GABA 생성능 우수 김치 젖산균 Lactobacillus sp. OPK2-59의 간 기능 개선 효과

배미옥(Mi-Ok Bae),김혜진(Hye-Jin Kim),차연수(Youn-Soo Cha),이명기(Myung-Ki Lee),오석흥(Suk-Heung Oh) 한국식품영양과학회 2009 한국식품영양과학회지 Vol.38 No.11

본 연구는 김치에서 분리한 GABA 생성능이 우수한 젖산균을 이용하여 알코올 투여 흰쥐의 간 기능 개선에 미치는 영향을 조사하였다. 실험동물의 체중 및 식이섭취량, 혈청 및 간 지질농도, 간 질환과 관련된 혈청 및 간 효소 활성, 혈중 에탄올 농도, 항산화 효소 활성을 측정한 결과는 다음과 같다. 체중 및 식이섭취량은 각 그룹간의 유의적인 차이를 나타내지 않았으며 각 기관 무게도 군 간의 유의적인 차이를 나타내지 않았으나 정상식이 섭취 군에 비해 알코올 투여 군에서 체중과 식이섭취량이 약간 감소하는 경향을 보였다. 알코올 섭취로 인해 높아진 혈중 총 콜레스테롤 및 중성지질은 젖산균 GABA 파우더투여 군에서 유의적인 차이를 보이며 정상식이 군과 비슷한 수준으로 낮아졌다. 또한 HDL-cholesterol은 군 간의 차이를 보이지는 않았으나, 알코올투여 군에 비해 높아지는 경향을 보였다. 간의 총콜레스테롤 농도는 군 간의 유의적인 차이는 없었으나, 중성지질 농도는 실험군 간의 현저한 차이를 보이며 알코올 투여 군에 비해 젖산균 GABA 파우더 투여 군에서 정상식이 군과 비슷한 수준으로 낮아졌다. 혈중 효소활성 GOT, GPT는 알코올 투여 군에 비해 젖산균 GABA 파우더투여 군에서 유의적인 차이를 보이며 정상수준으로 낮아졌으며, 간 GOT는 젖산균 GABA 파우더투여로 인해 현저한 차이를 보이며 알코올투여 군에 비해 낮아졌다. GPT는 각 그룹 간 유의적인 차이를 보이지 않았다. 혈중 알코올 농도를 시간별(0분, 30분, 60분, 120분, 240분, 360분)로 측정한 결과 그룹간의 유의적인 차이를 나타내지 않았으나 젖산균 파우더투여 군에서 알코올 대사를 촉진하는 경향을 보였다. 각 그룹간의 간 조직 중 SOD 활성은 알코올투여 군에 비해 젖산균 파우더투여 군과 젖산균 GABA 파우더 투여 군에서 유의적으로 높은 SOD 수준을 나타내었다. 본 실험을 통해 김치에서 분리한 젖산균 OPK2-59 GABA 파우더가 혈중 총 콜레스테롤과 중성지질, 간의 중성지질 농도를 유의적으로 감소시키고, 혈중 GOT, GPT, 간 GOT 효소활성 감소, 알코올대사 촉진, 항산화 효소활성을 상승시키는 효과를 확인하였다. 이는 김치유래의 젖산균 OPK2-59 GABA 파우더가 알코올투여 흰쥐의 지방대사 및 간 기능을 개선시키는데 기여할 수 있음을 보여주는 것으로, 향후 이러한 효능에 대한 심도 있는 기작연구와 더불어 다른 효능에 대한 연구가 기대된다. 또한 본 젖산균을 김치발효용 스타터로 활용하여 기능성식품을 개발하게 된다면 우수한 전통생물자원을 이용하여 국민건강 증진에 크게 기여할 수 있을 것으로 사료된다. This study investigated the effect of improved liver function in rats administered with ethanol by kimchi lactic acid bacteria with high GABA producing capacity. Sprague-Dawley male rats were divided into four groups; normal diet control (NC), ethanol control (EC), ethanol+Lactobacillus sp. OPK2-59 normal powder (EL1), ethanol+Lactobacillus sp. OPK2-59 GABA powder (EL2) and fed for 6 weeks. Analysis showed that there were no significant differences in body weight and feed consumption among the groups during the experimental period. Also, there were no significant differences in organ weight among the groups. The test results showed total cholesterol and triglyceride in the blood concentration that were increased by ethanol administration were significantly lowered in EL2 group. Liver triglyceride was also significantly lowered in the EL2 group compared with the EC group. Serum GOT and GPT, and liver GOT levels were significantly lower in the EL2 group compared with the EC group. Serum ethanol concentration was lower in the EL1 and EL2 groups compared with the EC group. SOD activities in liver were significantly increased in the EL1 and EL2 groups compared with the EC group. These results suggest that Lactobacillus sp. OPK2-59 GABA powder improves lipid and enzyme profiles of rats administered with ethanol.

