비소세포폐암주에서 산소 농도에 따른 미세 배양 환경과 세포 증식능

신종욱 ( Jong Wook Shin ),전은주 ( Eun Ju Jeon ),곽희원 ( Hee Won Kwak ),송주한 ( Ju Han Song ),이영우 ( Young Woo Lee ),정재우 ( Jae Woo Jeong ),최재철 ( Jae Cheol Choi ),김재열 ( Jae Yeol Kim ),박인원 ( In Won Park ),최병휘 ( By 대한결핵 및 호흡기학회 2007 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.63 No.3

배경 및 목적: 암세포는 빠른 증식 속도로 인하여 상대적인 저산소증에 노출되면서 비정상적인 종양 혈관을 형성하여 치명적인 병인을 형성한다. 저산소증에서의 암세포 내의 유전자 표현을 연구하는 것은 병인의 규명과 나아가 치료에 결정적인 단초를 제공할 수 있다. 이에 본 연구에서는 체외 배양한 비소세포폐암의 증식과 저산소증 상태에 대한 연구를 시행하였다. 재료 및 방법: 비소세포폐암주인 A549를 RPMI 배지에서 계대 배양하였다. 저산소 유사 상태는 Modular Incubator Chamber(MIC-101)을 이용하였고 5% 이산화탄소와 95% 질소 혼합 가스를 5분간 공급하여 저산소 상태를 만들었으며 세포 배양액을 채취하여 혈액가스분석기(Blood Gas Analyzer ABL 725)로 세포 배양 상태를 측정하였다. 대조군으로 5% CO2와 멸균한 대기 공기 95%가 혼합된 가스를 사용하였다. 세포의 증식 상태는 MTT 방법을 실시하였다. 결과: 1. MIC-101을 이용하였을 때, 무산소혼합가스를 투여 후 30분에 50%의 산소 분압저하를 확인하였으며, 대기 가스에 의해 산소농도를 회복하는 것을 볼 수 있었다. 2. 무산소 혼합가스로 정화(purging)를 하면 산소의 분압을 더 낮출 수 있었다. 3. 저산소 상태에서 세포 배양액 내에는 pH 감소, 젖산 증가, 포도당의 감소 와 같은 미세환경이 변하였다. 4. 세포배양액에 따라 저산소에 의해 유도되는 포도당 저하에 차이가 있었다. 5. 비소세포폐암주는 저산소에 의해 증식능이 억제되었다. 결론: 저산소 상태는 세포 배양액 내 포도당 농도의 감소, 젖산의 증가, pH의 감소 등 세포 배양 미세 환경을 변화시키며, 비소세포폐암세포는 증식이 억제된다. 저산소는 미세 환경 변화와 함께 직접적으로 그리고 간접적으로 비소세포의 증식능에 영향을 미친다. Background: Abnormal angiogenesis can induce hypoxia within a highly proliferating tumor mass, and these hypoxic conditions can in turn create clinical problems, such as resistance to chemotherapy. However, the mechanism by which hypoxia induces these changes has not yet been determined. Therefore, this study was conducted to determine how hypoxia induces changes in cell viability and extracellular microenvironments in an in vitro culture system using non-small cell lung cancer cells. Methods: The non-small cell lung cancer cell line, A549 was cultured in DMEM or RPMI-1640 media that contained fetal bovine serum. A decrease in the oxygen tension of the media that contained the culture was then induced in a hypoxia microchamber using a CO2-N2 gas mixture. A gas analysis and an MTT assay were then conducted. Results: (1) The decrease in oxygen tension was checked the anaerobic gas mixture for 30 min and then reoxygenation was induced by adding a 5% CO2-room air gas mixture to the chamber. (2) Purging with the anaerobic gas mixture was found to decrease the further oxygen tension of cell culture media. (3) The low oxygen tension resulted in a low pH, lactic acidosis and a decreased glucose concentration in the media. (4) The decrease in glucose concentration that was observed as a result of hypoxia was markedly different when different types of media were evaluated. (5) The decrease in oxygen tension inhibited proliferation of A549 cells. Conclusion: These data suggests that tumor hypoxia is associated with acidosis and hypoglycemia, which have been implicated in the development of resistance to chemotherapy and radiotherapy. (Tuberc Respir Dis 2007; 63: 242-250)

전해질막이 없는 연료전지의 연료 이용률 향상을 위한 수치적 연구

박인원(In-won Park),윤준용(Joon-yong Yoon),변성준(Sung-joon Byun),신명섭(Myung-seob Shin) 한국유체기계학회 2009 유체기계 연구개발 발표회 논문집 Vol.2009 No.-

