성산리 유류저장소 설치에 따른 강전계의 화재 안전성에 관한 검토

신경우 嶺南大學校 産業大學院 2002 국내석사

지역유형별 지역개발방향 모색에 관한 연구

신경우 경원대학교 2004 국내석사

신경회로망을 이용한 필기체 숫자인식에 관한 연구

신경우 고려대학교 1991 국내석사

韓半島의 軍備統制를 위한 信賴構築方案

신경우 國防大學院 1991 국내석사

SFE와 HPLC를 이용한 계육 중 fluoroquinolone계 항생제의 잔류분석

신경우 全南大學校 2004 국내박사

본 연구에서는 초임계유체 크로마토그래피(supercritical fluid chromatography, SFE)를 이용하여 계육 중 fluoroquinolone계 항생물질을 추출하는 새로운 방법을 정립하고 현재 가축사육과 어류양식업에 많이 사용되고 있는enrofloxacin, ciprofloxacin, norfloxacin 그리고 ofloxacin 네 가지fluoroquinolone계 항생제를 육계에 투여하여 사육하면서 이들 항생제의 잔류양상을 조사하였으며 아울러 목탄을 항생제와 함께 투여하였을 때 계육 중 항생제의 잔류에 미치는 영향을 조사하였다. SFE를 이용한 계육 중 네 가지 fluoroquinolone계 항생제의 최적추출조건을 조사한 결과 계육 중 fluoroquinolone계 항생제의 최적추출온도와 압력은 네 가지 항생제 모두 80℃와 300 kg/㎠이었고, enorfloxacin, ciprofloxacin과ofloxacin의 최적추출시간은 모두 30분이였고 , norfloxacin의 최적추출시간은 50분으로 확립되었으며, 메탄올의 최적비율은 enrofloxacin과 norfloxacin의 경우 20%이었고, ciprofloxacin과 ofloxacin의 경우는 30%로 확립되었다. 이산화탄소와 메탄올의 총 유속은 3 ml/min, 시료양은 2.0 g을 취하여 추출을 실시하였다. 네 가지 fluoroquinolone계 항생제의 정량분석은 HPLC 형광검출기를 이용하여 실시하였는데 평균 회수율은 enrofloxacin은 93.9~104.3%, ciprofloxacin은 41.9~65.3%, norfloxacin은 60.8~87.3%, ofloxacin은 78.9~87.1 %였다. 최소검출한계(LOD)와 최소정량한계(LOQ)는 enrofloxacin, ciprofloxacin, norfloxacin은 공히 0.02 ng와 5 ㎍/kg 이었고, ofloxacin은 0.04 ng와 10 ㎍/kg이었다. 네 가지 항생제를 음수와 사료에 각각 일정량(enrofloxacin과 ciprofloxacin은10 mg/kg body weight/day, norfloxacin과 ofloxacin은 20 mg/kg body weight/day)으로 혼합하여 5일간 연속 투여한 다음 일정시간 간격으로 육계 가슴근육 중 잔류양상을 조사하여 비교분석하였다. Enrofloxacin의 경우 음수에 혼합하여 급여하였을 때 5일까지 잔류하였고, 최대잔류량은 평균 918.3㎍/kg이였으며, 사료에 첨가하여 투여하였을 경우 9일까지 잔류하였고, 최대잔류량은 평균 1,544 ㎍/kg이었다. Ciprofloxacin은 음수에 혼합하여 투여하였을 경우 24시간까지 잔류하였고 최대잔류량은 평균 80 ㎍/kg, 사료에 첨가하여 투여하였을 경우48시간 내에 전부 소실되었으며 최대잔류량은 평균 115 ㎍/kg이었고, norfloxacin은 음수에 첨가하여 투여하였을 경우 4일까지 잔류하였고 최대잔류량은 평균 32.2 ㎍/kg이였고, 사료에 첨가하여 급여하였을 경우에는 48시간 내에 전부 소실되었으며 최대잔류량은 평균 52.4 ㎍/kg이였다. Ofloxacin의 경우 음수에 혼합하여 투여하였을 경우 4일까지 잔류하였으며 최대잔류량은 평균 340 ㎍/kg이였으나 사료에 첨가하여 투여하였을 경우 역시 48시간 내에 전부 소실되었으며 최대잔류량은 평균 863.7 ㎍/kg이였다. Enrofloxacin을 1% 또는 2% 활성탄과 혼합하여 육계에 투여한 다음 가슴근육 중 enrofloxacin의 잔류에 대한 영향을 조사한 결과 활성탄 1%와 2% 첨가구 사이에는 최대잔류량이나 잔류시간이 차이가 거의 없었으나 전체적으로 enrofloxacin을 사료와 혼합하여 급여한 경우보다 동일한 12시간 후 최대잔류량이 약 25% (1% 활성탄 첨가구)와 28% (2% 활성탄 첨가구)로 증가하였지만 근육 내 잔류시간은 4일 감소하였다. SFE와 HPLC를 이용한 네 가지 항생제의 동시 다 성분 분석결과 최소검출한계와 최소정량한계는 enrofloxacin은 0.04 ng와 10 ㎍/kg, ciprofloxacin과norfloxacin은 0.05 ng, 12.5 ㎍/kg, ofloxacin은 0.1 ng와 25 ㎍/kg으로 나났으며 평균 회수율은 enrofloxacin은 87.4~94.2%, ciprofloxacin은 57.6~73.5%, norfloxacin은 79.3~87%, ofloxaicn은 56.6~74.9%였다. 시중에서 유통 중인 육계를 구입하여 fluoroquinolone계 항생제의 잔류를 조사한 결과 enrofloxacin, ciprofloxacin과 norfloxacin이 각기 30.2, 8.8과 16.6㎍/kg로 나타났다. 육계에 enrofloxacin을 투여한 다음 4, 8, 12, 24, 48 그리고 72시간마다 계분 중 항생제의 배설량을 조사한 결과 각기 6,573, 3,356, 1,443, 1,258, 1,199와 202 ㎍/kg으로 나타났다. 