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        Effect of maternal gene expression on porcine oocytes in vitro maturation

        이재달(Lee, Jae-Dal) 한국산학기술학회 2012 한국산학기술학회논문지 Vol.13 No.8

        난자 세포의 정상적인 성숙과정을 이해하려면 모계유래 유전자 발현 증가의 분자 생물학적 기전을 밝혀내 야 한다. 이것은 모계 유전자의 염기서열의 변화와 밀접한 관계가 있다. 전 연구결과에 의하면 돼지 난자 체외 성숙 과정에서의 모계 유전자 mRNA 발현은 통상적으로 poly(A) 꼬리 길이와 아데닐산 중합반응에 의하여 검증된다. 하 지만 포유동물 체외성숙 과정에서는 아직까지 밝혀진 것이 없다. 따라서 본 연구목적은 성숙단계 난모세포에서의 분 자생물학적 기전을 해명하고자, 4개의 중요한 모계유전자발현을 real-time PCR기법으로 확인하여 poly(A) 꼬리 길이 와 아데닐산중합반응의 변화를 확인하였다. 본 연구에서 접합체 유전자 활성화 단계에서 모계 유전자의 비정상적인 발현과 이것에 상응하는 단백질 수준의 억제는 일부 혹은 대부분 유전자 손실에 의하여 초래된 것임을 알 수 있었 다. 따라서 이상적인 모계 유전자 발현은 난자 세포의 성숙 및 더 나가서 초기 배아 발달에 중요한 역할을 하는 것 임을 확인 하였다. Understanding of the maternal transcriptome increased to elucidate the underlying molecular mechanism of normal oocyte maturation, which depends on a precise sequence of changes in maternal genes expression. Previous reports that the translational potential of a maternal mRNA is generally determined by the length of the poly(A) tail, and deadenylation is usually the first sign of mRNA degradation. However, in vitro cultured system has the underlying molecular mechanisms remain unclear. We determined whether the role of molecular basis, four important maternal genes, C-mos, cyclin-B1 (regulatory subunit of MPF), BMP15 and GDF9, were selected for detection of their precise mRNA expression patterns by real-time PCR and for determination of their polyadenylation status by poly(A) tail PCR during oocyte maturation. In the present study. the abnormal expression of maternal mRNAs prior to zygotic genome activation, which results in suppression of the corresponding protein level, may be responsible for, at least in part, a profound defect in further embryonic development. Reasonable expression of maternal gene is crucial for proper oocyte maturation and further embryonic development.

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        MAPK Activity in Porcine Oocytes Maturing InVitro

        이재달(Lee, Jae-Dal) 한국산학기술학회 2010 한국산학기술학회논문지 Vol.11 No.6

        본 연구에서는 MAPK 저해제인 U0126이 난자성숙과정에서 특히 감수분열, 미세소관 형성 그리고 액틴 필 라먼트 형성에 미치는 영향을 조사하였다. 그 결과 MAPK 단백질은 12시간째에 인산화되기 시작하여, 24시간째에 대부분 인산화 되었고 metaphase II에 이르기 까지 유지되었다. 배포단계(GV)에 있는 난자를 U0126의 20μM 농도로 처리하였을 때 MAPK의 인산화가 완전히 억제되었으나 배포의 파열 단계(GVBD)로의 성숙에는 진행하였으나, metaphase I까지는 발달하지 못하였다. 또한 MAPK 저해제로 인해 비정상적인 방추사의 형성을 초래하였다. 난자를 배포의 파열단계(GVBD) 이후에 U0126을 처리하였을 때 극체의 방출은 정상 이였으나 중기 판의 배열과 염색체의 분열은 비정상적 이였다. 결론적으로, 유사분열 활성화 효소단백질인 MAPK의 활성은 돼지 난자의 체외성숙과정에서 배포단계(GV)의 염색체의 배열과 감수분열의 완성에 중요한 조절 인자임을 이번 연구를 통해 알 수 있었다. In this study, we determined effects of the mitogen-activated protein kinase (MAPK) inhibitor, U0126 on meiotic maturation, microtubule organization and actin filament assembly in the porcine oocyte. The phosphorylated MAPK was first detected at 12 h after the initiation of maturation cultures, fully activated at 24h, and remained until metaphase II. Treatment of germinal vesicle (GV) stage oocytes with 20μM U0126 completely blocked MAPK phosphorylation, but germinal vesicle breakdown (GVBD) was normally proceeded. However, the oocytes didn't progress to the metaphase I. The inhibition of MAPK resulted in abnormal spindles. In oocytes treated with U0126 after GVBD, polar body extrusion was normal, but the organization of the metaphase plate and chromosome segregation were abnormal. In conclusion, MAPK activity plays an important regulatory role in GV chromatin configuration and meiotic progress in porcine oocyte maturation.

