호장으로부터 분리한 Polydatin의 미백 및 주름억제 효능에 대한 연구

진무현 ( Mu Hyun Jin ),정의택 ( Eui Taek Jeong ),김미선 ( Mi-sun Kim ),송혜진 ( Hye Jin Song ),곽택종 ( Taek-jong Kwak ),박선규 ( Sun Gyoo Park ),이상민 ( Sang Min Lee ) 대한화장품학회 2011 대한화장품학회지 Vol.37 No.4

5,4'-dihydroxystilbene-3-O-D-glucopyranoside (polydatin)는 호장(Polygonum cuspidatum)에 존재하는 stilbenes류의 하나로 지금까지 피부에서의 효능이 잘 알려지지 않았다. 우리는 호장으로부터 Polydatin을 분리하여 얻었으며, 피부유래의 멜라노사이트와 fibroblast를 이용하여 효능을 검증하였다. 실험결과 멜라노사이트에서 polydatin은 타이로시네이즈 활성과 멜라닌 생성을 억제하였고, 멜라닌 생합성 과정에 관여하는 타이로시네이즈와 전사인자인 microphthalmia-associated transcription factor (MITF)의 발현을 억제하는 것을 확인하였다. 미백효과가 확인된 polydatin에 대하여 human fibroblast를 대상으로 type I procollagen 생합성에 미치는 영향을 분석한 결과 polydatin은 농도 의존적으로 콜라젠 합성을 촉진함을 알 수 있었다. 또한 polydatin의 피부에서의 효능을 검증하기 위해 인체효력시험을 통해 주름개선과 미백개선 효능을 검증하였으며 이를 통해 주름과 미백기능에 있어 유의한 효과를 확인하였다. 이상의 결과로부터 polydatin은 안전한 피부 미백 개선제 및 주름개선제로 사용될 수 있는 후보물질임을 제안하며, 상업적으로 활용하기 위해 원료화를 성공하였다. 5,4'-dihydroxystilbene-3-O-β-D-glucopyranoside (Polydatin) is one of the stilbenes found in Polygonum cuspidatum (P. cuspidatum), however, the effects of polydatin on skin biology remain to be elucidated. In this study, we obtained polydatin from P. cuspidatum and investigated the effects of polydatin in skin-derived melanocytes and fibroblasts. In melanocytes, polydatin inhibited not only the tyrosinase activity and melanin production but the expression of melanogenic factors, tyrosinase and microphthalmia-associated transcription factor (MITF). In addition, the level of type I procollagen in fibroblasts was analyzed, and polydatin significantly induced the production of type I procollagen in a dose-dependent manner. Finally we conformed that topical treatment of polydatin improved wrinkle and induced whitening of human skin in vivo. These data provide evidence that polydatin can be a potent candidate for the improvement of both skin wrinkle and whitening from the point of industry view.

별불가사리로부터 분리된 Asterosaponin P₁의 항노화 효능

진무현 ( Mu Hyun Jin ),이소영 ( So Young Lee ),여혜린 ( Hyerin Yeo ),김효진 ( Hyo Jin Kim ),장윤희 ( Yun Hee Chang ) 대한화장품학회 2018 대한화장품학회지 Vol.44 No.4