본 연구에서 정립한 SFE와 HPLC를 이용한 육계 중 fluoroquinolone계 항생제의 분석방법은 계육을 포함한 식육, 계란 등 동물성 식품 중 fluoroquinolne계 항생제의 분석에 충분히 활용할 수 있을 것으로 판단되며 육계 중 네 가지fluoroquinolone계 항생제의 잔류양상에 대한 연구 결과는 flruoroquinolone계 항생제의 사용규제와 잔류허용한계를 설정하는데 기초 자료로 이용할 수 있을 것으로 기대된다. The fluoroquinolones (FQ's) are synthetic antimicrobial agents with a broad spectum of activity against Gram-positive and Gram-negative bacteria as well as mycoplasma which are widely used in human and veterinary medicine. The wide spread administration of FQ's in veterinary medicine represents a potential risk because there may be residues of the drugs in animal products (milk, eggs, meat). Antibiotic residues in food are a cause for concern because resistant human pathogens are emerging and because there may be toxic reaction in humans. Obviously, the availability of sensitive and accurate analytical methods are need to monitor animal products for the presence of residues of FQ's. In the present study, we developed a simple, rapid and reliable analytical procedure for detection and quantification of four FQ's(enrofloxacin, ciprofloxacin, norfloxacin and ofloxacin) in chicken breast muscle using a supercritical fluid extraction (SFE) and HPLC with specific fluorescence detection. The optimal SFE extraction condition for a single residue were studied for four FQ's in spiked chicken breast muscle. The optimal condition was 80℃ for oven temperature, 300 kg/㎠ for system pressure and 3 ml/min for total flow rate. And optimal extraction time was 30 min for enrofloxacin, ciprofloxacin and ofloxacin and 50 min for norfloxacin. Also, optimal modifier rate was 20% for enrofloxacin and norfloxacin and 30% for ofloxacin and ciprofloxacin. The recovery of four FQ's were 93.9~104.3%, 41.9~65.3%, 60.8~87.3% and 78.9~87.1% for enrofloxacin, ciprofloxacin, norfloxacin and ofloxacin, respectively. The limit of detection (LOD) and limit of quantification (LOQ) were 0.02 ng and 5 ㎍/kg for enrofloxacin, ciprofloxacin and norfloxacin, 0.04 ng and 10 ㎍/kg for ofloxacin, respectively. In addition, the residue levels of four FQ's were investigated in chicken breast muscle after orally administered doses of 10~20 mg/kg of body weight once daily with drinking water and feed for 5 days. Maximal residual concentration of FQ's were found to be 918.3, 80, 32.2 and 340㎍/kg for enrofloxacin, ciprofloxacin, norfloxacin and ofloxacin and residence time were found to be 120, 24, 96 and 96 hours for enrofloxacin, ciprofloxacin, norfloxacin and ofloxacin respectively after oral administration with drinking water. When the FQ's were given orally with feed, maximal residual concentrations were found to