Localization of Cyclooxygenase Isozymes in Skin Wound Healing in Mouse

고준혁(Jun Hyuk Koh),조백현(Bek Hyun Cho),허탁(Tag Heo),배미옥(Mi Ok Bae),이송은(Song Eun Lee),안규윤(Kyu Youn Ahn),배춘상(Choon Sang Bae),김백윤(Baik Yoon Kim),박성식(Sung Sik Park),남광일(Kwang Il Nam) 대한해부학회 2003 Anatomy & Cell Biology Vol.36 No.2

Cyclooxygenase (COX)-1 and -2 expressions in the incisional wound healing of mouse skin were determined by immunohistochemistry and Western blot analysis. By Western blotting, compared to normal skin, COX-2 activity was increased at days 1, 4, 8, and 12 and was maximal at 4 day after incisional wound of mouse skin whereas COX-1 was barely detectable. In normal skin, COX-1 immunostaining was observed among the basal cells of epidermis whereas COX-2 immunostaining was detected in the more differentiated, suprabasal keratinocytes. At 1~4 days after wound, COX-2 staining was particularly prominent in the inflammatory cells, and at day 8, many macrophage-like cells were stained positively. COX-2 immunoreactive fibroblast, macrophage-like cells, and newly formed vascular endothelial cells were increased in number at 12 days after incision. These data suggest that COX-2 is constitutively expressed, just as is COX-1, in epidermis and is associated with keratinocyte differentiation. In addition, these findings support the well-established role for COX-2, the prostaglandins that they generate, as mediators of inflammatory response. 생쥐 피부상처 치유과정에서 cyclooxygenase(COX)-1과 COX-2의 분포 및 역할을 Western blot 분석과 면역조직화학 염 색을 통하여 알아보고자 하였다. Western blotting 실험에서 COX-2 단백질은 정상 피부에 비해 손상 후 1일부터 증가하여 4일째 최고치를 나타내며 12일 까지 증가한 반면에, COX-1은 검출이 되지 않을 정도의 적은 단백량을 나타내었다. 면역조직화학 염색에서 COX-1은 정상 및 손상 피부의 표피 바닥층과 털주머니의 윗부위에서 드물게 양성 반응을 나 타내었다. COX-2는 정상 및 손상군 표피에서 바닥층 위의 각질세포와 털주머니의 윗부위 및 진피유두에서 양성이었다. 손상 후 1일과 4일째 진피의 염증세포에서 COX-2에 강한 양성 반응을 나타냈고, 8일째는 큰포식세포에서, 12일째는 큰포 식세포, 섬유모세포와 신생혈관 내피세포에서 양성 반응을 보였다. 이상의 결과로서, COX-2가 COX-1과 마찬가지로 표피에 상재하는 구성요소로서 각질세포의 분화를 조절할 것임을 암 시하였고, 진피에서는 염증과 같은 자극에 대한 반응을 매개함을 확인할 수 있었다.

당뇨유발 흰쥐 질 조직에서 Insulin 투여 효과

이상녕(Sang Nyeong Lee),이송은(Song Eun Lee),배미옥(Mi Ok Bae),남광일(Kwang IL Nam),박광성(Kwang-Sung Park),배춘상(Choon Sang Bae),김백윤(Baik Yoon Kim),박성식(Sung Sik Park),안규윤(Kyu Youn Ahn) 대한해부학회 2005 Anatomy & Cell Biology Vol.38 No.3