별불가사리(Asterina pectinifera Muller and Troschel)는 우리나라 전국 연안에서 흔히 볼 수 있는 토속종으로, 패류 양식장에 피해를 주는 불가사리류 중의 하나이다. 별불가사리 퇴치를 위해 대부분 건조하여 비료로 활용하고 있으며, 고부가가치 창출을 위한 다양한 연구가 진행되었으나 실제 활용은 미미한 실정이다. 따라서, 별불가사리로부터 피부 유용성분을 밝혀 새로운 활용 방안을 모색하고자 하였다. 성분연구를 통해 별불가사리로 부터 2종의 polyhydroxysteroid와 1종의 saponin을 분리하였으며, 이의 구조를 각각 5α-cholestane-3β,6α,7α,8,15α,16β,26-heptol, 5α-cholestane-3β,4β,6α,7α,8,15β,16β,26-octol 및 asterosaponin P₁으로 동정하였다. 이 물질들의 피부 효능을 확인한 결과 asterosaponin P₁이 표피 줄기세포의 증식을 촉진시키고, 각질형성세포에서 히알루론산을 합성하는 효소인 hyaluronan synthase-2와 hyaluronan synthase-3 유전자의 발현을 증가시킴을 확인하였다. 또한, asterosaponin P₁은 섬유아세포에서 진피의 주요 콜라겐인 type 1 콜라겐의 생합성을 촉진하는 효능을 보였다. 이상의 결과들로부터, 별불가사리로부터 분리한 asterosaponin P₁은 노화에 동반되는 피부 증상을 개선하는 항노화 화장품 소재로 활용될 수 있을 것으로 판단된다. The starfish, Asterina pectinifera Muller and Troschel (Asterinidae) is an indigenous species commonly found in all coasts of Korea causes damages to shellfish farms. In order to exterminate A. pectinifera, they are dried and used as fertilizer. Although various studies have been conducted to create high added value from the retrieved A. pectinifera, their actual utilization is relatively low. Accordingly, this study aimed to find new practical uses of starfish by identifying useful ingredients for skin anti-aging. Two polyhydroxysteroids and one asterosaponin were isolated from the A. pectinifera. The structures of these compounds were identified as 5α-cholestane-3β,6α,7α,8,15α,16β,26-heptol, 5α-cholestane-3β,4β,6α,7α,8,15β,16β,26-octol, and asterosaponin P₁ on the basis of chemical and spectroscopic analysis. Among these compounds, we have found that asterosaponin P₁ increased epidermal stem cell proliferation and the expression of hyaluronan synthase-2 and hyaluronan synthase-3 gene, which are enzymes that synthesize water-binding matrix hyaluronic acids in keratinocytes. In addition, asterosaponin P₁ increased synthesis of pro-collagen type I, a major dermal collagen in fibroblasts. As a result, asterosaponin P₁ isolated from A. pectinifera could be used as a useful cosmetic ingredient that improves skin symptoms accompanying skin aging.

Angelica^®의 피부 광노화에 대한 효과

진무현 ( Mu Hyun Jin ),정민환 ( Min-hwan Jung ),임영희 ( Young-hee Lim ),이상화 ( Sang Hwa Lee ),강상진 ( Sangjin Kang ),조완구 ( Wan-goo Cho ) 대한화장품학회 2005 대한화장품학회지 Vol.31 No.3

피부노화는 피부의 이상현상이나 질환은 아니며 나이가 들어감에 따라 시간의 진행에 따라 일어나는 퇴행성 변화로 외적형태의 변화로는 피부 건조 및 주름 등이 있다. 주름을 생성하는 원인에는 자외선, 건조 및 물리적, 화학적 자극 등 환경요인에 기인하는 피부 스트레스와 각질층의 수분량 저하, 비후화, 진피의 교원섬유, 탄력섬유의 양적, 질적 변화 등이 유발하는 피부의 탄력성이나 신축성의 저하를 들 수 있다. 본 연구에서는 Angelim dahurica root에서 얻어진 3종의 주름개선 유효성분의 구조분석 및 피부 노화에 대한 효과를 살펴보았다. Skin aging is not a disease nor an abnormal phenomenon but a collection of degenerative changes with age, characterized by skin dryness, wrinkle formation, and loss of skin elasticity. The skin wrinkles are caused by either genetically predisposed factors or environmental factors such as UV irradiation or physical/chemical stimulus. The histological manifestations of wrinkles are changes in both amount and integrity of elastic and collagen fibers. Here we report the isolation and characterization of 3 active compounds, prangenidin, 8-hydroxybergapten, and xanthotoxol from Angelica dahurica root. The anti-wrinkle activities of these compounds were also investigated.

