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- 저자 : 배지현 ( Jee Hyeon Bae ) (검색결과 2 건)
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난소암세포에서 마이토콘드리아 단백질 p32 (gclqbp)의 세포사멸에 관한 연구
원미애 ( Mi Ae Won ),이선영 ( Sun Young Lee ),김승조 ( Sung Jo Kim ),윤성민 ( Seong Min Yoon ),이강석 ( Kang Seok Lee ),고정재 ( Jeong Jae Ko ),배지현 ( Jee Hyeon Bae ) 대한산부인과학회 2008 Obstetrics & Gynecology Science Vol.51 No.8
목적: 본 연구는 난소암세포주 SK-OV-3세포에서 마이토콘드리아 단백질인 p32가 pro-apoptotic 단백질인 Harakiri와 관계된 세포사멸에 관한 생리적 기능을 알아보고자 하는데 목적이 있다. 방법: p32와 Harakiri의 immunoprecipitation을 통해 상호작용을 확인하였으며, confocal microscopy를 이용하여 면역형광염색을 통해 세포 내 위치를 확인하였다. 난소암세포주인 SK-OV-3세포에서 p32와 Harakiri를 과발현시켜 36시간 후에 형광현미경에 서 GFP가 발현하는 세포를 counting하였다. 결과: p32와 Harakiri는 난소암세포주에서 세포사멸을 일으켰으며, p32와 Harakiri가 세포질 내 마이토콘드리아에 함께 존재함으로써 그 기능을 수행하며 상호작용하고 있음을 알았다. 또한, p32와 Harakiri가 동시에 과발현시켰을 때 세포사멸의 효과가 더 강력함을 알았다. 결론: 본 연구를 통해 난소암세포에서 p32가 새로운 세포사멸에 유도체임을 밝히게 되었으며, p32는 난소암세포 치료제로서 응용도 가능하다고 짐작해 본다. Objective: The purpose of the study was to examine a possible physiological function of p32-mediated apoptosis signaling in ovarian cancer cells. Methods: SK-OV-3 cells were transfected with respective plasmid DNAs, and cell viability was measured. By immunoprecipitation and immunofluorescence staining analysis, we confirmed that p32 interacts with Harakiri in ovarian cancer cells. Results: In SK-OV-3 cells, p32 interacted with Harakiri and both p32 and Harakiri were colocalized in the mitochondria. In addition, overexpression of p32 induced apoptosis of ovarian cancer cells and augmented Harakiri-mediated apoptosis. Conclusion: Our results demonstrated p32 as an apoptosis inducer and helped to provide the better understanding of the function of p32 in ovarian cancer cells and a possibility of p32 in the application of cancer therapeutics
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암세포 Bcl-2 family 유전자 군의 DNA 메틸화 연구
강영섭 ( Young Suep Kang ),이선영 ( Sun Young Lee ),정상근 ( Sang Gun Jung ),한지유 ( Ji You Han ),고정재 ( Jeong Jae Ko ),배지현 ( Jee Hyeon Bae ),나영정 ( Young Junh Na ),이찬 ( Chan Lee ),목정은 ( Jung Un Mock ),김승조 ( Sung 대한산부인과학회 2007 Obstetrics & Gynecology Science Vol.50 No.7
목적: 본 연구는 암세포주와 난소암 조직에서 세포예정사의 핵심 조절 단백질인 Bcl-2 family 유전자의 DNA 메틸화 여부를 암과의 관련성을 밝히는데 그 목적이 있다. 연구 방법: 자궁경부암 세포주인 HeLa, CaSki 그리고 만성골수성 혈액암 세포주인 K562 세포에서 genomic DNA를 추출하여 sodium bisulfite를 통한 cytosine 염기를 uracil로 치환하였다. 치환된 염기서열은 methylation과 unmethylation을 특이적으로 확인할 수 있는 primer를 이용하여 MSP (Methylation Specific PCR)을 수행한 후 암세포에서 Bcl-2 family 유전자의 DNA 메틸화 여부를 판별하였다. 결과: 각각의 세포주에서 antiapoptotic Bcl-2 family 유전자 군인 Mcl-1과 Bcl-2 유전자는 DNA 메틸화가 이루어지지 않은 것으로 관찰되었으며, proapoptotic Bcl-2 family 구성원인 Harakiri 유전자는 DNA 메틸화가 이루어진 것을 확인하였다. 반면, 다른 proapoptotic Bcl-2 family 유전자인 Noxa 유전자는 DNA 메틸화가 이루어지지 않은 것으로 관찰되었다. 또한 난소암 조직에서의 DNA 메틸화 여부를 살펴본 결과 Mcl-1과 Noxa는 세포주에서와 같은 결과를 보였고, Harakiri 유전자의 경우 hypomethylation으로 관찰되었다. 결론: 본 연구는 암세포주와 난소암 조직에서 proapoptotic Bcl-2 family 유전자인 Harakiri와 Noxa의 경우, 유전자 특이적인 DNA의 메틸화가 나타났으며 antiapoptotic 유전자는 DNA의 메틸화가 나타나지 않았다. 이로써 Bcl-2 유전자군과 암세포의 세포사멸을 억제하는 기작을 DNA의 메틸화를 통한 특이 유전자 발현 억제에 의해서 이루어질 수 있다고 사료된다. Objective: Promoter methylation of Bcl-2 family genes in cancer cells were studied to verify possible correlation between DNA methylation pattern of Bcl-2 family members and cancer. Methods: The genomic DNAs were extracted from different cancer cell lines, HeLa, CaSki and K562, and ovarian cancer tissue from patients. The cytosine residues were converted to uracil by sodium bisulfite treatment. MSP (methylation specific PCR) was performed to determine the methylation status of Bcl-2, Mcl-1, Noxa, and Harakiri promoters. Using primers that distinguish methylated DNA from unmethylated DNA after bisulfite modification of DNA, MSP was conducted to observe the methylation pattern of Bcl-2 family genes in different cancer cells. Results: The promoter regions of Bcl-2 family genes including Mcl-1, Bcl-2, and Noxa were not methylated in cancer cells, whereas the proapoptotic Bcl-2 family gene Harakiri was detected as methylated in the cancer cell lines and hypomethylated in the ovarian cancer tissue. Conclusion: The present study demonstrated the differential methylation profiles of Bcl-2 family genes in cancerous cells, which suggests a possible connection between the methylation pattern of some of Bcl-2 family genes and ovarian cancer.
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