당뇨병을 가진 여성의 주된 성적문제는 질 윤활작용의 감소와 성적 각성장애이고 이는 질 조직의 섬유화와 관련이 있다고 한다. 본 연구는 streptozotocin (65 mg/kg)투여 당뇨유발 군과 당뇨유발 후 insulin 투여 군 흰쥐에서 질 조직의 변화를 조직화학, Western분석 및 면역조직화학 기법을 통해 관찰하고자 하였다.평균 혈당농도는 대조군에서 79±16 mg/dL, 당뇨유발 군에서 453±188.4 mg/dL 그리고 insulin 투여군에서 56.7±20.6 mg/dL 였다. H-E 소견에서 대조군의 질벽은 6~11층의 중층편평상피, 민무늬근육, 결합조직 및 다수의 혈관들로 구성되어 있었다. 당뇨유발 군에서는 중층편평상피 층이 2~6층으로 감소하였으며 또한 민무늬근육과 혈관의 수와 크기도 감소하였다. Insulin 투여 군은 대조군의 소견과 유사하였다. 대조군의 Masson’s trichrome 염색소견에서는 보라색으로 염색되는 민무늬근육이 상당량 관찰되었고 청색으로 염색되는 아교섬유는 규칙적으로 분포되었다. 당뇨유발 군에서는 아교섬유가 증가되어 성긴결합조직이 치밀결합조직으로 변하였으며, 아교섬유의 배열도 불규칙하였다. Insulin 투여 군은 대조군의 소견과 유사하였다. Western분석 결과 당뇨유발 군에서의 TGF-β1의 발현은 현저히 증가하였으나 Ec-NOS의 발현은 감소하였다. TGF-β1에 대한 면역양 성 반응은 섬유모세포와 아교섬유에서 관찰되었고 당뇨유발 군에서 Western분석 소견과 같이 현저히 증가하였으며 대조군과 insulin 투여 군에서는 미약하였다. Ec-NOS에 대한 면역양성 반응은 혈관의 내피세포에서 관찰되었으며, 면역반응성은 Western분석 소견과 같이 대조군과 insulin 투여 군에서는 현저하였으나 당뇨유발 군에서는 상당히 감소하였다. 대조군과 insulin 투여 군의 estrogen receptor α에 대한 면역양성 반응은 중층편평상피의 바닥층과 중간층, 민무늬근육세포 및 신경에서 관찰되었으나 당뇨유발 군에서는 중층편평상피의 중간층, 민무늬근육세포 및 신경에서만 관찰되고 반응성도 감소하였다. 이상의 결과로 미루어 당뇨유발 흰쥐 질 조직의 섬유화는 TGF-β1, NOS 및 estrogen 등과 관련이 있을 가능성을 제시하였으며, 이로 인한 당뇨 여성의 성기능 장애는 혈당을 조절함으로써 예방할 수 있음을 암시하였다. The most commonly reported sexual problems in diabetic women are sexual arousal disorder and a lack of vaginal lubrication. The aims of this study were to investigate the vaginal structural changes and expressions of TGF-β1, Ec-NOS and estrogen receptor α by histochemistry, immunohistochemistry and Western blot analysis in diabetic and insulin-treated diabetic rats. The mean blood glucose levels were significantly increased in the diabetic rats (453±188.4 mg/dL) compared to the control group (79±16 mg/dL) and insulin-treated diabetic rats (56.7±20.6 mg/dL). The vaginal wall in control rat showed 6~11 layered stratified squamous epithelial lining and submucosal smooth muscle, connective tissue and vasculatures. In diabetic rat, the vaginal epithelium was reduced to 2~6 layers and the submucosal vasculatures were decreased in size and number. Collagen fibers were increased and irregularly distorted arrangement. Insulin-treated diabetic rat showed similar morphologic features as control rat. In diabetic rat, TGF-β1 expression was upregulated by 1.65 times and Ec-NOS expression was 40% downregulated compared to control and insulin-treated diabetic rats in Western blot analysis. In control and insulin-treated diabetic rats, TGF-β1 immunoreactivity was detected in fibroblasts and the collagen fibers, Ec-NOS immunoreactivity in the endothelial cells of blood vessels, and estrogen receptor α immunoreactivity in the basal and intermediate cell layers of stratified squamous epithelium, smooth muscle fibers, and nerve fibers. In diabetic rat, expression of TGF-β1, Ec-NOS, and estrogen receptor α was exhibited comparable cellular patterns of labeling, but signal intensity was increased in TGF-β1 and decreased in Ec-NOS and estrogen receptor α. These results suggest that vaginal tissue fibrosis in diabetes mellitus may be caused by altered expression of TGF-β1, NOS and estrogen. It also implies that sexual arousal disorder and lack of vaginal lubrication in the diabetic women could be protected or delayed by controlling blood glucose levels.

저칼륨혈증 신장에서 HCO₃- 조절에 관한 연구

김지혜(Ji Hye Kim),조혜정(Hye Jung Cho),배미옥(Mi Ok Bae),박정진(Jeong Jin Park),안규윤(Kyu Youn Ahn) 대한해부학회 2004 Anatomy & Cell Biology Vol.37 No.4

