in PAF-stimulated neutrophils were inhibited by protein kinase C inhibitors, staurosporine and H-7 and protein tyrosine kinase inhibitors, genistein and tyrphostin. The PAF-induced elevation of $[Ca^{2+}]_i$ in neutrophils was inhibited by staurosporine, genistein and methyl-2,5-dihydroxycinnamate. Staurosporine inhibited both intracellular $Ca^{2+}$ release and $Mn^{2+}$ influx in PAF-stimulated neutrophils. Genistein and methyl-2,5-dihydroxycinnamate inhibited $Mn^{2+}$ influx induced by PAF, whereas their effects on intracellular $Ca^{2+}$ release were not detected. In neutrophils preactivated by PMA, the stimulatory effect of PAF on the elevation of $[Ca^{2+}]_i$ was reduced. Protein kinase C and protein tyrosine kinase may be involved in respiratory burst, lysosomal enzyme release and $Ca^{2+}$ mobilization in PAF-stimulated neutrophils. The elevation of $[Ca^{2+}]_i$ appears to be accomplished by intracullular $Ca^{2+}$ release and $Ca^{2+}$ influx which are differently regulated by protein kinases. Preactivation of protein kinase C appears to attenuate the stimulatory action of PAF on intracellular $Ca^{2+}$ mobilization.

Protein Kinase 억제제 첨가 후 Platelet-Activating Factor에 의하여 자극된 호중구반응의 변경

이강건(Kang-Kun Lee),고지영(Ji-Young Ko),함동석(Dong-Suk Ham),신용규(Yong-Kyoo Shin),이정수(Chung-Soo Lee) 대한약리학회 1996 대한약리학잡지 Vol.32 No.1

Roles of protein kinase C and protein tyrosine kinase in the activation of neutrophil respiratory burst, degranulation and elevation of cytosolic Ca²⁺ in platelet-activating factor (PAF)-stimulated neutrophils were investigated. Superoxide and H₂O₂ production and myeloperoxidase and acid phosphatase release in PAF-stimulated neutrophils were inhibited by protein kinase C inhibitors, staurosporine and H-7 and protein tyrosine kinase inhibitors, genistein and tyrphostin. The PAF-induced elevation of [Ca²⁺]<sub>i</sub in neutrophils was inhibited by staurosporine, genistein and methyl-2,5-dihydroxycinnamate. Staurosporine inhibited both intracellular Ca²⁺ release and Mn²⁺ influx in PAF-stimulated neutrophils. Genistein and methyl-2,5-dihydroxycinnamate inhibited Mn²⁺ influx induced by PAF, whereas their effects on intracellular Ca²⁺ release were not detected. In neutrophils preactivated by PMA, the stimulatory effect of PAF on the elevation of [Ca²⁺]_i was reduced. Protein kinase C and protein tyrosine kinase may be involved in respiratory burst, lysosomal enzyme release and Ca²⁺ mobilization in PAF-stimulated neutrophils. The elevation of [Ca²⁺]<sub>i</sub appears to be accomplished by intracullular Ca²⁺ release and Ca²⁺ influx which are differently regulated by protein kinases. Preactivation of protein kinase C appears to attenuate the stimulatory action of PAF on intracellular Ca²⁺ mobilization. Platelet-activating factor (PAF)에 의하여 자극된 호중구 respiratory burst, 탈과립과 세포질 칼슘농도의 증가에 있어 protein kinase C와 protein tyrosine kinase의 역할을 관찰하였다. PAF에 의하여 자극된 호중구에서 superoxide 및 H₂O₂의 생성과 myeloperoxidase와 acid phosphatase의 유리는 protein kinase C 억제제인 staurosporine과 H-7 그리고 protein tyrosine kinase 억제제인 genistein과 tyrphostin에 의하여 억제되었다. PAF에 의한 호중구 세포내 칼슘농도의 증가는 staurosporine, genistein과 methyl-2,5-dihydroxycinnamate에 의하여 억제 되었다. Staurosporine은 PAF에 의하여 자극된 호중구에서 세포내 칼슘유리와 망간유입을 억제 하였다. Genistein과 methyl-2,5-dihydroxycinnamate는 PAF에 의한 망간유입을 억제하였으나, 세포내 칼슘유리에 대한 이들의 효과는 관찰되지 않았다. PMA에 의하여 활성화된 호중구에서 세포내 칼슘농도의 증가에 대한 PAF의 자극효과는 감소되었다. Protein kinase C와 protein tyrosine kinase는 PAF에 의하여 자극된 호중구에서의 respiratory burst, lysosomal enzyme유리와 칼슘동원에 관여할 것으로 제시된다. 세포내 칼슘농도의 증가는 protein kinase의 영향을 다르게 받는 세포내 칼슘유리와 세포외부로 부터의 칼슘유입에 의하여 이루어질 것으로 추정된다. Protein kinase C가 활성화되어 있는 상태에서 세포내 칼슘동원에 대한 PAF의 자극작용은 감소될 것으로 시사된다.

