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      • KCI등재

        Transferrine peptide ligand로 개량된 아데노바이러스를 이용한 신경전구세포로의 유전자 전달 효율 조사

        정인실,Joung, In-Sil 한국미생물학회 2006 미생물학회지 Vol.42 No.1

        신정전구세포를 이용한 퇴행성 뇌질환의 세포치료나 유전자치료에서 효율적인 유전자 전달을 목적으로 개량된 아데노바이러스 벡터의 실용 가능성을 쥐의 해마에서 유래된 신정전구세포를 이용하여 조사하였다. 외피단백질을 조작한 개략 아데노바이러스벡터는 분화전과 후의 신정전구세포로 1세대 아데노바이러스 벡터에 비해 6배 정도 유전자를 효율적으로 전달하였다. 또한 바이러스의 감염은 신정전구세포가 신경세포나 신정 아교세포로 분화하는데 영향을 미치는 않았다. 따라서 신정전구세포를 이용한 신정질환의 세포치료나 유전자 치료에서 개량된 아데노바이러스로 유전자를 전달하면 치료의 효율성을 향상시킬 수 있을 것이다. Neuronal precursor cells may provide for cell replacement or gene delivery vehicles in neurodegenerative disease therapy. One impediment to treating neuronal diseases is finding ways to introduce genes into neurons effectively. It is shown here that fiber-modified adenovirus vector delivered gene to neuronal precursor as well as differentiated neuronal cells more efficiently than first-generation adenoviral vector. Moreover, fiber-modified adenoviral vector transduced precursor cells retained the potential for differentiation into neurons and glia in vitro. These results show the potential of modified adenoviral vector in the improved gene delivery to neurons in direct gene therapy protocols. In addition it holds promise for the use of genetically manipulated stem cells for the therapy of neuronal diseases.

      • KCI등재

        ErbB 수용체를 이용한 난소암세포 표적 유전자치료 벡터의 개발

        정인실,방성호,Joung, In-Sil,Bang, Seong-Ho 한국미생물학회 2011 미생물학회지 Vol.47 No.1

        암의 유전자치료에서 암세포로의 선택적 유전자전달 매체의 부족은 치료효과의 감소를 야기하는 문제이다. 본 연구에서는 난소암 유전자치료의 효율을 높이기 위한 목적으로 난소암세포로 선택적인 유전자전달을 하도록 개량된 아데노바이러스 벡터를 제조하고, 그 효율성을 난소암세포주를 이용하여 조사하였다. 난소암세포에 과다발현하는 분자인 ErbB receptor를 표적하도록 아데노바이러스 외피단백질 fiber에 ErbB receptor에 대한 ligand인 heregulin으로부터 유래한 펩티드를 부착하였다. 53개의 아미노산으로 구성된 외부 펩티드를 fiber에 부착하였을 때 바이러스 감염에 중요한 기능을 하는 fiber 삼량체 구조 형성에 영향을 미치지 않았다. Fiber를 조작한 개량 아데노바이러스는 야생형 fiber를 가진 1세대 아데노바이러스 벡터에 비해 선택적으로 난소암으로 유전자를 전달하는 비율이 증가하였다. 특히 항암제에 저항성을 가진 난소암세포주 OVCAR3에서 유전자전달 효율이 약 5배 증가되었다. 따라서 난소암의 유전자치료에서 개량된 아데노바이러스로 치료 유전자를 전달하면 치료의 효율성을 향상시킬 수 있을 것이다. Inefficiency of in vivo gene transfer using currently available vectors reflects a major hurdle in cancer gene therapy. Both viral and non-viral approaches have been described to improve gene transfer efficiency but suffer from a number of limitations. Here we tested an adenovirus carrying the small peptide ligand derived from heregulin${\beta}$ EGF-like domain onto fiber, the adenoviral capsid protein, to deliver transgene to ovarian cancer cells which overexpress ErbB, the cognate receptors for heregulin. The attachement of 53 amino acids to fiber didn't affect on the fiber's trimer structure that is critical for the viral entry to cells. The fiber-modified adenovirus can mediate entry and expression of a ${\beta}$-galactosidase into cancer cells in an increased efficiency compared the unmodified adenovirus. Particularly, the gene transfer efficiency was improved up to 5 times in OVCAR3 cells, an ovarian cancer cell line. Such transduction systems hold promise for delivering genes to ErbB receptor overexpressing cancer cells, and could be used for future cancer gene therapy.

      • KCI등재

        Ceramide에 의한 신경세포 사멸과정에서 p62의 역할

        정인실(Joung, In-Sil) 한국산학기술학회 2009 한국산학기술학회논문지 Vol.10 No.3

        p62는 산화스트레스가 주요 원인 중 하나인 퇴행성 뇌질환과 연관된 엉긴 물질(aggregate)의 주요 구성성분이다. 퇴행성 뇌질환과 관련된 것으로 알려진 hydroxydopamine이나 C₂-ceramide를 신경모세포종 세포주인 SH-SY5Y에 처리하였을 때 p62의 발현이 유도되며 시간이 지날수록 그 양이 증가되었다. 또한 p62를 과발현시키면 ceramide에 의한 SH-SY5Y 세포의 사멸이 지연되었다. 이 과정에서 p62는 시간이 경과됨에 따라 침전화되며 절단되었다. 이 결과로 p62의 신경보호효과와 여러 종류의 퇴행성 뇌질환에서 p62가 엉긴 물질에서 발견되는 이유를 추측할 수 있다. p62 is a key component of protein aggregates found in brains of neurodegenerative diseases in which oxidative stress is involved in the pathogenesis. p62 was induced in SH-SY5Y, a neuroblastoma cell line, by hydroxydopamine or C₂-ceramide known to be related to neurodegenerative diseases. The over-expression of p62 showed the neuroprotective effect against the ceramide induced cell death. In addition, p62 became insoluble and cleaved forms as time proceeded after the ceramide treatment, suggesting the mechanism by which p62 is associated with aggregates in neurodegenerative diseases.