유산균으로 발효한 침향공진단으로부터 분리한 Nodakenetin의 Neuraminidase 활성 억제 효능

서지현 ( Ji Hyun Seo ),박동준 ( Dong Jun Park ),이소영 ( So Young Lee ),조호성 ( Ho Song Cho ),진무현 ( Mu Hyun Jin ) 한국미생물 · 생명공학회 2020 한국미생물·생명공학회지 Vol.48 No.3

대표적인 한방 보약 처방인 원방공진단을 재해석한 침향공진단 (당귀, 녹용, 산수유, 및 침향의 혼합추출물)을 유산균으로 발효하고, 침향공진단 성분 중 발효를 통해 증가하는 성분을 분리, 정제하고 nodakenetin임을 동정하였다. 발효전 침향공진단(침향공진단 농축액 1% 함유 MRS 배지, unfermented Gongjin-dan, GD) 및 발효후 침향공진단(침향공진단 발효액, fermented Gongjin-dan, FGD)에서의 nodakenetin 함량 분석 결과, 각각 6 μg/ml과 70 μg/ml으로 발효를 통해 nodakenetin이 약 10배 이상 증가하였다. 한편, 고서에 전해지는 공진단의 면역력 강화 효능에 근거하여, GD 및 FGD의 인플루엔자 바이러스 증식 억제 효능을 확인하고자 Neuraminidase (NA) 활성 평가법(NA activity assay)을 실시하였다. 실험 결과, GD는 NA 활성을 억제하지 못하였으나, FGD는 농도의존적으로 NA 활성을 억제하였으며 500 μg/ml에서 대조군 대비 약 92%의 억제율을 보였다. 또한, 발효를 통해 증가한 침향공진단의 성분인 nodakenetin과 그 배당체인 nodakenin에 대한 NA 활성 평가 결과, nodakenin은 NA 활성을 거의 억제하지 못하였으나, nodakenetin은 농도의존적으로 NA 활성을 억제하였으며 250 μg/ml에서 대조군 대비 약 68%의 억제율을 보였다. 이상의 결과들을 종합하여, 유산균 발효를 통해 침향공진단 내에 미량 존재하던 nodakenetin이 nodakenin의 가수분해로 인해 증가하였으며, NA 활성 억제 성분인 nodakenetin이 증가함으로 인해 FGD도 높은 NA 활성 억제 효능을 보였다고 판단할 수 있었다. The purpose of this study was to identify the changes in the components of unfermented Gongjin-dan (GD) and fermented Gongjin-dan (FGD) and to confirm whether GD or FGD has an inhibitory effect on viral neuraminidase (NA) activity. A major component of FGD was isolated and identified as nodakenetin, which is the aglycone of nodakenin. After fermentation, the nodakenetin content in FGD was approximately 10- fold higher than that in GD. Then, we examined the viral NA-inhibitory activity of GD, FGD, nodakenin, and nodakenetin. At a concentration of 500 μg/ml, FGD inhibited viral NA activity by 92% compared to the DMSO-treated control, while GD barely inhibited viral NA activity. In addition, 250 μg/ml of nodakenetin inhibited viral NA activity by 68% compared to the control, while nodakenin inhibited viral NA activity by only 4% at the same concentration as nodakenetin. Collectively, these results suggest that FGD has a more remarkable viral NA-inhibitory activity than GD because the content of the anti-viral component nodakenetin was higher in FGD due to the hydrolysis of nodakenin by Lactobacillus plantarum KCTC 3104.

각질형성세포에서 왕불유행 헥산 분획물이 Laminin-332 발현에 미치는 효과

송혜진 ( Hye Jin Song ),김미선 ( Mi-sun Kim ),이홍구 ( Hong Gu Lee ),진무현 ( Mu Hyun Jin ),이상화 ( Sang Hwa Lee ) 대한화장품학회 2016 대한화장품학회지 Vol.42 No.2