      • KCI등재

        Identification of Developmental Related Genes in the Lab Animal

        이재달(Lee, Jae-Dal) 한국산학기술학회 2009 한국산학기술학회논문지 Vol.10 No.6

        본 연구에서는 쥐의 미성숙 난자의 체외 성숙과정에서 매우 특이적으로 발현되는 후보 단백질 변화를 동정하려는 목적으로 체외 성숙 과정에서 GV 단계의 미성숙 난자와 MIl 단계의 난자를 실험 시료로 사용하였다. 그리고 단백질 Chip은 선행 실험에서 가장 효과적인 CM10을 사용하여 SELDI -TOF MS 분석 장치를 이용하여 후보단백질을 동정하였다. MIl 단계의 미성숙 난자와 비교하여 GV 단계의 미성숙 난자에서 16개의 후보단백질이 높게 발현되었으며, 이때 발현된 후보 단백질 각각의 분자량은 8180(후보단백질 2개), 10226 (5개), 15767(5개), 16770(4개) 달톤(dalton)이였다. 또한 29개의 후보단백질은 MIl 단계의 미성숙 난자에서 높게 발현되었고 이들의 분자량은 각각 10832(3개)17743(8개)20122(3개)22131(3개) 24857(7개) 33507(5개) 달톤 이였다. 한편 전체 후보 단백질 45개의 분석을 Real time RT-PCR에서 수행하여 13개의 잠재적인 후보단백질을 확인 동정하였다. The present study was conducted to gain insights into oocyte maturation and early embryo development, SELDI-TOF-MS was used to find the protein candidates that are specifically or prominently expressed in mouse oocytes at the in vitro matured metaphase II (MIl) and germinal vesicle (GV) stages. By using selected CM10 chip, found 16 candidates which were up-regulated in GV stage oocytes compared with in MIl stage oocytes, molecular weight are 8180 (2 candidates), 10226 (5 candidates), 15767 (5 candidates) and 16770 (4 candidates) Da respectively. And 29 candidates were higher in MIl than in GV stage oocytes, molecular weight are 10832 (3 candidates), 17744(8 candidates), 20122 (3 candidates), 22131 (3 candidates), 24857 (7 candidates) and 33507 (5 candidates) Da, respectively. All (45) candidate (0.2 and 1.0 % error tolerances) were performed real time RT-PCR analysis and further selected 13 more potential candidates.

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        지역축제 방문객 충성도의 계량적 종단연구: 개천예술제 방문객을 대상으로

        이재달 ( Jae Dal Lee ),류정섭 ( Jung Sub Yu ) 국제지역학회 2014 국제지역연구 Vol.18 No.4

        지역축제는 지역 문화예술과 전통, 지역민의 자긍심을 알리는 기회일 뿐만 아니라 지역경제와 이미지를 제고시킬 수 있는 효과적인 수단이다. 축제 충성도가 축제 성과에 중요한 선행요인으로 평가되면서, 축제 주최자는 방문객 충성도 제고를 위해 다양한 축제 스케이프와 마케팅 활동을 제공하게 된다. 지금까지 지역축제 충성도 연구는 특정 축제개최 시점을 기준으로 한 횡단분석에 의존함으로써 방문객의 축제 충성도에 객관화하는데 한계가 있었다. 그러나 본 연 구는 2012년과 2013년에 개최된 개천예술제를 연구대상으로 하여 지역축제의 방문객 만족과 이를 선행하는 세 개의 요인, 방문객 만족과 충성도와의 관계에 대해 종단적 연구를 구조방정 식모형을 통하여 진행함으로써 지역축제 충성도 제고를 위한 각종 변인의 변화추세를 입체적으로 파악하고자 하였다. 연구결과, 첫째, 방문객의 참가동기와 전반적 만족 간에는 인과관계 가 있는 것으로 나타났으며, 경험동기와 유희동기를 강화할 수 있는 축제 프로그램과 안내를 강화해야 한다. 둘째, 방문객의 전반적 만족이 충성도에 직접적인 영향을 미치는 것으로 나타났으므로 방문객 만족 강화를 위한 축제프로그램 강화방안을 마련해야 한다. 셋째, 개천예술 제 축제에서 판매되는 기념품 혹은 각종 음식물과 지역문화에 대한 안내는 방문객의 전반적 만족에 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다. 넷째, 개천예술제 방문객 편의시설과 전반적 만 족 간의 관계에 있어서는 2012년과 2013년에 서로 다른 결과로 나타났다. 그러나 본 연구의 결과를 일반화하여 지역 축제에 적용하기에는 연구대상 축제의 확대 필요성 및 동일 축제에 대한 다년간 누적된 조사 자료의 축적 필요성 측면에서 여전히 한계가 있을 수밖에 없다. Local festivals are effective tools not only to make a promotion local culture, fine arts, traditions and pride, but also to enhance the local economy and image. With the festival evaluation that loyalty is an important predisposing factor, the festival organizers is to provide visitors with various kinds of contents and marketing activities to enhance the loyalty of local festival. Recent researches on local festivals loyalty mainly have depended on cross-sectional analysis of visitors to the festival held at the specific period, so it’s hard to generalize the loyalty of local festival. However, the study is to adopt a longitudinal study of local festivals using structural equation modeling to overcome these limitations, and to three-dimensionally make out loyalty trends of other variables to evaluate local festivals. Results can be summarized as follows: 1st, visitors’ motivations had an influence on overall satisfaction, and so it is necessary to enhance festival programs and guidance. 2nd, overall satisfaction of visitors directly influenced on festival loyalty, so to strengthen that of visitors through the festival program. 3rd, festival souvenirs, food served and local culture did not affect overall satisfaction, in respective.