반도체 생산공정의 대기질 개선을 위한 복합 대기오염물의 습식화학 제거공정

전창성(Chang Sung Jun),김학주(Hak-Ju Kim),박영무(Young-Moo Park),이대원(Dae-Won Lee),함동석(Dong Suk Ham),전상문(Sang Moon Jeon),이관영(Kwan-Young Lee) 한국청정기술학회 2007 청정기술 Vol.13 No.2

Inhibitory Effects of 5-Hydroxytryptamine and Trytophan an Metal Ions and Reactive Oxygen Species-induced Liqid Peroxidation

Ham, Dong Suk,Shin, Yong Kyoo,Lee, Chung Soo 중앙대학교 의과대학 의과학연구소 1994 中央醫大誌 Vol.19 No.2

5-Hydroxytryptamin과 5-hydroxytryptophan은 마이크로조움과 미토콘드리아의 비효소성 지질 과산화를 억제한다고 제시되고 있으나, 이들의 항산화 작용기전은 밝혀지고 있지 않다. 본 연구에서는 Fe_2+ 단독 또는 Cu^2+와 H_2O_2에 의한 간 마이크로조움의 산화성 손상에 나타내는 5-hydroxytryptamine(5-HT)과 tryptophan의 효괄르 관찰하였다. 이들의 효과를 지질 과산화와 반응성 산소대사물에 대한 제거 작용으로써 조사하였다. Fe^2+ 단독 또는 Cu^2+와 H_2O_2에 의한 마이크로조움의 지질 과산화는 5-HT에 의하여 용량에 따라 뚜렷하게 억제되었으며 tryptophan에 의하여 억제되었다. Fe^2+에 의한 지질 과산화는 SOD, DABCO와 DETAPAC에 의하여 억제되었고 catalase, DMSO와 sodium formate에 의하여 약간 억제되었다. Cu^2+와 H_2O_2의 과산화 작용은 catalase와 DABCO에 의하여 억제되었고 sodium formate에 의하여 약간 억제되었으나 DMSO는 유의한 효과를 나타내지 않았다. Ferricytochrome c는 Fe^2+첨가에 따라 환원되었으며 이러한 환원은 SOD와 tryptophan에 의하여 효과적으로 억제되었다. Fe^2+ 단독 또는 xanthine과 xanthine oxidase의 존재하에서 OHㆍ생성은 5-HT, tryptophan과 DMSO에 의하여 억제되었다. 자외선 조사에 따른 ^1O_2의 생성은 DABCO에 의하여 억제되었으나 5-HT와 tryptophan의 영향은 받지 않았다. 이상의 결과로부터 5-HT와 tryptophan은 O^-ㆍ_2와 OHㆍ 같은 반응성 산소대사물과 아마도 산소-금속이온 복합체에 대한 제거 작용으로써 H_2O_2가 있거나 없는 상태에서 금속이온에 의한 지질 과산화를 포함한 산화성 조직손상을 억제할 것으로 추정된다. 5-Hydroxytrytamine and 5-hydroxytryptophan have been shown to inhibit nonenzymically induced-lipid peroxidations of microsomes and mitochondria. However, the antioxidant action mechanism of them has not been elucidated. In this study, effects of 5-hydroxytryptamine and tryptophan on the oxidative injury of liver microsomes caused by either Fe^+ alone or Cu^2+ and H_2O_2 were investigated. Their effects were studied with respect to lipid peroxidation and scavenging effect on reactive oxygen intermediates. Lipid peroxidation of microsomes induced by either Fe^2+ alone or Cu^2+ and H_2O_2 was remarkably inhibited by 5-HT and was inhibited by tryptophan in a dose dependent fashion. Fe^2+ - induced lipid peroxidation was inhibited by SOD, DABCO, DETAPAC and was slightly inhibited by catalase, DMSO and sodium formate. The proxidative action of Cu^2+ and H_2O_2 was inhibited by catalase and DABCO and was slightly inhibited by sodium formate, whereas DMSO did not show any significant effect. Ferricytochrome c was reduced by the addition of Fe^2+ and the reduction was effectively inhibited by SOD and tryptophan. OHㆍ production in the presence of either Fe^2+ alone or xanthine and xanthine oxidase was inhibited by 5-HT, tryptophan and DMSO. Production of ^1O_2 by U.V. irradiation, which is inhibited by DABCO, was not affected 5-HT and tryptophan. These results suggest that 5-HT and tryptophan may inhibit the oxidative tissue injury including lipid peroxidation induced by metal ion with or without H_2O_2 though scavenging action on reactive oxygen species, such as O^-ㆍ_2 and OHㆍ and probably oxygen-metal ion complexes.