피부 기저막(basement membrane, BM)이란 표피와 진피 사이에 존재하는 특별한 구조물로 표피와 진피를 단단히 고정시켜 피부 구조를 유지하는 데에 중요한 역할을 수행한다. 노화 및 자외선 노출에 의한 피부 기저막의 구조적 변화와 파괴는 피부 주름 형성과 탄력 저하를 포함하는 피부노화 현상의 요인으로 여겨지고 있다. Laminin-332 (LN-332)는 피부 기저막을 구성하는 주성분으로 피부에서 표피와 진피를 단단히 고정시키는데 중요한 역할을 한다. 본 연구에서는 왕불유행 헥산 분획물(Melandrium firmum hexane fraction, MFHF)이 각질형성세포에서 LN-332 발현에 미치는 효과를 확인하였다. 정량적 real-time PCR (RT-PCR)과 단백질 발현 분석을 통해서 MFHF가 LN-332의 mRNA 발현 및 단백질 발현을 촉진시키는 것을 확인하였다. 또한 MFHF가 어떤 신호전달 경로를 통해 LN-332 발현을 조절하는지 확인하기 위하여 p38 MAPK 억제제인 SB202190과 ERK1/2 억제제인 U0126을 처리한 결과, p38 MAPK 억제제에 의해서 LN-332 발현이 완벽히 억제됨을 확인하였다. 또한, 피부 기저막을 구성하고 있는 콜라겐 타입 VII과 integrin α6의 mRNA 발현 역시 MFHF에 의해 증가하는 것을 확인하였다. 우리는 본 연구를 통해 MFHF가 각질형성세포에 작용하여 피부 기저막을 구성하는 성분들의 생성을 촉진할 수 있는 소재로 작용할 수 있다는 것을 확인하였다. 이러한 결과는 기저막의 구조적, 기능적 이상에 의해 나타나는 피부노화 현상의 개선을 위해 활용할 수 있을 것이라 제안한다. Skin basement membrane (BM) is a specialized structure that binds dermis and epidermis of the skin and plays an important role in maintaining skin structure. Structural change and destruction of BM is reported to appear due to UV exposure and aging, which may contribute to skin aging including wrinkle formation and a decrease in elasticity of the skin. One of the key components of the BM is laminin-332 (LN-332), and is a major contributor to epidermal- dermal attachment. In this study, we elucidated the effects of Meladrium firmum hexane fraction (MFHF) on LN-332 expression in HaCaT, a human keratinocyte cell line. Quantitative real-time PCR (RT-PCR) and immunoblot analysis revealed that MFHF induced upregulation of LN-332 gene and protein expression. Next, cells were treated with p38 MAPK inhibitor (SB202190) prior to MFHF treatment to analyze the signaling pathway contributing to LN-332 expression. The mRNA and protein levels of LN-332 expression were suppressed completely by pretreatment with p38 MAPK inhibitor. Furthermore, MFHF also increased the mRNA level of collagen type VII and integrin α6 of skin BM component. These results collectively suggest that MFHF may have potential as an effective agent to stimulate the synthesis of BM components, and could be used to improve phenomenon of skin aging ascribed to the structural and functional impairments of BM in aged human skin.

천궁으로부터 분리된 ferulic acid의 히알루론산 생성에 미치는 효과

송혜진 ( Hye Jin Song ),진무현 ( Mu Hyun Jin ),이상화 ( Sang Hwa Lee ) 대한화장품학회 2013 대한화장품학회지 Vol.39 No.4