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        승산리 재벌생가 마을의 지역역량 요인과 지속가능역량 간 구조관계 분석

        이재달 ( Jae Dal Lee ) 한국유통물류정책학회 2021 유통물류연구 Vol.8 No.4

        최근 지역쇠퇴와 지역소멸에 대한 우려로 인해 지역의 지속가능성 문제가 논의의 중심이 되고 있다. 이는 삼성, LG, 효성 등 대한민국 재벌기업 창업주를 배출한 부자마을 승산리도 예외일 수 없다. 이러한 지역위기는 지속발전을 위한 지역역량 탐색과 역량연구의 필요성을 요구하고 있다. 본 연구는 선행연구를 토대로 승산리의 지역사회역량 기반의 지역여건과 역량분석에 이용할 5개의 변인(자원역량, 경제역량, 공동체역량과 내생변수인 거버넌스역량, 지속가능역량)을 도출하여 변수 간 구조관계를 구조방정식 모델을 구축하여 실증분석하였다. 설문지는 총 200부를 배포하여 163부를 회수하였으며, 회수된 설문지 중에서도 설문취지에 부적절한 응답을 한 18부를 제외한 145부의 유효한 설문지를 최종분석에 사용하였다. 표본의 일반적 특성을 파악하기 위해 PASW Statistics 18.0을 이용한 기술적 통계분석을 수행하였다. 그리고 추출된 구성개념 간의 구조관계를 설명하는 구조방정식모형 분석은 AMOS 18.0을 이용하였다. 분석결과, 승산리 재벌생가 마을의 지속가능역량에 가장 큰 영향을 미치는 외생변수는 공동체역량이고, 그 다음으로 경제역량으로 나타났다. 또한 내생변수인 거버넌스역량은 지속가능역량에 유의한 영향을 미치는 것으로 분석되었다. 끝으로, 본 연구의 이론적ㆍ실무적 논의와 연구의 한계 및 향후 연구방향이 제시되었다. Recently, due to the concerns on regional decline and local extinction, the issue of regional sustainability has become the center of discussion. Seungsan-Ri, a rich village that produced founders of Korean Chaebols such as Samsung, LG, and Hyosung, can not be exception. These regional crises call for the need to explore regional capabilities and research capabilities for sustainable development. This study deducts five variables to be used for regional conditions and capability analysis based on community capability in Seungsan-Ri, and the structure between variables. The relationship was empirically analyzed by constructing a structural equation modeling. Of the collected 163 questionnaires, 145 valid questionnaires were used for the final analysis. To grasp the general characteristics of the sample, descriptive statistical analysis was performed using PASW Statistics 18.0. And AMOS 18.0 was used to analyze the structural equation modeling explaining the structural relationship between the extracted constructive variables. As a result of the analysis, the exogenous variables that have the greatest influence on the sustainable capability of the village of Seungsan-Ri were found out to be ‘community capability’, followed by ‘economic capability’. In addition, ‘governance capability’ has a significant effect on ‘sustainable capacity’.

