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- 저자 : 김소미(Somi K. Cho) (검색결과 2 건)
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제주 자생 해양 녹조류와 갈조류 추출물로부터의 항고혈압 활성
차선희(Seon?Heui Cha),안긴내(Gin?Nae Ahn),허수진(Soo?Jin Heo),김길남(Kil?Nam Kim),이기완(Ki?Wan Lee),송춘복(Choon Bok Song),김소미(Somi K. Cho),전유진(You?Jin Jeon) 한국식품영양과학회 2006 한국식품영양과학회지 Vol.35 No.3
제주 연안에 서식하는 해양 녹조류와 갈조류의 항고혈압 활성을 알아보기 위해 해조류로부터 메탄올과 물을 이용하여 상온(20℃)과 70℃에서 각각 4가지 종류의 추출물을 제조하여 스크리닝하였다. 그 결과, 녹조류에서는 비교적 낮은 ACE 저해활성을 보였으나, 갈조류에서는 70ME 잇바디괭생이모자반, 말미역, 바위주름, 넓패, 톳, 다시마 및 70AE 감태에서 ACE 저해활성이 높게 나타났다. 또한 70AE 감태의 가수분해물은 2.33~3.56 ㎍/mL의 IC50값을 보여 매우 높은 ACE 저해활성을 확인할 수 있었다. 이는 해조류의 ACE 저해활성이 수용성 추출물뿐만 아니라 메탄올 추출물에서도 나타나는 것은 해조류 유래 fucoxanthin, phlorotannin 및 polyphenol계 화합물 등에 의한 영향도 있을 것으로 사료된다. This study was conducted to screen in vitro angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitory activities of methanol (MeOH) and aqueous extracts which were prepared by four different extractions-80% methanol extracts (ME) at 20℃ and 70℃, respectively and aqueous extracts (AE) at both temperatures with the residue of the MEs-of ten marine green algae and nineteen brown algae collected along Jeju coast of Korea. Most marine brown algae extracts showed higher capacities than those of marine green algae in ACE inhibitory activity. Particularly, 70℃ MeOH extract (70ME) of Hizikia fusiforme showed the strongest inhibition activity (about 87%) among all the extracts. Also, 70 MEs of Enteromorpha linza, Ishige sinicola, Laminaria ochotensis, Petrospongium rugosum, Sagrassum horneri, Undaria pinnatifida and 20℃ MeOH extracts (20ME) of Myagropsis myagroides, Petrospongium rugosum, 20℃ aqueous extracts (20AE) of Codium contractum, Enteromorpha compressa, and 70℃ aqueous extracts (70AE) of Ecklonia cava, Petrospongium rugosum showed moderate ACE inhibitory activities more than 50% and the other extracts exhibited weak activities. On the other hand, E. cava had the best ACE inhibitory activity among 70AEs. This indicates that 70AE of E. cava contains potential anti?ACE macromolecular. We tried to proteolytic digest 70AE of E. cava to induce production of anti?ACE peptides from E. cava 70AE. The enzymes used are five proteases including Kojizyme, Flavourzyme, Neutrase, Alcalase, and Protamex, which are food grade?commercial enzymes from Novo Co. Flavourzyme?digest of E. cava 70AE showed the highest inhibitory activity about 90%. And the five different enzymatic digests of the E. cava 70AE ranged from 2.33 to 3.56 ㎍/mL, respectively in IC50 values of anti?ACE activity.
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유기인계 및 카바메이트계 농약의 고감수성 아세틸콜린에스테라이즈의 대량생산
김영미,조문제,김소미 한국응용생명화학회 2003 Applied Biological Chemistry (Appl Biol Chem) Vol.46 No.4
본 실험에서는 acetylcholinesterase(AChE, EC 3.1.1.7)를 이용한 간이 잔류농약 검사법에 필요한, 유기인계 및 카바메이트계 살충제에 대한 감수성이 증가된 AChE(MAChE)를 baculovirus를 이용하여 대량으로 생산하는 시스템을 구축하고 생산된 효소의 특성을 관찰하였다.한라산에서 채취한 초파리에서 AChE의 cDNA를 합성한 수 PCR을 이용하여 AChE의 lipid anchor 부분을 제거하고 site directed mutagenesis에 의해 E107Y, F368L, L408F의 염기서열을 변화시켜 재조합된 MAChE cDNA를 합성하였고 baculovirus vector에 삽입하여 대량생산을 시도하였다. 대량 증식에 필요한 조건으로 감염횟수가 네 번일 때, 그리고 세포수가 2×10^(6) cell/㎖일 때 세포의 증식과 효소의 활성이 극대화됨을 알 수 있었다. His tag을 붙여 Ni-NTA affinity column을 이용하여 MAChE를 정제하였으며, 정제된 효소는 실험조건하에서는 pH(3-10)와 온도(20-50℃)의 변화에 영향을 받지 않았다. 농약 추출액으로 methanol을 사용했을 때가 ethanol을 사용할 때 보다 효과적임을 알 수 있었다. 대표적인 유기인계와 카바메이트계 농약에 대한 저해율을 조사한 결과 재조합된 MAChE는 대만의 집파리 및 변형되지 않은 AChE에 비하여 전반적으로 농약에 대한 감수성이 높은 것으로 나타났다. For the simple rapid bioassay of organophosphorus and carbamate pesticide residues, a mass-production system of acetycholinesterase (AChE, EC 3.1.1.7, MAChE) using baculovirus and insect cell culture was constructed. The cDNA for AChE was synthesized from Drosophila melanogaster in Halla Mountain, the lipid anchor tail was removed by PCR and was used for the site-directed mutagenesis of three amino acid residues (E107Y, F368L, L408F). The mutated cDNA was inserted into the baculovirus vector and expressed in insect cells. Maximum cell growth and enzyme activity were reached when the cells (2×10^(6) cell/㎖) were infected four times at four-day-intervals. His-tag containing MAChE was prufied using Ni-NTA column and used for characterization. The activity was maintained under various pHs (3-10) and temperatures (20-50℃) under experimental conditions. As an extractionn solution for pesticides, methanol is more effective than ethanol. Against major organophosphate and carbamate pesticides, the MAChE showed better sensitivity than AChE and AChE from housefly (Taiwan).
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