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발효 해삼 및 흑삼 추출물의 산성다당체 분석 및 생리학적 특성
손미례 ( Mi Yae Shon ),김영수 ( Yeong-su Kim ) 한국키틴키토산학회 2021 한국키틴키토산학회지 Vol.26 No.2
발효 전 백삼, 홍삼, 흑삼의 열수추출물에서 산성다당체 함량은 백삼 15.0%, 홍삼 15.2%, 흑삼 17.3%로 분석되었으며 발효 공정을 통해서 백삼 18.2%, 홍삼 19.2%, 흑삼 21.3%로 증가하는 것으로 분석되었다. 따라서 발효를 통해 흑삼에서 최고 21~25%의 산성다당체 증가 효과를 볼 수 있었다. 해삼의 산성다당체는 균 접종량과 발효시간에 따라 26.14~74.21%의 범위로 측정되었으며 백국균(white-koji mould) 1% 첨가군에서 60시간 발효하였을 때 가장 높은 산성다당체 함량을 나타내었다. 백국균(white-koji mould)을 이용한 발효 흑삼에서는 Rg<sub>1</sub>, Rb<sub>1</sub>, Rb<sub>3</sub> 및 Re의 함량은 대부분 소실되었으며, 흑삼에서 검출되는 특유 ginsenoside Rg<sub>3</sub>, Rg<sub>5</sub>, Rk<sub>1</sub> 함량이 증가되는 것을 볼 수 있었다. 대식세포를 이용한 활성산소종 측정에서 발효 해삼, 흑삼 및 해삼복합소재 모두 활성산소종이 증가하지 않는 것을 확인할 수 있었으며 발효 해삼복합소재의 면역활성으로 인한 사이토카인(TNF-α, IL-6, IL-1β) 분비능이 발효 해삼 및 흑삼보다 높다는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 산화질소 관련 단백질 Cox-2 및 iNOS의 발현도 발효 해삼, 흑삼 및 해삼복합소재 모두 확인하였으며, 발효 해삼, 흑삼 및 해삼복합소재에서 Cox-2 및 iNOS의 발현이 가장 높은 것을 확인하였다. 이로 인해 발효 해삼복합소재는 발효 해삼 및 흑삼보다 면역 활성이 높아 산화질소 분비능도 높다는 것을 확인할 수 있었다. 발효 해삼복합소재로 인한 ERK1/2와 p38의 인산화가 발효 해삼 및 흑삼보다 높은 것이 관찰되었고 핵 내 NF-κB 발현이 MAPKs 결과와 유사하게 증가되는 것이 관찰되었으며, NF-κB 발현도 발효 해삼복합소재가 발효 해삼 및 흑삼보다 높은 것이 관찰되었다. 따라서 발효 해삼, 흑삼 및 해삼복합소재는 MAPKs의 인산화 및 NF-κB의 발현으로 인해 면역 활성을 유도하며, 그 중 발효 해삼복합소재가 가장 높은 면역 활성을 유도하는 것을 확인할 수 있었다. 발효 해삼, 흑삼 및 해삼복합소재 모두 CD80, CD86, MHC class I과 II의 발현이 증가하는 것이 관찰되었으며, 이전 결과와 유사하게 발효 해삼복합소재가 발효 해삼 및 흑삼보다 높게 발현되는 것이 관찰되었다. 이러한 결과로 보아 발효 해삼복합소재가 발효 해삼 및 흑삼보다 세포 표면 활성 인자 발현이 높아서 면역 활성이 높은 것을 확인할 수 있었다. The Stichopus japonicus and Black ginseng was fermented by Aspergillus awamori var. kawachii (white-koji mould). The acidic polysaccharide and specific ginsenoside content increased after fermentation of S. japonicus and Black ginseng. The acidic polysaccharide contents of fermented S. japonicus and Black ginseng were 21.3 and 74.2%, and specific ginsenoside (Rg3, Rg5, and Rk1) contents of fermented Black ginseng was 4.13 mg/g. The ROS (Reactive oxygen species) were eliminated by fermented S. japonicas, Black ginseng, and mixture. The immunophamacological activities of fermented S. japonicus, Black ginseng, and mixture were investigated by determine of stimulatory effects on cytokines release of immune response in immune cell. These fermented S. japonicus, Black ginseng, and mixture induced immune activity, among them, the mixture induced the highest immune activity. These results indicated that the fermented S. japonicus, Black ginseng, and mixture have immune activities and it can be used as a functional material.
Lactobacillus plantarum G1 유래의 β-glucosidase를 이용한 Ginsenoside Rb1으로부터 Rd의 생물전환
김영수 ( Yeong Su Kim ),김도연 ( Do Yeon Kim ),손미례 ( Mi Yae Shon ),박창수 ( Chang Su Park ) 한국키틴키토산학회 2014 한국키틴키토산학회지 Vol.19 No.4
The β-glucosidase from Lactobacillus plantarum G1, isolated from Kimchi, was purified as a single 50 kDa band by ammonium sulfate precipitation, HiTrap Q Hp, and Resource Q column chromatography, with a specific activity of 37 U/mg. The β- glucosidase L. plantarum G1 showed optimum activity at pH 4.0 and 40℃ for ginsenoside Rd production. The β-glucosidase from L. plantarum G1 hydrolyze only outer β-(1,2)-D-glucose linkage at C-20 position in ginsenosides which has narrow substrate specificity for ginsenoside. Under the optimum conditins, the enzyme produced 1 mM of ginsenoside Rd from 1 mM of ginsenoside Rb1 after 120 min, with molar yield of 100%.