히알루론산(HA)은 피부의 세포외기질을 구성하는 주성분이다. 인간의 피부에서 히알루론산의 양은 노화와 함께 감소되는 것으로 보고되어 있으며, 이것은 노화에 따른 피부 수분 감소, 주름 형성 및 피부 탄력 저하에 관여한다고 알려져 있다. 지금까지 밝혀진 히알루론산 합성효소(hyaluronan synthase, HAS)들 중에 HAS-2가 사람의 피부 섬유아세포에서의 히알루론산의 합성을 조절하는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 천궁으로부터 분리된 ferulic acid가 사람의 피부 유래 섬유아세포에서 히알루론산의 생성에 미치는 효과를 확인하였다. Semi-quantitative RT-PCR과 quantitative real-time PCR을 통해 ferulic acid가 HAS-2의 발현을 증가시키는 것을 확인하였으며 ELISA assay를 통해 ferulic acid가 히알루론산의 생성을 증가시키는 것을 확인하였다. 결론적으로 본 연구를 통해 ferulic acid는 피부 노화에 따른 히알루론산의 감소에 의해 나타나는 건조, 주름 및 탄력 저하와 같은 현상을 개선시킬 가능성을 가진 물질임을 확인하였다. Hyaluronic acid (HA) is one of the major extracellular matrix components in skin. The HA content is reported to decline with age, which may contribute to decrease in skin moisture, wrinkle formation and the decrease in elasticity of the skin. Among the family of HA synthase genes (HAS-1, 2, 3) identified so far, HAS-2 plays crucial roles in the regulation of HA synthesis in human skin fibroblasts. In this study, we elucidated the effects of ferulic acid isolated from Cnidium officinale on HA production. Semi-quantitative RT-PCR and quantitative real-time PCR showed that ferulic acid increased mRNA level of HAS-2 gene and ELISA assay also revealed that ferulic acid increased HA production in human skin fibroblasts. Our study suggests that ferulic acid might prevent age-dependent skin deteriorations such as wrinkles, dryness and elasticity decrease, all of which could be ascribed to the reduction of the HA content in human skin.

Cordycepin에 의한 피부 섬유아세포 세포노쇠화 개선효과

김효진 ( Hyo Jin Kim ),이소영 ( So Young Lee ),김도형 ( Do Hyung Kim ),진무현 ( Mu Hyun Jin ),노석선 ( Seok-seon Roh ),김형민 ( Hyung-min Kim ),최인화 ( In-hwa Choi ),이명수 ( Myeong Soo Lee ),이상화 ( Sang Hwa Lee ) 대한화장품학회 2015 대한화장품학회지 Vol.41 No.2

세포 노쇠화(cell senescence)는 나이 듦에 따른 내인성 노화 및 질병들에서 나타날 수 있는 세포의 노화인자 발현, 세포분열 정지 등의 현상으로 일컬어진다. 피부세포의 경우, 노화 및 외부요인으로 인한 세포노쇠화가 일어나 세포분열의 정지 및 기능 이상이 관찰되며 이는 피부노화를 가속화시키는 요인이 된다. 본 연구에서는, cordycepin을 이용하여 노화된 피부세포의 세포 노쇠화 억제 및 기능 향상을 유도하여 피부노화 개선의 가능성을 제시하였다. 사람에서 유래한 섬유아세포를 이용하여 세포의 β-galactosidase 활성 세포염색 결과, 많은 계대의 세포에서 발현이 높게 나타남을 알 수 있었다. 항산화 및 항염 효과가 알려진 cordycepin을 많은 계대의 세포에 처리하였을 때 β-galactosidase 활성이 확연히 떨어짐을 확인하였고 무혈청 배지 조건에서 많은 계대 세포의 증식 및 생존율을 높이는 결과를 보였으며 세포 노쇠화와 많은 연관성이 대두되고 있는 미토콘드리아의 기능관련 실험을 진행한 결과, 높은 ROS억제능이 나타났다. 본 연구를 통하여 노화된 사람 피부 섬유아세포에서의 cordycepin의 세포 노화 개선능을 알 수 있었으며, 피부 항노화소재로서의 가능성을 확인하였다. Cell senescence can be identified by cellular changes that occur as a result of intrinsic aging and/or diseases. In case of skin cells, aging and cell senescence caused by external factors results in cessation of cell proliferation and cellular malfunction, which, in turn, accelerates skin aging. In this study, inhibition of cell senescence and enhancement of cell function were studied using cordycepin to evaluate the potential for skin anti-aging agent. By comparing with the number of senescence associated with β-galactosidase (SA-β-gal) positive cells in young and replicative aged human fibroblasts, it was found that replicative aged cells showed higher expression of β-galactosidase. Treatment of cor dycepin - known as an anti-oxidative and anti-inflammatory agent - reduced β-galactosidase expression in senescent cells and enhanced cell survival in serum-free culture condition. Cordycepin also showed superb inhibition of ROS, which is another indicator of cell senescence. The results of this study proved the anti-aging effect of cordycepin on human fibroblasts and also proposed a possibility of its use as an anti-aging cosmetic ingredient.