주변부 포도막염의 임상분석

박인원(In Won Park),정흠(Hum Chung) 대한안과학회 1989 대한안과학회지 Vol.30 No.4

tRNA 의 화학적 변형에 관한 연구

박인원,이강렬,남정이,Park, In-Won,Lee, Kang-Ryul,Nam, Jeong-Ee 생화학분자생물학회 1974 한국생화학회지 Vol.7 No.1

At $37^{\circ}C$, phenylglyoxalation of yeast tRNA proceeds for two hours and no further reaction could be detected. Number of guanine residues modified after two hours' phenylglyoxalation is about six moles per tRNA molecule. Twenty-four hours' reaction produces at most seven residues of modified guanine. As the extent of tRNA modification increased, amino acid acceptor activity of phenylalanine tRNA decreased. Since the phenyl glyoxal modifies tRNA's no more than six residues of their guanine residues after two hours' reaction, phenylglyoxalation might be a recommendable means for the modification of exposed guanine residues on tRNA molecules. $37^{\circ}C$에서 효모 tRNA의 구아닌 잔기에 대한 페닐글리옥실화반응은 2시간이 지난 후에는 더 이상 진행되지 않았다. 변형된 구아닌 잔기의 수는 2시간 반응에서 tRNA 한 분자 당 6개이었다. 24시간 반응시켰을 때는 변형된 잔기의 수는 7개가 되었다. tRNA의 변형의 정도가 클 수록 tRNA의 페닐알라닌에 대한 수용능력이 감소된다. tRNA를 페닐글리옥살과 24시간 작용시켰을 때 구아닌 잔기가 6개 이상 변형되지 않으므로 페닐글리옥살은 tRNA에 있어서 노출된 구아닌 잔기들을 변형시키는 적당한 시약으로 생각한다.

Effects of Thermal Neutron-Irradiation on Glyoxylate Cycle in Germinating Soybean Seeds

박인원,이근배,Park, In-Won,Lee, Keun-Bai 생화학분자생물학회 1974 한국생화학회지 Vol.7 No.1

열중성자가 발아하는 콩에 있어서의 glyoxylate cycle의 두 주요 효소인 말산 합성 효소와 이소시트르산 분해효소 들의 활성도에 미치는 영향을 연구하였다. 열중성자로 조사한 후에 축합효소의 활성도는 증가한다. 그러나 아세트산-2-$^{14}C$의 말산 및 글리옥실산으로의 결합이 감소한다. 이것은 열중성자 조사로 언하여 이소시트르산 분해 효소 및 말산 합성 효소의 활성도가 감소됨을 나타낸다. The effects of thermal neutron-irradiation on the activities of the two key enzymes in glyoxylate pathway, i.e. malate synthetase and isocitritase in the germinating soybean seeds were studied. The activity of condensing enzyme has shown an increased activity after neutron-irradiation. Decreased tendency of incorporation of acetate-2-$C^{14}$ into malate and glyoxylate after neutron-irradiation suggests the activities of both isocitritase and malate synthetase were inactivated by neutron-irradiation.

Fractionation of Histidine t-RNA of Yeast by Steady State Distribution

박인원,Park, In-Won 생화학분자생물학회 1971 한국생화학회지 Vol.4 No.2

정류식 분배법으로 효모 히스티딘 t-RNA 를 분별하였다. 히스티딘 t-RNA 의 분배율이 1이 될 수 있는 용매를 선택하여 그 분배에 사용하였다. 1060 회수의 전달 후의 t-RNA의 히스티딘 수용 능력은 출발 시료에 비하여 11 배로 증가하였다. 200 회수의 전달 후에 히스티딘 t-RNA 는 1개의 다량 성분과 2개의 미량 성분으로 분리된다. The technique of steady state distribution has been used to fractionate the histidine t-RNA of yeast. A solvent system has been chosen in which the partition coefficient of histidine t-RNA becomes close to 1. Histidine acceptor activity of the t-RNA increased 11 fold that of original mixture of t-RNA after 1060 transfers of steady state distribution. Three histidine t-RNA peaks have appeared after 200 transfers: One major and two additional minor peaks.

가래는 왜 생기는가?