산-염기 평형장애나 전해질 불균형은 신요세관에서 HCO₃- 재흡수가 증가되거나 감소되는 것과 연관이 있다고 알려져 있다. 칼륨 제한시 대사성 알칼리증을 유발시킨다는 것은 연구자간에 일치하나 이와 관련된 Na+/H+ exchanger (NHE-3) 와 Na+/ HCO₃- cotransporter (NBC)에 대한 연구는 주로 기능적인 것에 국한되어 있고 또한 연구자 간에도 차이가 있다. 본 연구는 흰쥐 신장에서 칼륨 제한식이 시기에 따라 NHE-3와 NBC-1의 신장내 발현 및 분포의 변화를 Western 분석과 면역조직화학적 방법으로 관찰하였다. Western 분석 소견에서 NHE-3 단백은 83 KDa 정도이고 정상 식이군에서 상당량 발현되었으며 칼륨 제한 식이군에서 정상 식이군에 비해 유의한 증가를 보였다. NBC-1 단백은 110 KDa 정도이고 정상 식이군에 비해 칼륨 제한 식이군에서 증가하였으며 특히 칼륨 제한 식이 1주에서 유의한 증가를 보였다. 면역조직화학 소견에서 NHE-3 단백은 토리쪽세관 상피세포 중 S3 부위에서 강하게 발현되었고, S1, S2 부위에서는 중등도로 발현되었다. 면역반응성은 토리쪽 세관세포의 첨부세포막과 솔가장자리에서 관찰되었다. 칼륨 제한 식이군에서 면역반응 부위는 정상 식이군과 차이가 없었으나 면역반응성은 Western 분석 소견에서와 같이 현저히 증가하였다. NBC-1 단백은 토리쪽세관 S1, S2 부위에서는 강하게 발현되었으나, S3 부위에서는 발현되지 않았다. 면역반응성은 토리쪽세관세포의 기저외세포막에서 관찰되었다. 칼륨 제한 식이군에서 면역반응 부위는 정상 식이군과 차이가 없었으나 면역반응성은 Western 분석 소견에서와 같이 칼륨제한 식이 1주에서 현저히 증가하였다. 이상의 소견은 칼륨 제한시 신장 토리쪽세관에서 NHE-3와 NBC-1의 단백 발현 증가가 혈액내로 HCO₃- 의 재흡수를 항진시켜 대사성 알칼리증을 유지할 것으로 생각되었다. A number of acid-base or electrolyte disorders are associated with decreased or increased HCO₃- reabsorption in the renal tubules. There has been a general agreement that potassium depletion induces and maintains metabolic alkalosis in rats. However, many researchers have approached such issue only from functional studies to investigate Na+/H+ exchanger (NHE-3) and Na+/HCO₃- cotransporter (NBC) activity which closely relates to potassium depletion. In addition the results obtained vary according to their researchers. Thus the present study was employed Western blot analysis and immunohistochemistry together, to examine the alterations of expression and distribution of NHE-3 and NBC-1 with reference to HCO₃- reabsorption in the kidneys of rats fed potassium free diets according to the periods. Western blot analysis demonstrated that NHE-3 protein, ~83 kDa at molecular mass, was abundantly expressed in normal group. All potassium-depleted groups showed significantly increased NHE-3 protein compared to normal group. NBC-1 protein, ~110 kDa at molecular mass, was moderately expressed in normal group. All potassium-depleted groups had much higher amounts of the protein than normal group. There was a highly increased amount of NBC-1 protein especially in K-depleted 1 week group. Immunohistochemistry showed positive immunoreactivity of NHE-3 in the apical membranes and brush borders of proximal renal tubule cells. Its reactivity was most prominent in the S3. S1 and S2 had moderate immunoreactivity. Potassium-depleted groups had an identical pattern of cellular labeling of NHE-3 protein compared with that of normal group. However the signal intensity of NHE-3 protein in potassium-depleted groups was much higher than that of normal group. Immunoreactivity of NBC-1 was observed exclusively in the basolateral plasma membranes of proximal tubule cells. There was a strong reactivity in the S1 and S2, whereas S3 did not show any reactivity. Potassium-deprived rats exhibited an identical pattern of cellular labeling of NBC-1 protein compared with that of normal rats. However, the signal intensity of NBC-1 protein was markedly increased in potassium-deprived rats. These results suggest that increased NHE-3 and NBC-1 expression resulted from potassium depletion in the renal proximal tubules, enhances HCO3- reabsorption and consequently maintains metabolic alkalosis.

마우스 복강내 대식세포에 대한 Vibrio vulnificus Hemolysin의 세포독성

임인수(Ihn Soo Im),이시은(Shee Eun Lee),김설(Seol Kim),배미옥(Mi Ok Bae),이준행(Joon Haeng Rhee),신부안(Boo Ahn Shin),정선식(Sun Sik Cung),류필열(Phil Youl Ryu) 大韓微生物學會 2000 大韓微生物學會誌 Vol.35 No.3