백수오(白首烏)와 비주화(啤酒花) 복합물의 에스트로겐 활성과 파골세포 분화 억제효과

박동준,이홍구,민경인,박형국,진무현,조호성,Park, Dongjun,Lee, Hong Gu,Min, Kyoungin,Park, Hyoungkook,Jin, Mu Hyun,Cho, Ho Song 대한본초학회 2022 大韓本草學會誌 Vol.37 No.5

Objectives : This study aimed to investigate the synergistic effect of combining Cynanchi Wilfordii Radix extract with Humuli Lupuli Flos extract on estrogenic and anti-osteoclastogenic activity. Methods : Estrogenic effect of a mixture of Cynanchi Wilfordii Radix extract and Humuli Lupuli Flos extract (CWHL), Cynanchi Wilfordii Radix extract, Humuli Lupuli Flos extract, caudatin (an active ingredient of Cynanchi wilfordii Radix extract) and 8-prenylnaringenin (an active ingredient of Humuli Lupuli Flos extract) were examined by proliferation E-screen assay and expression of estrogen inducible gene, pS2 via Real Time-PCR (RT-PCR) in MCF-7 estrogen responsive cells. And their estrogenic activities were investigated how to modulate Estrogen receptor 𝛽 by binding affinity assay. Inhibitory effect of CWHL, Cynanchi Wilfordii Radix extract, Humuli Lupuli Flos extract, caudatin and 8-prenylnaringenin on RANKL-induced osteoclast differentiation were tested by TRAP (Tartrate-resistant acid phosphatase) staining in osteoclastogenic RAW 264.7 cells. Results : CWHL, Humuli Lupuli Flos extract and 8-prenylnaringenin accelerated the proliferation of MCF-7 and the expression of pS2 in MCF-7. CWHL, Cynanchi Wilfordii Radix extract, Humuli Lupuli Flos extract, caudatin and 8-prenylnaringenin bind to estrogen receptor 𝛽. CWHL, Cynanchi Wilfordii Radix extract, Humuli Lupuli Flos extract, caudatin and 8-prenylnaringenin inhibited RANKL-induced osteoclastogenesis in osteoclastogenic RAW 264.7. CWHL is more effective for all markers than Cynanchi Wilfordii Radix extract or Humuli Lupuli Flos extract alone. Conclusions : CWHL may a potential therapeutic agent for menopause and osteoporosis as a natural food resource. CWHL as a natural food source has therapeutic potential in cases of menopause and osteoporosis.

천마꽃 추출물의 항산화, 항염, 보습 활성에 대한 연구

이홍구,김길남,박동준,이소영,진무현,Lee, Hong Gu,Kim, Gil Nam,Park, Dong Jun,Lee, So Young,Jin, Mu Hyun 대한화장품학회 2021 대한화장품학회지 Vol.47 No.3