박인원,Park, In-Won 한국건강관리협회 1995 건강소식 Vol.19 No.10

Chemical Modification of Guanylic Acid Residues of Unfractionated Yeast t-RNA

박인원,Park, In-Won 생화학분자생물학회 1970 한국생화학회지 Vol.3 No.2

구아니린산의 글리옥살화반응은 $37^{\circ}C$에서 2시간 이내로 완성된다. 글리옥살화된 구아니린산의 흡수스펙트럼은 pH 1에서 다음과 같은 값들을 가진다. ${\lambda}_{max}=25\;3m{\mu}$, ${\lambda}_{min}=227\;m{\mu}$, ${\epsilon}_{260}=11.00{\times}10^3$, ${\epsilon}_{253}=12.33{\times}10^3$; 방출스펙트럼은 ${\epsilon}_{max}=3475{\AA}$의 값을 가진다. 구아니린산의 페닐글리옥살화는 여러 형태의 첨가생성물을 생성한다. 그러므로 페닐글리옥살은 구아니린산 잔기의 수식제로서는 적합하지 않다. 수식된 t-RNA의 $T_m$은 10시간 처리된 것이 $81^{\circ}C$이고 34.5시간 처리된 것이 $80^{\circ}C$이다. 반응시간이 10시간까지 계속되는 동안 글리옥살화된 t-RNA의 히스티딘 수용능력은 급격히 감소한다. 페닐글리옥살화된 t-RNA도 아마노산 수용능력이 감소되는 경향을 보인다. $4^{\circ}C$에서의 구아니린산 잔기의 글리옥살화는 시간에 정비례하여 진행된다. $4^{\circ}C$에서 1분간 및 30분간 반응시키면 각각 0.17 몰 및 1.44 몰의 구아닌 염기가 수식된다. 그러므로, t-RNA의 안티코오돈 고리의 구아닌 염기를 글리옥살로 수식하는 최적의 조건은 저온($4^{\circ}C$)과 짧은 반응시간이다. Glyoxalation of guanylic acid completes within 2 hrs, at $37^{\circ}C$. The absorption spectrum of glyoxalated guanylic acid at pH 1 has ${\lambda}max=253\;m{\mu}$, ${\lambda}min=227\;m{\mu}$, ${\epsilon}_{260}=11.00{\times}10^3$, ${\epsilon}_{253}=12.33{\times}10^3$; the emission spectrum has $E_{max}=3475\;{\AA}$. Phenylglyoxalation of guanylic acid produces several forms of adducts. Therefore, phenylglyoxal is not recommendable as a modifying agents of guanylic acid residues. $T_m$'s of modified t-RNA for 10 hrs. and 34.5 hrs. are $81^{\circ}C$ and $80^{\circ}C$ respectively. Glyoxalation of t-RNA causes rather sharp decrease in histidine acceptor activity up to 10 hrs. There occurs no further considerable change in histidine acceptor activity after 10 hrs. glyoxalation. Phenylglyoxalated t-RNA also shows a tendency of decrease in histidine acceptor activity. Glyoxalation of guanylic acid residues at $4^{\circ}C$ proceeds in proportion to the length of time, number of guanine bases modified under this condition are 0.17 moles and 1. 44 moles after 1 min. and 30 min. of reaction respectively. Therefore, the most suitable condition for the glyoxalation of guanine residues of the anticodon loops of t-RNA is low temperature ($4^{\circ}C$) and short reaction time (10 min. to 30 min.).

정류식 분배법에 의한 효모 히스티딘 t - RNA 의 분별

박인원 ( In Won Park ) 생화학분자생물학회 1971 BMB Reports Vol.4 No.2

The technique of steady state distribution has been used to fractionate the histidine t-RNA of yeast. A solvent system has been chosen in which the partition coefficient of histidine t-RNA becomes close to 1. Histidine acceptor activity of the t-RNA increased 11 fold that of original mixture of t-RNA after 1060 transfers of steady state distribution. Three histidine t-RNA peaks have appeared after 200 transfers: one major and two additional minor peaks.

불순한 국산 32P - H3PO4 의 정제와 ( γ - 32P ) - ATP 의 합성에의 응용

박인원,정태능 ( In Won Park,Tae Neung Johng ) 생화학분자생물학회 1984 BMB Reports Vol.17 No.1

The purpose of this research was, primarily, to develop the methods for the purification of the crude ^(32)P-H₃PO₄ produced by the Korean Energy Research Institute to biochemical purity, and then, to apply the purified ^(32)P-H₃PO₄ for the synthesis of [γ-^(32)P]-ATP. The major impurities contained in the crude solution of ^(32)P-H₃PO₄ were sulfate and sodium ions. These ions were eliminated from the crude ^(32)P-H₃PO₄ solution by employing the combined column consisting of two layers of cation-and anion-exchangers. In this way, the crude ^(32)P-H₃PO₄ was purified to biochemical purity. The recovery of ^(32)P-H₃PO₄ was about 70%. The purified ^(32)P-H₃PO₄ thus obtained was sufficiently pure for the synthesis of [γ-^(32)P]-ATP, which was effectively used for the labeling of the 5`-OH termini of RNA fragments.