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      • KCI등재

        호로파 종자 추출물의 테스토스테론 증가를 통한 남성갱년기 개선 효과

        김형근,차규민,김동현,김형중,구나연,오성훈 한국식품영양과학회 2019 한국식품영양과학회지 Vol.48 No.2

        Andropause and late-onset hypogonadism are followed by decreases in testosterone levels with age related to malfunction between cells constituting the testes, such as Leydig and Sertoli cells. Several clinical trials have suggested that testosterone replacement therapy would improve andropause symptoms; however, this could cause side effects such as cardiovascular diseases or benign prostatic hyperplasia. Therefore, alternative approaches such as regulating interactions between seminiferous tubules and interstitial compartments are needed. TestofenⓇ, a specialized Trigonella foenum-graecum seed extract, was previously shown to have clinical effects on andropause symptoms; however, the mechanisms of these effect were not examined. Herein, we revealed that T. foenum-graecum seed extract influences testosterone synthesis by lowering the levels of aromatase and 5α-reductase in vitro and in vivo and inducing secretion of follicle stimulating hormone, which is widely known as an activator of Leydig cells. In addition to lowering the levels of enzymes that degrade testosterone, T. foenum-graecum extract also increased 17β- and 3β-hydroxysteroid dehydrogenase, which are known as testosterone synthases, resulting in increased testosterone synthesis in vivo. Furthermore, T. foenum-graecum reduced the andropuase effect by up-regulating bioavailable testosterone level with down-regulation of SHBG levels in serum. In correlation with increased testosterone levels, growth hormone, insulin-like growth factor 1 and progesterone secretion levels were enhanced and cortisol levels were decreased by T. foenum-graecum seed extract in vivo which induced spermatogenesis and sperm motility. Overall, the results of this study indicate that T. foenum-graecum seed extract has preventive and therapeutic effects on andropause that occur via modulation of the interaction between Leydig and Sertoli cells in old mouse and H2O2 treated-Leydig and Sertoli cells. 본 연구에서는 호로파 종자 추출물의 남성갱년기에 대한 회복 효능 평가를 확인하였다. 이를 위해 과산화수소로 산화적 스트레스를 가한 TM3 세포 및 TM4 세포에 호로파 종자 추출물을 처리하여 세포생존율 회복능 및 testosterone, aromatase, 5α-reductase2의 분비를 확인하였다. 뿐만 아니라 나이든 22주령 SD rats을 이용하여 노화에 따른 호로파 종자 추출물의 남성갱년기 증상에 대한 회복능력을 확인하였다. 그 결과 호로파 종자 추출물은 산화적 스트레스를 가한 TM3 및 TM4의 억제된 세포생존율을 회복하였다. 또한 TM3 세포 내에서 억제된 testosterone의 분비량을 증가시켰으며, 증가한 aromatase 및 5α-reductase2의 분비량을 감소시켰다. 이를 통해 세포 내에서 산화적 스트레스로 인해 증가한 남성갱년기 증상을 억제하는 것을 확인할 수 있었다. 세포실험과 일관성 있게 동물실험을 통해서 total testosterone, free testosterone, bioavailable testosterone, progesterone의 함량이 증가한 것을 확인할 수 있었으며, testosterone의 활성을 억제하는 SHBG의 혈중 함량을 감소시키는 것 또한 확인할 수 있었다. 정자 형성 및 활성에 있어 영향을 주는 Sertoli 세포가 분비하는 인자로 알려진 GH, IGF-1의 분비량 또한 호로파 종자 추출물을 통해 증가시키는 것을 확인할 수 있었고, testosterone과 음성 상관관계를 갖는 cortisol의 함량 또한 감소하는 것을 확인할 수 있었다. Sertoli 세포의 정자 형성을 유도하는 호르몬으로 알려진 FSH의 수치는 호로파 종자 추출물을 통해 증가함을 확인하였고, 이를 통해 호로파 종자 추출물은 정자 형성 및 활성을 유도하도록 고환 주변세포의 미세환경을 조절함을 확인하였다. 그 결과 동물실험을 통한 정자 형성 및 활성 또한 호로파 종자 추출물을 통해 증진됨을 확인하였다. 이와 같이 호로파 종자 추출물은 독성 없이 다양한 노화 혹은 산화적 스트레스로 기인한 남성갱년기 증상을 완화함을 확인할 수 있었으며, 이는 기존 문헌을 통해 항산화 효과를 통한 결과로 예상할 수 있었다. 더 나아가 신호전달 기전을 확인하기 위한 추가 분자생물학적 실험이 필요할 것으로 판단된다.

      • KCI등재

        Pectinase-treated Panax ginseng ameliorates hydrogen peroxide-induced oxidative stress in GC-2 sperm cells and modulates testicular gene expression in aged rats

        Spandana Rajendra Kopalli,차규민,Konkuk University,Sang-Ho Lee,Jong-Hwan Sung,Seok-Kyo Seo,Si-Kwan Kim 고려인삼학회 2016 Journal of Ginseng Research Vol.40 No.2

        Background: To investigate the effect of pectinase-treated Panax ginseng (GINST) in cellular and male subfertility animal models. Methods: Hydrogen peroxide (H2O2)-induced mouse spermatocyte GC-2spd cells were used as an in vitro model. Cell viability was measured using MTT assay. For the in vivo study, GINST (200 mg/kg) mixed with a regular pellet diet was administered orally for 4 mo, and the changes in the mRNA and protein expression level of antioxidative and spermatogenic genes in young and aged control rats were compared using real-time reverse transcription polymerase chain reaction and western blotting. Results: GINST treatment (50 mg/mL, 100 mg/mL, and 200 mg/mL) significantly (p < 0.05) inhibited the H2O2-induced (200 mM) cytotoxicity in GC-2spd cells. Furthermore, GINST (50 mg/mL and 100 mg/mL) significantly (p < 0.05) ameliorated the H2O2-induced decrease in the expression level of antioxidant enzymes (peroxiredoxin 3 and 4, glutathione S-transferase m5, and glutathione peroxidase 4), spermatogenesis-related protein such as inhibin-a, and specific sex hormone receptors (androgen receptor, luteinizing hormone receptor, and follicle-stimulating hormone receptor) in GC-2spd cells. Similarly, the altered expression level of the above mentioned genes and of spermatogenesis-related nectin-2 and cAMP response element-binding protein in aged rat testes was ameliorated with GINST (200 mg/kg) treatment. Taken together, GINST attenuated H2O2-induced oxidative stress in GC-2 cells and modulated the expression of antioxidant-related genes and of spermatogenic-related proteins and sex hormone receptors in aged rats. Conclusion: GINST may be a potential natural agent for the protection against or treatment of oxidative stress-induced male subfertility and aging-induced male subfertility.

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