천마(Gastrodia elata, G. elata)는 자연상태에서 수분율이 매우 떨어지고 인공재배에서도 자마의 퇴화로 꽃을 피는 개체가 드물어 연구가 거의 이루어지지 못하고 있다. 따라서 본 연구는 천마꽃을 인공개화시켜, DPPH radical 소거 활성 평가를 통한 항산화 효능, nitric oxide (NO) 생성 억제 효과를 통한 항염증 효과, hyaluronic acid 생성 촉진 효능을 통한 보습 효과를 평가하여 화장품 소재로서의 가능성을 확인하고자 하였다. 봄에 수확한 천마가 출현율과 개화율이 높게 나타났고 gastrodin은 0.36% 함유함을 확인하였다. 천마꽃 추출물의 DPPH radical 소거 활성에서 IC₅₀ 값은 0.045%로 나타났으며, 천마꽃 추출물이 천마뿌리 추출물에 비해 radical 소거능이 더 높음을 확인하였다. 천마꽃 추출물에 대한 NO 생성 억제 활성은 1%에서 83.2%로 유의적인 억제 효과를 나타내었다. Hyaluronic acid 생성 촉진 효능은 천마뿌리 추출물에서는 확인되지 않았으나, 꽃 추출물에서는 농도의존적으로 생성율이 증가하였으며, 0.02% 처리시 46.9%로 가장 높게 나타났다. 이상의 연구 결과를 바탕으로 천마꽃 추출물이 항산화, 항염, 피부 보습 화장품 소재로써 활용 가능성이 높을 것으로 판단된다. Gastrodia elata has a very low pollination rate in natural state, and even in artificial cultivation, there are very few individuals that bloom due to the degeneration, so little studies have been conducted. This study confirmed that the potential as a cosmetic ingredient by evaluating the antioxidant activity through the evaluation of DPPH radical scavenging activity, anti-inflammatory activity through the inhibitory effect on nitric oxide production, and the moisturizing activity through the effect on promoting hyaluronic acid production by artificially flowering G. elata flower. It was also confirmed that the appearance rate and flowering rate of G. elata harvested in spring were high, and the content of gastrodin was 0.36%. The IC50 value of G. elata flower extract was 0.045% and it was confirmed that G. elata flower extract had higher radical scavenging activity than G. elata root extract. The NO production inhibitory activity against the flower extract showed a significant inhibitory effect from 1% to 83.2%. Hyaluronic acid production promotion efficacy was not confirmed in the G. elata root extract, but the production rate increased with concentration dependence in the flower extract, and it was the highest at 46.9% when 0.02% treatment was performed. Based on the above research results, it is judged that G. elata flower extract has high potential for use as an antioxidant, anti-inflammatory, and skin moisturizing cosmetic ingredient.

골담초꽃 추출물의 연골 보호 및 염증 억제 효과에 관한 연구

박동준,이홍구,고충호,박형국,진무현,조호성,Park, Dongjun,Lee, Hong Gu,Ko, Chung Ho,Park, Hyoungkook,Jin, Mu Hyun,Cho, Ho Song 대한본초학회 2022 大韓本草學會誌 Vol.37 No.6

Objectives : This research aimed to investigate chondro-protective and anti-inflammatory effects of Caraganae Sinicae Flos 50% ethanol extract and its compound, tilianin. Methods : Caraganae Sinicae Flos was extracted with 50% ethanol. Tilianin in Caraganae Sinicae Flos 50% ethanol extract was quantified by HPLC analysis method. To investigate chondro-protective effects of Caraganae Sinicae Flos 50% ethanol extract, ATDC5 chondrogenic cells were co-treated with Caraganae Sinicae Flos 50% ethanol extract (or tilianin) and tumor necrosis factor-𝛼 (TNF𝛼) for 24 hours. After treatement for 24 hours, media supernatant was used for quantifying protein level of matrix metalloproteinase-3 (MMP3) by ELISA and harvested cells were used for analyzing mRNA expression level of matrix metalloproteinase-13 (MMP13) by reverse transcription PCR. To identify anti-inflammatory effects of Caraganae Sinicae Flos 50% ethanol extract, RAW 264.7 macrophage cells were co-treated with Caraganae Sinicae Flos 50% ethanol extract (or tilianin) and lipopolysaccharide (LPS) for 24 hours. media was used for quantifying the level of prostaglandin E2 (PGE2), interleukin-6 (IL6) by ELISA and nitric oxide by Griess reagent asssay. Results : Caraganae Sinicae Flos 50% ethanol extract and tilianin attenuated protein level of MMP3 and mRNA expression level of MMP13 in TNF𝛼-activated ATDC5 cells. Caraganae Sinicae Flos 50% ethanol extract inhibited the level of PGE2, IL6 and NO in LPS-activated RAW 264.7 cells in dose dependent manner, though tilianin inhibited PGE2 only. Conclusions : These results presented that Caraganae Sinicae Flos 50% ethanol extract could be used as natural medicines for osteoarthritis.