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불로초(不老草)가 생산(生産)하는 Cellulase의 효소학적(酵素學的) 성질(性質)
도재호,김상달,Do, Jae-Ho,Kim, Sang-Dal 한국균학회 1986 韓國菌學會誌 Vol.14 No.1
Ganoderma lucidum의 개체배양물(個體培養物)로 부터 얻은 cellulase를 ammonium sulfate fractionation으로 조정제(組精製)한 후(後) 이 효소(酵素)의 기본적(基本的)인 특성(特性)을 조사(調査)하였다. 이 효소(酵素)의 최적작용(最摘作用) pH와 온도(溫度)는 각각 pH $4.0{\sim}7.0$사이와 $50^{\circ}C$ 이하(以下)의 온도(溫度)에서는 비교적(比較的) 안정(安定)하였다. CMC-2Na분해(分解)에 대한 activation energy는 6.2 Kcal/mole이었다. $Mg^{++},\;Co^{++}$에 의해서 효소활성(酵素活性)이 증가(增加)되었으나 $Hg^{++}$에 의해서는 저해(沮害)되었다. 한편 본(本) 효소활성(酵素活性)은 SDS에 의해서 약 27%저해(沮害)된 것을 제외(除外)하고는 여러가지 chemical reagents에 의해서는 아무런 영향(影響)을 받지 않았다. 본(本) 효소(酵素)의 CMC-2Na에 대한 Km치(値)는 2.4 mg/ml였으며 CMC-2Na 이외(以外)에 천연(天然) cellulose에도 작용(作用)을 하였다. A cellulose-degrading enzyme from Ganoderma lucidum was partially purified by ammonium sulfate precipitation and its enzymatic properties were studied. The enzyme had an optimum pH for activity at 4.0, and its stability range was pH $4.0{\sim}7.0$. The optimum temperature was $55^{circ}C$ and the enzyme retained 80% original activity after heated at $50^{\circ}C$ for 60 min. The activation energy of the enzyme for CMC degradation was caculated and found to be 6.2 Kcal/mole. The enzyme was activited by the addition of $Co^{++},\;Mn^{++}$, but slightly inactivated by $Hg^{++}$. Various enzyme inhibitors and chemical reagents did not affect the enzyme activity. The enzyme acted on native celluose as well as CMC. The Michaelis constant for CMC was calculated to be 2.4 mg glucose ep/ml.
김도순(Do-Soon Kim),박정은(Jueng-Eun Park),서권일(Kwon-Il Seo),고성룡(Sung-Ryong Ko),이종원(Jong-Won Lee),도재호(Jae-Ho Do),이성태(Sung-Tae Yee) 고려인삼학회 2006 Journal of Ginseng Research Vol.30 No.3
본 연구에서는 정관장 홍삼의 물(water) extract, 식용발효 주정 extract 및 홍삼 추출물로부터 분리 제조한 crude saponin을 이용하여 면역반응을 매개하는 수지상세포의 활성효과에 대하여 알아보았다. 그 결과 홍삼시료 중, crude saponin 100 ㎍/㎖을 처리하였을 때 수지상세포의 세포표면분자인 MHC class II, CD40, CD80, CD86의 발현이 증가하였으며, phagocytosis는 감소하였다. 또한 홍삼시료를 처리한 수지상세포와 allogeneic T세포를 함께 배양하였을 때, 홍삼시료의 물 extract, 식용발효주정 extract, crude saponin 모두 allogeneic T세포의 증식반응을 유도하였고, IL-2와 IFN-γ의 생산량을 증가시키는 것을 확인하였다. 또한 CD4? syngeneic T세포와 CD8? syngeneic T세포의 반응에서도 T세포의 증식반응을 높게 유도하였으며, CD4? syngeneic T세포에서 IL-2와 IFN-γ의 생산량을 증가시키고, CD8? syngeneic T세포에서는 IFN-γ 생산량을 증가시키는 것을 확인하였다. 이상의 결과로 crude saponin의 경우 수지상세포의 세포표면 공동자극분자의 발현을 유도하고 성숙을 유도함으로써 T세포의 활성을 증진시키는 것으로 생각되며, 물 extract와 식용발효주정 extract는 crude saponin과는 다른 기작으로 T세포 활성화를 유도하는 것을 알 수 있었다. 따라서 실험에 사용한 홍삼시료, 즉 물 extract, 식용발효주정 extract, crude saponin 모두 수지상세포의 활성을 유도하는 물질로써 암항원 특이적 T세포 활성화를 이용한 항암치료에 이용할 수 있는 가능성이 있다고 사료된다. Ginseng is a medicinal herb widely used in Asian countries. Dendritic cells(DCs) play a pivotal role in the initiation of T cell-mediated immune responses, making them an attractive cellular adjuvant for use in cancer vaccines. In this study, we examined the effects of Red-ginseng(water extract, edible and fermented ethyl alcohol extract, crude saponin) on the DCs phenotypic and functional maturation. Immature DCs were cultured in the presence of GM-CSF and IL-4, and the generated immature DCs were stimulated by water extract, edible and fermented ethyl alcohol extract, crude saponin and LPS, respectively, for 24hours. The expression of surface co-stimulatory molecules, including MHC(major histocompatibility complex) class II, CD40, CD80 and CD86, was increased on DCs that were stimulated with crude saponin, but antigen-uptake capacity was decreased. The antigen-presenting capacity of Red-ginseng extracts-treated DCs as analyzed by allogeneic T cells proliferation and IL-2, IFN-γ production was increased. Furthermore, CD4? and CD8? syngeneic T cell(OVA-specific) proliferation and IFN-γ production was significantly increased. However, CD4? syngeneic T cell secreted higher levels of IL-2 in responding but not CD8? syngeneic T cell. These results indicate the immunomodulatory properties of Red-ginseng extracts, which might be therapeutically useful in the control of cancers and immunodeficient diseases through the up-regulation of DCs maturation.