be 1544, 115, 52.4 and 863.7 ㎍/kg for enrofloxacin, ciprofloxacin, norfloxacin and ofloxacin, and then residence time were found to be 216, 48, 48 and 48 hours for enrofloxacin, ciprofloxacin, norfloxacin and ofloxacin respectively after oral administration with feed. Also we investigated the influence of dietary active carbon (1%, 2%) addition on the effect of enrofloxacin residue in chicken breast muscle. The maximal residual concentration of enrofloxacin were 993.7 ㎍/kg for a dose with 1% active carbon and 1015.8 ㎍ /kg for a dose with 2% active carbon and then residence time were 120 hours for both case. The maximal concentration of enrofloxacin of oral dose with active carbon were much higher than that of oral dose with drinking water and feed. A multiresidue analysis method was also developed for the enrofloxacin, ciprofloxacin, norfloxacin and ofloxacin from chicken breast muscle using a SFE and HPLC with fluorescence detection. Optimal SFE extraction condition for a multiresidue analysis was same as a single residue case except of 40 min of extraction time. The limit of detection (LOD) were 0.04 ng for enrofloxacin, 0.05 ng for ciprofloxacin, norfloxacin and 0.1 ng for ofloxacin and the limit of quantification (LOQ) were 10 ㎍/kg for enrofloxacin, 12.5 ㎍/kg for ciprofloxacin and norfloxacin, 25 ㎍/kg for ofloxacin. The range of recovery of four FQ's was 87.4~94.2% for enrofloxacin, 57.6~73.5% for ciprofloxacin, 79.3~87% for norfloxacin and 56.6~74.9% for ofloxacin respectively. To analyze the four FQ's residues in the chicken breast muscle collected from markets, 6 chickens were analysed for the presence of residue of enrofloxacin, ciprofloxacin, norfloxacin and ofloxaicn using SFE and HPLC with florescence detection. The residue of FQ's were detected in one chicken sample out of six samples at 30.2, 8.8 and 16.6 ㎍/kg of enrofloxacin, ciprofloxacin and norfloxacin respectively. To investigate the excretion of enrofloxaicn in chicken feces, oral administration dose with feed was examined. The excretion levels of enrofloxacin decreased from 6573 ㎍/kg to 202 ㎍/kg in chicken feces during 72 hours. This result indicate that the high levels of antibiotics such as FQ's can enter the terrestrial environment by indirectly through animal medication in chicken farm. As a conclusion, this work presented a new and selective SFE and HPLC method for the extraction and determination for FQ's in chicken breast muscle sample. In addition, these studies which indicate the residue profile of FQ's in chicken after oral administration, are of the utmost importance for the establishment of a governmental residue policy.

農村地域 國民學校 敎職文化 硏究

신경우 全南大學校 1995 국내석사