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        Characterization of Embryo-specific Autophagy during Preimplantation

        이재달(Lee, Jae-Dal) 한국산학기술학회 2011 한국산학기술학회논문지 Vol.12 No.8

        자식작용은 난자 세포질의 단백질 고분자 물질과 세포 소기관 분해를 위해서 세포질 리소좀 통로에 유전적 으로 작용하고 있으며 ATP합성과 단백질 재활용에 관여하고 있다. 이러한 자식작용은 난자 발달 과정에서 매우 중 요하지만 세포질 내 자식작용의 동적 발달 과정의 근원적인 기전은 잘 알려지지 않고 있다. 따라서 본 연구에서는 초기 난자 발달 과정의 자식작용을 이해하기 위해서 쥐 난자 체외 성숙 과정에서 자식작용과 관련된 유전자들의 유 전적 발현 수준을 분석하였다. Real Time RT-PCR 기법을 이용하여 유전자 Atg2a, Atg3, Atg4b, Atg5, Atg6, Atg7, Atg9a, 그리고 Wipi3 같은 모계에서 유전된 ATGs 군들의 유전자들은 수정난 유전체 활성화(ZGA) 이전 단계인 1세 포기 에서 높게 발현되었고, 그 후 이들 유전자들의 발현은 배반포 단계와 2세포기 4세포기 단계에서는 감소함을 알 수 있었다. Dram과 Atg9b 유전자들은 배반포와 1세포기 단계에서 발현됨으로서 모계 유전자이면서 ZGA에 의해서 발현되는 유전자임을 알 수 있었다. 한편 UIKI의 유전자 발현은 착상 전 단계에서 일정하게 나타남을 알 수 있었다. 하지만 Atg4d 유전자의 경우 4세포기에서부터 배 반포 단계까지 높게 나타남을 알 수 있었다. 이러한 결과로부터 생 쥐 난자 발달 과정에서 자식작용과 관련된 유전자들은 초기 난자 발달과정에서 중요한 역할 과정임을 알 수 있었다. Autophagy is an evolutionarily conserved lysosomal pathway for degrading cytoplasmic proteins, macromolecules, and organelles in addition to recycling protein and ATP synthesis. Although autophagy is very important during embryogenesis, the mechanism underlying the dynamic development during this process remains largely unknown. In order to obtain insights into autophagy in early embryo development, we analyzed gene expression levels of autophagy-related genes (ATGs) in mouse embryos developing in vitro. Using real time RT-PCR technique, ATGs including Atg2a, Atg3, Atg4b, Atg5, Atg6, Atg7, Atg9a, and Wipi3, as maternal transcripts, were only up-regulated in 1-cell embryo stage before zygotic genomic activation (ZGA), and then expression decreased from 2-cell to blastocyst embryo stage. ATGs including Dram and Atg9b were expressed abundantly in 1-cell embryo state and in blastocyst embryo stage, athough Atg8 and Ulk1 were constantly expressed during preimplantation stage. However, Atg4d were only up-expressed from 4-cell to blastocyst stage. These results suggest that autophagy is related in mouse embryo, which possibly gives an important role for early development.

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        A Study on Sustainable Cruise Tourism and Its Impacts

        Lee Jae-dal(이재달),Ryu Jung-sub(유정섭) 한국항만경제학회 2010 韓國港灣經濟學會誌 Vol.26 No.4

        관광은 세계적으로 급속도로 성장하는 가장 큰 산업 중의 하나이며, 수많은 개도국과 선진국들에서도 중추 산업으로 자리 잡고 있으며, 많은 국가에 있어서 자국의 소득수입, 일자리창출, 국가재정 수입의 중요한 원천으로 역할을 하고 있다. 그러나 이처럼 관광산업의 급격한 확대로 인하여, 여러 관광지역에서 환경파괴적인 측면과 사회문화적인 측면의 영향을 야기해 왔다. 관광과 마찬가지로, 크루즈관광의 급속한 성장 또한 크루즈선 기항지지역의 환경적ㆍ문화적 자원에 큰 영향을 주었다. 본 연구를 통해서 연구자는 지속가능한 관광인프라를 구축하는데 있어서 크루즈관광으로 인해 발생되는 국내외적인 환경적인 영향을 최소화시킬 수 있는 방안을 고찰하는데 논의의 초점을 두고자 하였다. Tourism is one of the largest and fastest growing industries in the world, and is a major industry in many developed and developing countries. It is an increasingly important source of income, employment and wealth in many countries. However, its rapid expansion has also had detrimental environmental and socio-cultural impacts over many regions. Like tourism, the rapid growth in cruise tourism has also put greater pressures on environmental and cultural resources in cruise-ship ports of call. Through this paper, we would like to argue that more emphasis should be given to minimize national and international environmental impacts originated from cruise tourism with preparing infrastructures for sustainable tourism.

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