      • KCI등재

        한국산 다슬기(Semisulcospira spp.)의 흡충류 유미유충 감염실태 및 농약의 잔류성에 관한 조사연구

        임승균,정인실,정평림,이근태,Im, Seung-Kyun,Joung, In-Sil,Chung, Pyung-Rim,Lee, Keun-Tae 한국패류학회 1986 The Korean Journal of Malacology Vol.2 No.1

        One of the most medically important snail species of Korea is Semisulcospira spp., a member of the freshwater prosobranch family pleuroceridae. The parasites that these snails transmit to humans are mainly Paragonimus westermani and Metagonimus yokogawoi. On the other hand, Semisulcospira snails are edible as a foodstuff in Korea. The present study was first aimed to detect out residual pesticides in the snails collected at the endemic and non-endemic areas of paragonimiasis in Korea and to make relationship to the detectability of larval trematodes shed from the snails. In addition, water specimens from the habitats where the snails were collected were sampled and analysed to elucidate environmental conditions of the habitats. This malaco-ecological survey was done at 7 endemic and 3 non-endemic areas of paragonimiasis for about more than 2 years, May, 1984 through October, 1986. All the water smaples both from the endemic and non-endemic areas of paragonimiasis showed normal ranges of the criteria of upper freshwater streams, with lower B.O.D. (0.4~2.0 ppm) and higher D.O. values (9.5~11.0 ppm) than those in the large river systems Infection rate of digenetic trematodes in total snails collected was 6.7%, but no Paragonimus cercaria was detected out at all even in the endemic areas of paragonimiasis. The ecological factors affecting Paragonimus larvae in the snails were also discussed. A total of 9 chlorinated hydrocarbon pesticieds was targeted to detect out from the tissues of snails. Out of 9 pesticides, aldrin, beta-BHC, p, p-DDT, dieldrin, DDE, lindane, heptachlor and heptachlor epoxide were eluted from the snails. The highest levels of the pesticides were mostly detected out in the snails collected from the Donghae-Chun area of Haman and the Kangwha area of Kyongki-Do, where the lowest infection rates of trematode cercariae (0~0.5%) were revealed. The possibilities that the residual pesticides in the freshwater animals including Semisulcospira snails might be transferable to humans were also discussed.

      • SCIESCOPUSKCI등재
      • 미토콘드리아 ND1 유전자 염기서열 비교를 통한 국내 서식 황소개구리의 유전적 다양성 조사

        이지영(Lee Ji-Young),심재한(Shim Jae-Man),정인실(Joung Insil) 한국산학기술학회 2005 한국산학기술학회 학술대회 Vol.- No.-

        1970년대 식용을 위한 양식을 목적으로 일본에서 수입된 황소개구리가 국내 하천과 호서생태계에 큰 피해를 주었으나, 최근 급속히 그 개체수가 줄어든 것으로 추정되므로 이번 연구에서는 국내에 서식하는 북미산 황소개구리의 유전자 분석을 통하여 개체동태군에 대한 유전적 연관을 조사하였다. 이를 위하여 전라남도 지역에서 서식하는 황소개구리를 채집하여 이미 발표된 북미산 황소개구리와 미토콘드리아 ND1/tRNA 유전자 1215 bp의 염기서열을 비교, 분석하였다. 북미산과 비교 하였을 때 조사한 국내 서식 개체 모두에서 ND1/tRNA 유전자 1개 위치에서 염기변화가 발견되었으나 이는 도입 개체군의 유전자인지 국내 특이변이가 진행된 것인지 확실하지 않다. 또한 조사한 개체 일부에서 유전자 염기서열의 6위치에서의 변이가 발견되었으나 국내 서식 황소개구리는 미국산 황소개구리와의 유전적 차이가 거의 없으며, Kimura-2-parameter 분석결과 국내 서식 황소개구리 개체 내에서 98.7%~100%의 높은 유사성을 보여 종내 유전적 차이가 거의 없는 것으로 보인다. Neighbor-Joining과 Maximum Parsimony 분석 결과, cluster를 이루는 개체군의 차이를 보였으므로 개체들이 분화되어 나온 시점과 위치가 다른 것으로 확인 되었지만 장흥, 영암, 고흥의 개체가 국내 도입시기의 체체군에 속하며 광주, 남평 지역의 개체군이 고흥의 한 개체로 부터 분화되어 나왔음을 추정할 수 있다. 이러한 결과로부터 국내에 서식하는 황소개구리가 도입 후 지역 특이적 분화가 일어났다고 결정하기는 무리가 있으며, 이와 같이 유전적 유사도가 높은 개체들 간의 교배에 따른 유전적 다양성의 감소가 최근에 관찰되는 국내산 황소개구리의 급격한 감소원인들 중의 하나일 가능성을 시사한다.

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